华南主要野生蔬菜的脂肪酸成分分析

本实验以华南主要野生蔬菜守宫木、土人参、一点红、白仔菜、紫背菜、鳄嘴花、藤三七、塘葛菜为材料,并以华南特产蔬菜菜心为对照,对8种野生蔬菜的脂肪酸成分进行了分析.结果表明:8种野菜共检出十四酸、软脂酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、二十二酸和二十四酸共9种脂肪酸,但不同野菜之间的脂肪酸组成与含量差异极大.8种野菜的饱和脂肪酸的总量都高于菜心,饱和脂肪酸种类最多的是藤三七,含4种.不饱和脂肪酸的变化与饱和脂肪酸相反,8种野菜都低于菜心,但其油酸、亚油酸远高过菜心.菜心富含亚麻酸,但不含亚油酸.可见8种野菜油营养价值较高.     

芸薹属蔬菜再生体系研究进展

再生体系的建立对芸薹属蔬菜重要功能基因验证和重要遗传材料保存扩繁等具有重要意义。该文综述了影响芸薹属蔬菜(白菜类、甘蓝类和芥菜类)再生体系的主要因素:基因型、植物激素(NAA、BAP等)和外源添加物(硝酸银、抗坏血酸等),比较了不同影响因素对芸薹属蔬菜再生体系建立的影响差异。基因型方面表现为白菜类(AA基因组)较甘蓝类(CC基因组)和芥菜类(BB基因组)难再生。植物激素方面表现为适于芸薹属蔬菜预培养的激素一般为2,4-D和NAA+6-BA,分化培养一般为NAA+6-BA,且即使为同一类蔬菜,不同品种所需的激素浓度也不一致。外源添加物方面,硝酸银为白菜类蔬菜再生体系所必需,其也能促进甘蓝类和芥菜类的不定芽分化,但并不为两者所必需;低浓度的抗坏血酸可促进白菜类不定芽的分化和甘蓝类愈伤组织的形成。芸薹属蔬菜再生体系诱导的分子机理研究需进一步加强,同时不同芸薹属蔬菜再生条件差异产生的机理也需要深入研究。     

芸薹属植物基因组学研究进展

芸薹属是十字花科植物300多个属中最为重要的一个属,是我国栽培面积最大的蔬菜作物。拟南芥和芸薹属在十字花科中两者的亲缘关系最近,通过它们之间的比较作图,两者之间的共线性被大量发现。模式植物拟南芥全基因组测序已经完成,这为芸薹属作物的基因组研究提供了便利条件。芸薹属作物的功能基因组学能够进一步明确不同发育时期基因的功能,为解释芸薹属的进化提供基因证据。就芸薹属植物在比较基因组学、功能基因组学最新进展,特别是芸薹属与模式植物拟南芥在基因组之间的相互关系进行了综述。     

芥蓝-菜心种间三倍体CCA的合成及细胞学研究

以菜心-芥蓝异源四倍体(AACC)为桥梁亲本,通过与亲本芥蓝(CC)回交和未成熟胚培养,在芸薹属蔬菜中首次获得基因组为CCA的异源三倍体(2n=3x=28).该异源三倍体生长势较强,开花期、株型、叶形、花色等略偏向于芥蓝;A、C染色体组间存在较高的同源性,减数分裂终变期不同花粉母细胞中形成的三价体数变动在1～8个,多为4～5个,后期Ⅰ染色体分离不均衡,有14/14、13/15、16/12、17/11和18/10等分离方式,与亲本芥蓝(CC)回交的结子率一般较低,蕾期人工授粉可达0.29%.     

植物绿叶粗蛋白在SDS—PAGE中向负极泳动的富含苯丙氨酸的碱性蛋白的测定

提取菜心(BrassicacampestrisL.ssp.chinensis(L.)Makinovar.utillisTsenetLee)和生菜(LactucasativaL.)绿叶粗蛋白,经SDS-变性后作醋酸纤维素薄膜电泳,证实这两种蔬菜含有分别向负极泳动和向正极泳动的蛋白。菜心绿叶粗蛋白经SDS-PAGE电泳后,从负极电泳缓冲液中获得向负极泳动的蛋白,其苯丙氨酸含量为57.05%,碱性/酸性氨基酸残基的比例为3.04,表明是富含苯丙氨酸的碱性蛋白。     

