扬子鳄FoxO1基因CDS序列的克隆及其在初孵鳄性腺组织的时空表达规律

研究以初孵扬子鳄(Alligator sinensis)性腺组织为实验材料, 开展Forkhead box家族蛋白-1(FoxO1)基因CDS区克隆和序列特征分析。利用免疫组织化学检测其在胃、肠和肺脏等组织中的表达谱, 结合免疫荧光(IF)、RT-PCR和Western Blot探讨其在不同出壳后日龄(17日龄、63日龄和96日龄)雌性扬子鳄性腺组织中的时空表达规律, 探讨其在雌性扬子鳄性腺发育过程中的生物学功能。研究成功克隆获得FoxO1基因长度为1941 bp的完整编码区及646个预测编码氨基酸序列。与其他物种间进行同源性比对和构建进化树分析发现, 扬子鳄FoxO1基因与鸟类的亲缘关系相较中华鳖(Pelodiscus sinensis)和原矛头蝮(Protobothrops mucrosquamatus)等爬行动物更近。在其他脊椎动物中, 哺乳动物、硬骨鱼和两栖物种也各自聚类称为子群, 表明FoxO1兼具功能保守性和种间特异性; 免疫组织化学结果表明FoxO1在初孵鳄性腺复合体、肺、胃和肠中均有表达, 免疫荧光结果表明17日龄性腺组织中的FoxO1主要表达于肾上腺和中肾区但在皮质部呈微弱表达, 在63日龄性腺皮质部表达逐渐上调且呈无规则随机分布, 在96日龄性腺皮质部中卵母细胞发育程度更高的位置呈强表达; RT-PCR结果表明不同时期扬子鳄性腺组织FoxO1基因mRNA表达量差异不显著, Western Blot结果显示性腺组织中的FoxO1表达量呈先上升后下降的变化模式, 表现为63日龄FoxO1基因表达量显著高于17日龄和96日龄, 相关结果对于丰富扬子鳄卵子发生调控机制提供了重要的研究参考。     

黄河流域出土龙山时期扬子鳄骨板的多种同位素分析

扬子鳄现今生活在长江下游地区,但是在龙山时代（5000~4000 BP cal.）黄河流域多处遗址中发现了扬子鳄骨板。为判断龙山时代华北地区的扬子鳄是本地生长还是来自与长江流域的贸易交换,本研究对芮城清凉寺、邹平丁公、泗水尹家城3处遗址出土的7例鳄鱼骨板进行了Sr、C和O同位素分析。3处遗址鳄鱼骨板的⁸⁷Sr/⁸⁶Sr值均落入当地Sr同位素背景范围内,且山东样本的δ¹⁸O比值高于山西样本,符合δ¹⁸O值由内陆向沿海升高的趋势,证明这些扬子鳄个体属于本地物种的可能性很大。扬子鳄骨板的δ¹³C值都明显高于世界其他内陆地区淡水系统的鳄鱼,显示出复杂的饮食特征。上述结果有助于深入了解不同时期扬子鳄的地理分布变迁,对重建距今四千多年前华北地区的古环境具有重要意义,同时也对龙山先民与扬子鳄的关系提出了新的疑问。     

扬子鳄梨状皮质NOS、AChE阳性神经元的分布

目的观察扬子鳄梨状皮质内一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)和乙酰胆碱酯酶(acetylcho-linesterase,AChE)阳性神经元的形态和分布,为扬子鳄脑的比较解剖学积累资料,为其机能研究提供形态学依据。方法采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶(NADPH-d)法和亚铁氰化酮法观察扬子鳄梨状皮质内NOS和AChE阳性神经元的分布和特征。结果扬子鳄梨状皮质内有NOS和AChE阳性神经元分布,为大、中、小型细胞,以中小型细胞为主,胞体呈圆形、椭圆形、三角形和梭形。结论扬子鳄梨状皮质内有NOS和AChE阳性神经元分布。     

老幼龄扬子鳄端粒相对长度的差异性分析

端粒（Telomere）是线性真核细胞染色体末端的一种结构,由高度重复的DNA序列和结合蛋白所构成。在脊椎动物中,端粒通常为富含TG简单重复序列（TFAGGG）,其生物学功能是完成染色体末端复制,使DNA免受不恰当的修复以及防止端一端融合和核酸外切酶的降解（Dreesen et al．,2007）。     

