工程菌种子制备方法对rEPA表达量影响的研究

由重组E.colirPE553D所表达的基因缺失突变脱毒的重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA),目前大量以载体蛋白用于多种细菌多糖蛋白结合疫苗研究。rEPA的表达量受众多因素的影响,种子的制备方式就是重要因素之一。本文用长期冷冻保存的和新鲜提取的质粒分别转化宿主菌E.coliBL21(λDE3)后制备种子,并将它们和冻干保存的E.colirPE553D在相同条件下培养和诱导,经SDS-PAGE分析表明长期保存的质粒转化宿主后的重组工程菌生长速度较慢,但rEPA的表达量和新鲜质粒转化制备的工程菌基本相同,而冻干保存的工程菌E.colirPE553D几乎丧失了表达rEPA的能力。     

酿酒酵母S期检查点通路上web2基因与rad53基因的位置关系

为探讨酿酒酵母(S.cerevisiae)S期检查点通路上,web2(wants E1A badly2,web2)基因与rad53基因的上下游位置及相互作用关系,利用羟基脲(hydroxyurea,HU)分别阻断web2突变株和野生株细胞的DNA合成.采用pHA- rad53质粒救助实验测定质粒源性Rad53蛋白是否能救助web2突变株对羟基脲的敏感性;Western印迹及免疫共沉淀反应检测Rad53蛋白表达及磷酸化.结果显示,pHA-rad53质粒可以救助web2突变株的存活;Western印迹检测到web2突变株内质粒源性Rad53蛋白表达增强而且至少Rad53部分蛋白为磷酸化蛋白.说明在HU作用下,过表达并磷酸化的质粒源性Rad53蛋白可以救助web2突变株的S期检查点功能缺陷,在酿酒酵母S期检查点通路上web2基因位于rad53基因上游,可能直接参与将检查点信号传递至Rad53蛋白.     

23种中草药体外抗菌活性筛选

为研究23种中草药的80%乙醇提取物对4种临床常见致病菌的体外抗菌活性,该研究用琼脂扩散法测定抑菌圈直径,微量肉汤培养基倍比稀释法测定最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal/fungicidal concentration,MBC/MFC)。结果表明:滇龙胆草、金丝梅、溪黄草等16种提取物对金黄色葡萄球菌的MIC/MBC值在0.19～3.12 mg·mL^-1之间,有很强的抑菌活性。头花蓼、淡竹叶、半枝莲等14种提取物对铜绿假单胞菌的MIC/MBC值在1.56～6.25 mg·mL^-1之间,有较强的抑菌活性。除槐角外,其余提取物对大肠埃希菌的MIC/MBC值均在3.12～12.5 mg·mL^-1之间,有较强的抑菌活性。黄藤、藿香提取物对白色念珠菌的MIC/MFC值在0.78～6.25 mg·mL^-1之间,有较强的抑菌活性; 滇龙胆草、金丝梅、水杨梅、苦参、胡椒、赶黄草、荜菝、淡竹叶提取物对白色念珠菌的MIC/MFC值在6.25～12.5 mg·mL^-1之间,也具有一定抑菌活性。因此,所选中草药的抑菌效果均较好,大部分均具有广谱抗菌活性。其中,藿香、黄藤的提取物对白色念珠菌抑菌活性较强,金丝梅、水杨梅、仙鹤草、苦参、赶黄草、溪黄草的提取物对金黄色葡萄球菌抑菌活性很强,这几种中草药可为进一步追踪其活性单体化合物和作用机制提供一定的参考。     