上海地区芸薹属蔬菜遗传多样性研究

利用SSR分子标记分析和农艺性状鉴定对上海地区的17份甘蓝、44份白菜,共61份芸薹属蔬菜进行遗传多样性评价。UPGMA聚类结果显示,61份材料被聚类为两大类,甘蓝类和白菜类,其中白菜型蔬菜品种的相似系数在0．96～0．77之间,甘蓝型蔬菜品种的相似系数在0．93～0．63之间。聚类分析的结果说明,上海地区的甘蓝类蔬菜遗传多样性比较丰富,而白菜类蔬菜的遗传基础比较单一,急需保护现有的白菜型蔬菜品种的种质资源,防止遗传流失。本实验还说明通过SSR分子标记技术与农艺性状鉴定相结合,综合评价芸薹属蔬菜的遗传多样性比采用单一的方法更加准确有效。     

芸薹生链格孢产孢缺陷突变体的鉴定与表型分析

芸薹生链格孢侵染导致的黑斑病是十字花科蔬菜的重要病害,常造成严重的经济损失。其分生孢子对于病害的侵染循环起着重要作用,但目前对于芸薹生链格孢的产孢机制及产孢相关基因的研究较少。本研究从构建的芸薹生链格孢转化子库中筛选得到了9株产孢缺陷突变体,发现其在菌丝生长形态和孢子产量等方面明显异于野生菌。利用TAIL-PCR技术确定突变体M37的插入位点侧翼序列,研究表明,插入位点为芸薹生链格孢一个G蛋白α亚基基因(Ab G1)编码区。该研究将有助于芸薹生链格孢产孢基因和产孢机制的相关研究。     

芸薹属蔬菜Chs基因序列多态性

为探讨我国芸薹属蔬菜的起源及遗传多样性,克隆、测序芸薹属不同种的Chs基因序列。A基因组二倍体、A基因组多倍体、B基因组多倍体和C基因组二倍体的Chs基因突变位点数分别为120、172、194和25个,Chs基因多态性表现为:B基因组多倍体A基因组二倍体A基因组多倍体C基因组多倍体。Tajima'D、Fu and Li'D和Fu and Li'F检验表明A基因组二倍体、C基因组二倍体Chs基因是中性进化基因。HKA平衡检验及误配分析表明A基因组多倍体和B基因组多倍体Chs基因进化中存在选择作用。A基因组和B基因组间存在较低的共有差异和较高的共有多态性,C基因组与A、B基因组存在较高的共有差异和较低的共有多态性。系统发育树将芸薹属Chs基因序列分成4个亚支、10个支系。网状分析表明,白菜可能是四倍体A基因组的供体,黑芥可能是四倍体B基因组的供体,甘蓝可能是四倍体C基因组的供体。中国芸薹属蔬菜在Chs基因位点有较高的遗传多态性,不同基因组间分化程度不一样,B基因组分化较大,A和C基因组分化较小。A和B基因组的亲缘关系较A和C基因组以及B和C基因组更为接近。建议根据基因组的不同将中国芸薹蔬菜分成白菜组、芥菜组和甘蓝组,研究结果支持芸薹属进化的禹式三角模型。     

白菜高效再生系统的建立及其不定芽发生的组织学观察(简报)

白菜(Brassica campestris L ssp.chinensis Maki-no)起源于欧洲的野生芸薹,有许多变种和类型,是我国尤其是长江流域及南方各省普遍栽培的重要蔬菜种类之一,在农业生产中占有重要的地位。由于白菜的植株再生频率同其他芸薹属作物相比较低,因此,影响了基因工程技术在白菜品种改良上的应用。虽经国内外多年的研究,白菜的植株再生频率有所提高,但还达不到转基因植物研究80%-90%的植株再生频率的要求。本试验在筛选获得“油冬儿”白菜适宜培养基配方的基础上,比较了“上海青”等8个白菜类蔬菜不同品种在该培养基上的离体培养再生效率,进一步完善了白菜类蔬菜的离体培养再生体系,     

