Isolation and mapping of bacterial artificial chromosome (BAC) clone containing telomere-associated sequence

Ｔｅｌｏｍｅｒｅｓａｒｅｔｈｅｅｎｄｓｏｆｔｈｅｅｕｋａｒｙｏｔｉｃｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓａｎｄｃｏｎｓｉｓｔｏｆｔａｎｄｅｍｌｙｓｈｏｒｔｒｅｐｅａｔｓｅｑｕｅｎｃｅｓｗｈｉｃｈａｒｅｄｅｓｃｒｉｂｅｄｂｙｔｈｅｃｏｎｓｅｎｓｕｓ[ｄ(Ｔ/Ａ)14ｄＧ18]ｎｉｎｍｏｓｔｏｒｇａｎｉｓｍｓ.ＴｈｅｔｅｌｏｍｅｒｉｃｒｅｐｅａｔｓｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ,[ＴＴＴＡＧＧＧ]ｎ,ｗｅｒｅｃｌｏｎｅｄｉｎ1988[1].Ｇａｎａｌｅｔａｌ.[2]ｒｅｐｏｒｔｅｄｔｈｅｔｏｍａｔｏｔｅｌｏｍｅｒｅｓｅｑｕｅｎｃｅ,[ＴＴ(Ｔ/Ａ…     

我国北方部分地区苹果黄蚜的抗药性

采用点滴法测定了我国北方九地区苹果黄蚜对氰戊菊酯与氧化乐果的抗药性,结果表明,以山东莒南苹果黄蚜为相对敏感种群,河北沧州,河南商丘,山东蒙阴,辽宁朝阳,山东泰安,河北昌黎,安徽砀山,山东荣城等地苹果黄蚜种群均已产生抗药性,对氰戊菊酯抗性倍数（LD50R/S）分别为25.00,28.60,74,17,87.78,157.33,167.53,218.46,291.56倍;对氧化乐果抗性倍数分别为：16.08,26.53,15.88,29.46,25.83,30.73,48.19,64.58。采用相同的方法测定了山东泰安苹果黄蚜对8种杀虫剂的敏感性,结果为：硫丹与灭多威相对毒力较高,而有机磷类和拟除虫菊酯类杀虫剂相对毒力较低。     

筛选和定位含水稻端粒相关序列的BAC克隆

根据水稻的端粒重复序列 ,设计了 2个引物 :(TTTAGGG) ₃ 和 (CCC TAAA) ₃ CCC ,利用单引物在水稻总DNA中进行PCR扩增 ,分别得到Tas1和Tas2 .这 2个片段在定位亲本间均无多态性 .Tas1的原位杂交表明该序列位于 2对染色体端部 .以Tas1为探针在所构建的水稻基因组BAC文库中筛选到 1个克隆 ,South ern杂交证明此克隆也包含序列Tas2 ,取该克隆中的单拷贝序列利用ZYQ/JX1 7DH群体将其定位在第 6号染色体的端部 .并对Tas1和Tas2在此克隆中的排列进行了初步研究     

输尿管镜下钬激光治疗输尿管结石疗效分析

目的:探讨输尿管镜下钬激光治疗输尿管结石的疗效。方法:2010年2月到2012年8月我院共收治输尿管结石患者60例,随机分为治疗组与对照组,每组各30例。对照组采用传统的冲击波碎石手术进行治疗,治疗组则采用输尿管镜钬激光治疗。观察两组患者的手术时间、住院时间、结石排除情况和尿常规等指标的变化情况,并评定患者的治疗效果。结果:治疗组患者的手术时间为(46.25±24.53)min与住院时间(3.51±0.62)d明显少于对照组手术时间(54.93±20.81)min,与住院时间(4.90±1.26)d,组间对比差异明显(P0.05)。治疗组的有效率与对照组的有效率分别为96.7%和86.7%,组间对比差异明显(P0.05)。结论:输尿管镜下钬激光治疗输尿管结石具有手术快、创伤少、恢复快等优点,值得推广应用。     

云南HPV-16型E6、E7基因的突变分析

人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)16型(HPV-16)是引起宫颈癌的一种主要高危型病毒,其2个致癌基因E6和E7的核酸序列变异可能会影响其对宿主细胞的致癌性,已有研究表明其序列突变呈现地域差异性。因此,研究不同地域HPV-16这2个基因的变化情况是宫颈癌流行病学调研的主要内容,也可为研究E6和E7的致癌性积累数据。研究以NCBI登录号为NC_001526.2的HPV-16型病毒的序列为参照,采用Neighbor-joining方法对云南地区74例HPV-16样本的E6、E7的DNA序列构建进化树,结果显示:只有亚洲和欧洲变异亚型,而没有发现非洲1、非洲2、亚-美洲和北美洲这4种变异亚型。DNA序列分析显示:E6的碱基突变以T178G(D25E,59.46%)和T350G(L83V,8.11%)为主,E7的碱基突变主要以A647G(N29S,59.46%)和T846C(同义突变,60.81%)为主。发现E6的新突变有A95G(同义突变,1.35%)和A135G(K11R,1.35%);E7的新突变有C625T(L22F,1.35%)、C627T(同义突变,12.16%)、G689A(G43E,1.35%)、T748G(S63A,1.35%)。此外还发现有一个共突变现象:T178G(D25E,59.46%)-A647G(N29S,59.46%)-T843C(同义突变,21.62%)-T846C(同义突变,60.81%)。     

烟草激活标签突变体库的创制和突变表型的初步鉴定

突变体库在烟草功能基因组研究中具有重要的作用,本研究建立了快速、高效农杆菌介导的烟草遗传转化体系,目前已经创制了3万份激活标签( pSK1015)突变体.利用PCR扩增对突变体库进行阳性检测,扩增结果表明其阳性率接近90％.大田T1代可视突变表型调查结果表明,在团棵期具有可视突变表型的概率为5.4％,在现蕾期具有可视突变表型的概率为3.6％.     