小麦耐低磷相关性状的全基因组关联分析

通过对小麦耐低磷相关性状进行全基因组关联分析(GWAS,genome-wide association study),挖掘与小麦耐低磷性显著相关的单核苷酸多态性标记(SNP,single nucleotide polymorphism)位点及候选基因,为小麦耐低磷性状的遗传基础和分子机制研究提供理论参考。本试验以198份黄淮麦区小麦品种(系)为试验材料,设置低磷和正常磷营养液水培试验,利用小麦35K芯片对分布于小麦全基因组的11896个SNP,采用Q+K关联模型对小麦耐低磷性相关性状进行关联分析。结果表明,小麦耐低磷性状表现出广泛的表型变异,变异系数为15.65%~26.59%,多态性信息含量(PIC,polymorphic information content)为0.095~0.500。群体结构分析表明,试验所用自然群体可分为2个亚群,GWAS共检测到67个与小麦耐低磷相关性状显著关联的SNP位点(P≤0.001),这些位点分布在除3A、3B和3D以外的18条染色体上,单个SNP位点可解释5.826%~9.552%的表型变异。在这些显著位点中有4个SNP位点同时关联到了2个不同的耐低磷性状。对67个SNP位点进行发掘,筛选到7个可能与小麦耐低磷性有关的候选基因。TraesCS6A02G001000和TraesCS6A02G001100在锌指合成中有重要作用;TraesCS6A02G118100可能为低磷胁迫诱导基因;TraesCS5D02G536400、TraesCS1B02G154200和TraesCS5D02G536500与低磷胁迫相关酶类基因家族有关;TraesCS1D02G231200与植物DUF 538结构域蛋白有关,是植物胁迫相关调控蛋白候选基因。     

免疫球蛋白联合磷酸肌酸钠对病毒性心肌炎患儿心肌重塑和心肌损伤的影响

摘要 目的：研究免疫球蛋白联合磷酸肌酸钠对病毒性心肌炎患儿心肌重塑和心肌损伤的影响。方法：选择2017年1月～2019年12月我院收治的143例病毒性心肌炎患儿,随机分为两组。对照组静脉输注磷酸肌酸钠治疗,每次0.5～1.0 g,每天1次,连用14 d。观察组联合静脉注射人免疫球蛋白,剂量1 g/(kg?d),每天1次,连用2 d。检测两组治疗前后的心肌重塑指标和心肌损伤指标变化情况。结果：观察组的有效率明显高于对照组（P<0.05）;治疗前,两组的血清血清转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGFβ1）、I型前胶原氨基端肽(nitrogen terminal propeptide of type I procollagen,PINP）、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase-2,MMP2）、I型胶原吡啶交联终肽(type I collagen carboxy terminal telopeptide,ICTP）、MMP9水平无明显差异（P>0.05）,治疗后,两组的血清TGFβ1、PINP、MMP2、ICTP、MMP9水平均明显降低（P<0.05）,且观察组的血清TGFβ1、PINP、MMP2、ICTP、MMP9水平明显低于对照组（P<0.05）;治疗前,两组的血清血清丙二醛(malondialdehyde,MDA）、心肌肌钙蛋白I(Cardiac troponini,cTnI）、脑利钠肽(B -type natriuretic peptide,BNP）、肌酸激酶同工酶(Creatine kinase isoenzyme,CK-MB）水平无明显差异（P>0.05）,治疗后,两组的血清MDA、CK-MB、BNP和cTnI水平均明显降低（P<0.05）,且观察组的血清MDA、CK-MB、BNP和cTnI水平明显低于对照组（P<0.05）。结论：免疫球蛋白联合磷酸肌酸钠对病毒性心肌炎患儿有显著的疗效,能有效抑制心肌重塑、减轻心肌损伤,值得进行推广。     

半夏凝集素的糖类结合专一性

半夏是一种多用途的中草药。从其块茎鲜汁中分得的结晶蛋白——半夏蛋白——能凝集兔红细胞,很可能是对某种糖专一结合的凝集素。为此我们采用了琼脂糖双扩散以及亲和层析等技术对半夏中血凝活性成分和各种糖类结合的专一性进行了探讨。     