白菜高效再生系统的建立及其不定芽发生的组织学观察（简报）

白菜(Brassica campestris Lssp．chinensis Makino)起源于欧洲的野生芸薹,有许多变种和类型,是我国尤其是长江流域及南方各省普遍栽培的重要蔬菜种类之一,在农业生产中占有重要的地位。由于白菜的植株再生频率同其他芸薹属作物相比较低,因此,影响了基因工程技术在白菜品种改良上的应用。虽     

改良菜心离体培养植株再生体系的研究（简报）

This investigation has developed an efficient and fast method for plant regeneration from petiole of cotyledon explants of Brassica campestris L. subsp. chinensis Makino var. parachinensis Tsen et Lee. A medium was designed for B. campestris subsp. chinensis var. parachinensis to obtain the high frequency of shoot regeneration, which contained BAP 2 mg/L, NAA 0.75-1.0 mgL and 7.5 mg/L AgNO3 solution to the half of NH4+ concentration's MS basic medium. 60 mL/L coconut milk were added to all of media. In this method, frequency of shoot regeneration of "youqing caixin" reached as high as 91.2% and the number of shoots per explant reached as high as 4.7 plants. The result showed that there was a positive correlation between frequency of shoot regeneration and number of shoots per explant. The little shoots could be observed five days after inoculation and were formed directly. The inducing rate of roots of the shoots reached as high as 100% and the rate of viability of transferred mature plant reached higher than 95%. The regeneration period from petiole with cotyledon to a seedling was shorten to about 49 days. Factors influencing in vitro explant regeneration were studied.     

TA29-barnase基因转化菜心

利用根癌农杆菌导入法, 以菜心带柄子叶为外植体, 对TA29-barnase基因转化菜心进行研究。获得转化植株,进行PCR、Southern blotting杂交和半定量RT-PCR检测, 表明目的基因已经整合到转化植株中, 并且目的基因在转基因植株花蕾中得到表达, 但是表达水平在不同转基因植株间存在差别; 转基因植株开花后, 均表现雄性不育, 不能产生花粉或产生没有活力的少量花粉, 自交不能结实; 用未转化植株正常花粉对雄性不育植株进行授粉, 能够正常结实; 保持系(未转化植株)与不育株杂交后代中雄性不育株与可育株的比例为1:1, 在杂交后代植株子叶期, 喷洒10 mg/L的PPT可以完全杀死可育株; 利用其他菜心品种为父本与不育株进行杂交, 获得的F1植株在生长势和产量方面表现优势, 表明开展菜心优势育种具有一定的潜力。     

TA29-barnase基因转化菜心

利用根癌农杆菌导入法, 以菜心带柄子叶为外植体, 对TA29-barnase基因转化菜心进行研究。获得转化植株,进行PCR、Southern blotting杂交和半定量RT-PCR检测, 表明目的基因已经整合到转化植株中, 并且目的基因在转基因植株花蕾中得到表达, 但是表达水平在不同转基因植株间存在差别; 转基因植株开花后, 均表现雄性不育, 不能产生花粉或产生没有活力的少量花粉, 自交不能结实; 用未转化植株正常花粉对雄性不育植株进行授粉, 能够正常结实; 保持系(未转化植株)与不育株杂交后代中雄性不育株与可育株的比例为1:1, 在杂交后代植株子叶期, 喷洒10 mg/L的PPT可以完全杀死可育株; 利用其他菜心品种为父本与不育株进行杂交, 获得的F1植株在生长势和产量方面表现优势, 表明开展菜心优势育种具有一定的潜力。     

Enhancement of Plant Regeneration Rate of Brassica parachinensis Cultured in Vitro

Among the major factors affected plant regeneration in Brasica parachinensis, a combination of BAP (bacterial alhaline phosphatase) and NAA, at a concentration of 2 mg/L and 1 mg/L respectively, could raise 26.8% of the regeneration rate. It was also found that Ag- NO3 or ABA when supplemented in the culture medium could increase the plant regeneration rate by 79. 0% and 32.30% respectively, indicating that AgNO3 was superior to ABA as a single factor. With a combination of AgNO3 (4 mg/L) and ABA (0. 5 mg/L) added to MS medium already supplemented with ABA 2.0 mg/L and NAA 1.0 mg/L the authors had achieved remarkable results in frequency increase of 89.0%, 84.3% and 86.0% in three explant varieties of B. parachinensis, viz "49-19', "60D' and "70D', respectively. Among the three explants (cotyledon, hypocotyl and petiole with cotyledon), petiole with cotyledon possessed the highest capability for plant regeneration. In addition the age of seedlings and mode of inoculations also influenced the frequency of plant regeneration.' Histological observation evidenced that the mode of plant regeneration in B. parachinensis was of organogenesis. Adventitions buds derived from the cells of vascular parenchyma at the cut surface of petioles. Mature plants were developed after the plantlets were transferred into the plot.     