扬子鳄小胃黏膜的组织化学和细胞学

扬子鳄（Alligator sinensis）的小胃是在胃幽门部与十二指肠的交接处由胃幽门括约肌和十二指肠括约肌突入管腔形成的一个小腔,其生理功能一直不清楚。本文采用组织化学、电子显微镜和免疫组织化学技术对扬子鳄小胃黏膜的组织化学成分、细胞超微结构及细胞类型进行了较全面的研究。小胃黏膜上皮PAS反应呈强阳性,AB染色呈弱阳性,主要分泌中性糖蛋白和少量的含硫酸性糖蛋白。电子显微镜下,扬子鳄小胃黏膜上皮主要由表面黏液细胞组成,偶见内分泌细胞。小胃腺部则70％-90％为内分泌细胞,其余为少量的腺黏液细胞和泌酸胃酶细胞。应用7种胃肠激素的抗血清在小胃黏膜中检测出了5-羟色胺（5-HT）、胃泌素（Gas）、胰高血糖素（Glu）、生长抑素（SS）、P-物质（SP）和血管活性肠肽（VIP）细胞,以Glu细胞密度最高,VIP细胞密度最低。未检测到胰多肽（PP）细胞。本研究结果表明,从组织化学成分和细胞类型看,扬子鳄的小胃与胃同源;从细胞超微结构和内分泌细胞所占百分比例看,扬子鳄的小胃已出现了明显的特化,泌酸胃酶细胞中未见泌酸小管,可能没有泌酸功能。内分泌细胞含量丰富,可能在调节胃肠道功能中发挥重要作用[动物学报54（6）：1044—1050,2008]。     

扬子鳄消化道黏液细胞和5种酶的组织化学定位

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扬子鳄卵巢性类固醇激素受体的免疫细胞化学研究

为探讨扬子鳄卵巢内不同性类固醇激素受体在卵泡发育中的调控作用,研究采用组织学和免疫细胞化学方法,运用激光共聚焦显微镜,对扬子鳄不同发育时期卵泡中的雌激素受体、雄激素受体和孕激素受体进行了检测。结果发现,3种类固醇激素受体在卵巢各期滤泡细胞中均有表达,在4月Ⅱ-Ⅳ期卵泡的滤泡细胞中阳性反应最强;9月卵巢的滤泡细胞中阳性反应最弱;ER和AR不仅在各期滤泡细胞中存在阳性位点,在6月卵泡的卵母细胞胞质中也有表达。结果说明,在扬子鳄卵母细胞生长发育和成熟过程中,3种激素受体通过与其对应的激素结合对滤泡细胞的发育、卵黄的合成与积累以及排卵起着重要的调控作用。       

扬子鳄胚胎发育后期端脑背侧区的超微结构观察

背侧区位于大脑半球的外侧沟和终沟之间,向脑腔突入,几乎占满整个脑腔,有视觉,听觉和躯体感觉等重要功能,一些作者称它为脑室背嵴(Dorsal ventricular ridge).爬行类成体端脑背侧区的形态学和超微结构研究在国外有所报道1-3,而其胚胎发育详细资料只见于1987年Yanes对蜥蜴背侧区的研究4.扬子鳄(Alligator sinensis Fauvel)为国家重点保护动物之一,研究其组织胚胎结构在系统进化和饲养方面有着重要意义,同时也可填补国内在爬行类脑研究上的空白.       

求真无垠识紫笋——浙江旧石器考古散记(中)

长兴，浙江最北的县，省之煤都。境内的长兴灰岩，被国际地质学界定为全球二叠——三叠系界线层型，闻名国内外，与扬子鳄和银杏古林长廊并列为县之“三奇”。对本题先做一点说明。题中之紫笋，名笋非竹笋，而是一种茶名。据史载，茶的研究由此开始，有千余年的历史，取其名暗示其地历史悠久，此次考察，会写出长兴历史新华章。     

自然环境下影响扬子鳄繁殖的环境因子

生态因子对生物的生长、发育、生殖和分布有着直接和间接的影响.在1998～2005年对扬子鳄繁殖研究中心内自然环境下鳄卵及其繁殖地环境因子进行调查,包括窝卵数、产卵时间、出壳时间、孵化期内温度、湿度的变化情况、雏鳄孵出后的存活数量以及巢区的植被盖度.调查发现天气状况直接影响母鳄产卵时间、卵的孵化质量与雏鳄的出壳数量.盖度相对大于0.5的窝巢中多数卵基本能正常发育,盖度小于0.5的窝巢中可能只有少数几枚卵发育正常.