常规棉花粉和转Cru1Ac＋CpTI棉花粉对拟澳洲赤眼蜂繁殖和存活的影响

在室内评价了常规棉花粉和转Cry1Ac＋CpTI棉（Bt棉）花粉通过不同处理方式作为食物源对拟澳洲赤眼蜂Trichogramma confusum寿命、寄生卵数、子代羽化数和性比等繁殖和存活特征的影响。共设计7个饲喂处理,即不饲喂（UNFED）、水（w）、水＋常规棉花粉（W＋P）、水＋Bt棉花粉（W＋BtP）、10％蜂蜜水（H）、10％蜂蜜水＋常规棉花粉（H＋P）和10％蜂蜜水＋转Bt棉花粉（H＋BtP）。在提供或不提供米蛾Corcyra cephalonica 卵条件下,经W＋P或W＋BtP饲喂的雌蜂寿命与W或UNFED间无显著差异,但均显著短于H和H＋P或H＋BtP饲喂的雌蜂,而经H＋P或H＋BtP饲喂的雌蜂寿命又均显著长于经H饲喂的雌蜂（p〈0．05）。比较每雌寄生卵数和子代羽化数来看,各处理明显分为3类。即UNFED、W、W＋P和W＋BtP为最低,H为居中,H＋P和H＋BtP为最高。比较每雌子代性比来看,各处理也明显分为3类,即H、H＋P和H＋BtP为最低,W＋P和W＋BtP为居中,UNFED和W为最高。饲喂W＋P和W＋BtP的雌蜂寿命、寄生卵粒数、子代羽化数和性比分别与W＋BtP和H＋BtP饲喂间无显著差异（p〈0．05）。因而,棉花花粉需与蜂蜜组合才能成为拟澳洲赤眼蜂实现其最大存活和繁殖力的食物;Bt棉花粉对拟澳洲赤眼蜂无影响。     

安捷伦科技为蛋白组学分析推出业内第一个芯片HPLC/MS系统

安捷伦科技公司日前宣布,为蛋白质鉴定推出第一个高性能液相色谱芯片-HPLC／质谱仪(MS)系统。预计这种基于微流控的液质联用突破技术将明显提高蛋白质研究的速度、简便性和生产效率。     

林杆菌SK200a-9的重金属铊积累与钾离子的关系

铊(Tl)对敏感细菌的毒性主要由细胞内积累造成,这个过程与钾离子浓度有关。而铊耐性较强的林杆菌(Alsobacter metallidurans)SK200a-9的细胞内铊的积累与钾离子关系尚不清楚。主要分析SK200a-9细胞内Tl~+积累与K~+浓度的关系。以SK200a-9为供试菌、Bacillussp.HK1为对照菌测定添加不同浓度Tl~+、 K~+对细胞内Tl~+积累量的影响,添加1 mmol/L K~+时静止细胞内Tl~+的浓度变化。结果表明,两株菌均在Tl~+浓度1 mmol/L时具有较好的生长,细胞内积累量分别达到最大值255.5和41 ng/mg DW。K~+浓度恒定时随着Tl~+浓度的增加,SK200a-9细胞内Tl~+浓度增加的同时K~+浓度减少。当Tl~+:K~+为1:5时SK200a-9菌体内Tl~+积累量最高,为419 ng/mg DW。在静止细胞实验中,K~+的加入使SK200a-9细胞内积累的Tl~+降低至40%,同时细胞内K~+浓度直线上升至120 ng/mg DW;而菌株HK1的变化不大。这些结果提示了Tl~+使用K~+转运系统进入到细胞内的可能性。SK200a-9细胞内Tl~+积累远大于HK1,其耐性机理可能是细胞内积累的Tl~+通过K~+作用排出细胞外。     

腹腔镜下经腹腹膜前疝修补术与李金斯坦疝无张力修补术治疗老年腹股沟疝患者的疗效对比分析

摘要 目的：对比腹腔镜下经腹腹膜前疝修补术（TAPP）和李金斯坦（Lichtenstein）疝无张力修补术两种手术方式治疗老年腹股沟疝患者的疗效。方法：收集2018年8月-2020年7月于上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院甲疝外科治疗的118例老年(≥60岁)腹股沟疝患者的临床资料进行回顾性分析,根据不同的手术方法分组,68例患者行TAPP作为TAPP组,50例患者行Lichtenstein疝无张力修补术作为Lichtenstein组。比较两组患者手术时间、术中出血量、术后切口视觉模拟量表（VAS）评分、排气时间、住院时间及术后近远期并发症发生率。结果：两组患者手术时间比较无显著差异（P＞0.05）;TAPP组患者术中出血量、排气时间和住院时间均显著低于Lichtenstein组（P＜0.05）;TAPP组患者术后不同时点切口VAS评分均显著低于Lichtenstein组（P＜0.05）;TAPP组患者近期并发症发生率显著低于Lichtenstein组（P＜0.05）;两组患者远期并发症发生率比较无显著差异（P＞0.05）。结论：与Lichtenstein疝无张力修补术比较,TAPP是治疗老年腹股沟疝患者安全有效的手术方法,可减轻患者术后疼痛感,患者恢复更快,并发症发生率更低,值得推广及应用。