提高榨菜离体培养植株再生频率

采用榨菜“浙桐1号”品种为材料,以MS为基本培养基,通过对不同植物生长调节剂的组合和不同外植体等主要因素的筛选,大幅度提高了榨菜离体培养植株再生频率。结果表明,2mg／L6．BA 0．2mg／L2,4-D的组合较为适宜,其不定芽再生频率可达50％,且外植体以下胚轴为好：而CPPU和2,4-D的适宜组合为1．5mg／L 0．2mg／L,其不定芽再生频率高达66．67％,最适外植体为带柄子叶。同时,研究结果显示,添加0．25～1mg／L的GA,对榨菜已分化的不定芽的伸长有抑制作用;子叶柄和下胚轴外植体的分化具有极性现象。     

High frequency plant regeneration from cotyledon and hypocotyl explants of ornamental kale

A high frequency shoot regeneration system for ornamental kale [Brassica oleracea L. var. acephala (D.C.) Alef.] was firstly established from seedling cotyledon and hypocotyl explants. The ability of cotyledon and hypocotyl to produce adventitious shoots varied depending upon genotype, seedling age and culture medium. The maximum shoot regeneration frequency was obtained when the explants from cv. Nagoya 4-d-old seedlings were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 3 mg dm⁻³ 6-benzylaminopurine (BA) and 0.1 mg dm⁻³ naphthaleneacetic acid (NAA). The frequency of shoot regeneration was 65.0 % for cotyledons, 76.1 % for hypocotyls; and the number of shoots per explant was 4.3 for cotyledons, 8.2 for hypocotyls. Hypocotyl explants were found to be more responsive for regeneration when compared with cotyledons. Among the 4 cultivars tested, Nagoya showed the best shoot regeneration response. The addition of 3.0 mg dm⁻³ AgNO₃ was beneficial to shoot regeneration. Roots were formed on the base of the shoots when cultured on half-strength MS medium.     

李砧木Marianna离体叶片再生体系优化研究

以李砧木‘Marianna’试管苗新梢顶端第1片叶为外植体,研究激素组合、基本培养基种类及外植体类型等对不定芽再生的影响。结果表明:1/2 MS基本培养基和WPM培养基再生率显著高于MS和SH培养基;叶片附带叶柄的外植体再生率和再生不定芽数显著高于叶柄和切除叶柄的叶片外植体;最佳再生培养基为1/2MS+2.0mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA+0.25%琼脂+3.0%蔗糖,最高再生率和再生不定芽数分别为81.7%和7.46±1.38个;最佳生根培养基为1/2MS+0.5~1.0 mg/L IBA,能获得96.7%生根率、较高的生根数和根长。     

粉锈宁在菜心离体快速繁殖中的应用

应用植物生长延缓剂粉锈宁于菜心离你快速繁殖,试验结果表明,低浓度（1—5μmol／L）的粉锈宁可以明显提高菜心茎尖继代培养时芽的繁殖系数．同时发现低浓度粉锈宁可降低试管苗的玻璃化程度,促进叶片数增加,改善试管苗生长状况,有利于壮苗培育．适当提高粉锈宁浓度还具有促进试管苗生根的作用．粉锈宁可作为一种优良的植物生长调节剂用于菜心离体快速繁殖。     

萝卜带柄子叶高频再生体系的建立

以11份萝卜(Raphanus sativus)基因型为材料进行子叶离体培养研究, 筛选出具有较高再生率的基因型进行实验, 考察基因型、外植体类型、激素配比和苗龄等因素对萝卜再生的影响。结果表明: 萝卜离体再生的最佳外植体为全子叶-叶柄, 最适苗龄为4天, 最适培养基为MS+6 mg·L^–16-BA+0.05 mg·L^–1NAA, 再生率高达86.95%, 再生系数为1.80。该研究为进行萝卜遗传转化实验奠定了良好基础。