诱变选育具有磺胺胍抗性的L-色氨酸产生菌的研究

采用紫外线、甲基磺酸乙酯(EMS)及半导体激光诱变的方法,处理产色氨酸谷氨酸棒状杆菌GA22(Phe-+Tyr-+5MTr)选育磺胺胍抗性菌株以提高L-色氨酸的产量。用紫外照射20S、EMS处理40 min及半导体激光辐照16 min,筛选得到抗性突变株GA507(Phe-+Tyr-+5MTr+SGr),产色氨酸的量达到5.35 g/L,较出发菌株提高50.3%,并具有良好的遗传稳定性。     

NPAS2基因敲除的HepG2细胞系构建及其对肝癌细胞凋亡的影响

目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建生物节律基因NPAS2敲除的HepG2肝癌细胞系,并初步探讨NPAS2基因敲除对肝癌细胞凋亡的影响。方法:利用sgRNA在线设计工具,针对NPAS2设计两条sgRNA;利用PX459质粒构建分别含有两条sgRNA的敲除载体PX459-sgRNA1;PX459-sgRNA2;利用T7核酸内切酶I检测两条sgRNA活性;将活性较高的打靶载体瞬时转染HepG2细胞,经过药物筛选,克隆化培养及基因测序后得到NPAS2敲除的HepG2肝癌细胞系;利用Western blot检测NPAS2蛋白的表达和凋亡相关蛋白Caspase3的活化;利用流式细胞仪检测敲除细胞系的凋亡水平。结果:成功构建了针对NPAS2的打靶载体;并筛选得到了活性较高的打靶载体;经过药物筛选和克隆化培养得到的NPAS2敲除肝癌细胞系未检测到NPAS2蛋白的表达;进一步发现NPAS2敲除的肝癌细胞Caspase3明显活化,凋亡水平显著升高。结论:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建了NPAS2基因敲除的HepG2肝癌细胞系,并发现NPAS2敲除可以促进肝癌细胞凋亡,为进一步研究生物节律基因NPAS2及其它相关基因在肝癌发生发展中的作用机制提供了有力的工具。     

脑蛋白水解物对缺血性脑血管病患者血流动力学及神经功能的影响

目的:探讨脑蛋白水解物对缺血性脑血管病患者血流动力学、血脂水平及神经功能的影响。方法:92例缺血性脑血管病患者依据抽签法分作对照组与观察组,各46例,对照组采用常规治疗,观察组在常规治疗基础上结合脑蛋白水解物治疗,观察并比较两组患者的全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度、红细胞压积、纤维蛋白原、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)高密度脂蛋白(HDL-C)、神经功能、脑血管储备能力、屏气指数以及临床效果。结果:治疗后,两组血流动力学均低于治疗前,且观察组低于对照组(P0.05);两组TC、TG、LDL-C均低于治疗前,且观察组低于对照组(P0.05);两组HDL-C均高于治疗前,且观察组高于对照组(P0.05);两组NIHSS均低于治疗前,且观察组低于对照组(P0.05);两组脑血管储备能力及屏气指数均高于治疗前,且观察组高于对照组(P0.05)。观察组治疗有效率高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:脑蛋白水解物可有效调节缺血性脑血管病患者血流动力学及血脂水平,改善神经功能。     

免疫增强型肠内营养对老年重症肺炎患者营养状态、肺功能及体液免疫指标的影响

摘要 目的：探讨免疫增强型肠内营养对老年重症肺炎（SP）患者营养状态、肺功能及体液免疫指标的影响。方法：选取我院2021年1月至2023年1月104例老年SP患者作为研究对象,按随机抽签法随机分为对照组和观察组各52例,对照组采用常规肠内营养支持,观察组采用免疫增强型肠内营养支持。比较两组组患者症状及体征恢复时间,治疗前后的病情严重程度、肺炎严重指数、肺功能、营养状态、体液免疫指标。结果：观察组发热、咳嗽、肺部啰音、X线阴影消失时间短于对照组（P＜0.05）;治疗后观察组急性生理与慢性健康评估（APACHE Ⅱ）评分低于对照组（P＜0.05）;治疗后观察组肺炎危险分级优于对照组（P＜0.05）;治疗后观察组总蛋白（TP）、前白蛋白（PA）、白蛋白（ALB）、转铁蛋白（TRF）水平高于对照组（P＜0.05）;治疗后观察组肺动态顺应性（Cdyn）高于对照组,气道阻力（R）低于对照组（P＜0.05）;治疗后观察组免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、补体C3、补体C4水平高于对照组（P＜0.05）。结论：免疫增强型肠内营养支持能加速老年SP患者临床症状及体征缓解,改善其病情、肺炎严重程度及肺功能,提升患者的免疫能力和营养水平,有一定临床应用价值。