肿瘤特异性蛋白B7-H4纳米抗体的筛选和鉴定

羊驼体内存在天然缺少轻链的重链抗体,克隆重链抗体可变区(VHH),即可构建单域抗体(single-domain antibodies,sdAbs),又称纳米抗体(nanobody,Nb)。利用非免疫羊驼噬菌体文库筛选肿瘤特异性蛋白B7-H4的纳米抗体,经过4轮淘选,ELASE鉴定阳性克隆噬菌体,测序获得其DNA序列后体外转录为mRNA,将修饰纯化后的mRNA转染到肿瘤细胞,利用细胞免疫荧光检测mRNA在肿瘤细胞内是否表达,Western印迹进一步验证其表达情况;通过CCK-8法鉴定其对肿瘤细胞的增殖抑制能力;划痕实验鉴定其对肿瘤细胞迁移能力的影响;Transwell法鉴定其对肿瘤细胞的侵袭能力的影响;裸鼠荷瘤模型瘤旁注射mRNA,鉴定其在体内实验对肿瘤组织的作用。结果显示,通过淘选获得1个高亲和性的噬菌体株菌H6;DNA测序并导出的氨基酸序列符合羊驼纳米抗体结构;将其mRNA导入肿瘤细胞,能有效表达出纳米抗体H6;转染H6-mRNA的肿瘤细胞(0.84±0.08)与未转染H6-mRNA的对照组(1.83±0.04)相比,其增殖能力明显受到抑制,P<0.01,其迁移和侵袭能力(78.60±5.36)明显低于空白对照组(197.80±21.04),效果优于B7-H4 mRNA的siRNA(95.40±16.56);在裸鼠乳腺癌模型中能有效抑制肿瘤生长,效果优于紫杉醇和B7-H4 mRNA的siRNA。这说明筛选所得抗B7-H4纳米抗体H6能特异结合B7-H4蛋白并封闭其功能,导致肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭受到抑制。该结果为利用B7-H4作为治疗癌症的靶点提供了实验基础。     

长春新产业光电技术有限公司

长春新产业光电技术有限公司是1996年依托中科院长春光机所设立的高科技企业,主要从事半导体泵浦全固态激光器的科研、开发与生产。主要产品有绿光,蓝光,红光,黄光,红外,紫外,单频,调Q激光器等。与传统激光器相比,全固态激光器的优势是体积小、效率高、寿命长、可靠性好、光束质量好、波长短、运输和使用方便、无污染。目前在民用、工业、军事和生物医疗领域有广泛应用。其中低噪声激光器在生物学领域有广泛应用,如血细胞流计,眼底治疗,拉曼光谱,激光对不同生物机体的作用特性研究等。     

怎样获得有丝分裂相最多的洋葱根尖

怎样获得有丝分裂相最多的洋葱根尖田汝岭，赵云云（首都师范大学生物系）洋葱根尖是观察植物有丝分裂的传统材料。有丝分裂指数的高低，直接影响着观察效果。不同生长长度的根是否有不同的有丝分裂指数，至今我们还没有看到专门的研究报告。同一长度的根，在一天中，其有...     

柑桔抗寒砧木枳壳的繁殖技术

枳壳（ＰｏｎｃｉｒｕｓｔｒｉｆｏｌｉａｔａＬ．）别名枸桔，原产我国。主要分布在长江流域的湖北、安徽、江苏、浙江一带，河北、山东、河南亦有分布。枳壳为灌木状小乔木，多长刺。叶为三出复叶，冬季落叶。性极耐寒，可耐－２０℃的低温。枳壳为著名的中药材，叶、花...     

科学出版社生命科学编辑部新书推介（2006-1月）

《微生物基因组》；《混沌生物学》（生命科学交叉系列）；《数字创世纪：人工生命的新科学》（生命科学交叉系列）；《脑与非线性动力学》（生命科学交叉系列）；《中国遗传伦理的争鸣与探索》（生命科学交叉系列）；