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《微生物学免疫学进展》2015,(3)
目的分析靖西县2000—2013年疟疾流行特点,为实施消除疟疾行动提供参考依据。方法采用回顾性调查方法,对靖西县2000—2013年疟疾监测资料进行分析。结果 2000—2013年,靖西县共报告疟疾病例36例,均为输入性疟疾病例;2000—2013年未发现当地感染病例。结论按照世界卫生组织消除疟疾标准,靖西县已进入消除疟疾的巩固期,但劳务输出等归国人员和流动人员,仍然是未来需要有效遏制和消除疟疾的监测重点。 相似文献
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传播阻断疫苗(transmission-blocking vaccines,TBVs)可以有效地阻断疟原虫从蚊媒向人的传播,是控制疟疾流行的关键,但目前的TBVs候选抗原十分有限,迫切需要寻找有效的候选抗原。动合子分泌蛋白7(putative secreted ookinete protein 7,PSOP7)在疟原虫有性生殖阶段发挥着至关重要的作用,本研究对伯氏疟原虫抗原PSOP7(Pb PSOP7)进行简要的生物信息学分析,并应用原核表达系统高效表达纯化了截短的重组Pb PSOP7蛋白(r Pb PSOP7),免疫BALB/c小鼠后,获得小鼠高滴度多克隆抗体。经Western Blot方法证实该多克隆抗体可识别疟原虫抗原。间接免疫荧光实验显示,Pb PSOP7主要表达于疟原虫的合子与动合子表面。这些特点符合TBVs的基本设计理念,为确认和证实Pb PSOP7蛋白具有疟疾TBVs候选抗原的潜能奠定基础。 相似文献
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通过以培养基配方、IPTG浓度、金属离子复合液浓度、镁离子浓度、表达时间、接种量、诱导时间点等发酵的重要条件对重组蛋白表达量影响的研究,确定多表位恶性疟疾疫苗M.RCAg-1蛋白最佳表达条件为以改良TB培养基培养、最优Mg2+,诱导剂IPTG和金属离子复合液浓度分别为10mmol/L,0.5mmol/L,6μl/ml,接种量为10%,表达时间为4.5h,将优化后的参数用于50L发酵罐进行连续3批中试规模的发酵,最终收获菌体湿重平均为31.8±1.78g/L,目的蛋白表达量可占菌体总蛋白的50%左右,试验确定了恶性疟疾多表位随机组合蛋白M.RCAg-1在大肠杆菌中的最优表达条件,该条件能够适合大规模培养需要。 相似文献
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一种新型疟疾核酸疫苗生产工艺的初步研究 总被引:2,自引:1,他引:1
疟疾是危害人类健康和生命的主要寄生虫病之一,寻找合适的疫苗一直是该病控制的重要方向。在疟疾核酸疫苗方面作了系列尝试,取得较好研究结果,并最终构建了以胸腺嘧啶合成酶基因为筛选标记的、具有大肠杆菌平衡致死特征的新一代疟疾核酸疫苗pThyAAWTE。对影响工程菌高密度发酵的几个因素进行了分析,所优化程序可使工程菌发酵密度达OD60060以上;此外,还对质粒初步纯化过程中的几个重要参数进行了分析,初步结果表明,悬浮液体积(ml):菌体湿重(g)在2:1以上,对质粒的得率没有明显影响;碱裂解时间在一定范围内不影响质粒的质量;合适的悬浮液体积/裂解液/中和液比能明显提高质粒产量;用优化程序所提取的质粒其产量与试剂盒提取的量相当。为pThyAAWTE的大规模纯化打下了基础。 相似文献
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本实验室构建的疟疾DNA疫苗经动物试验表明具有很好的免疫原性,为申请临床试验,进行了制备工艺的研究。本研究将含pcD-awte质粒的大肠杆菌DH5α在发酵罐中发酵培养,碱裂解法粗提质粒,再依次通过Sepharose 6FF分子筛层析、Plasmidselect 亲硫吸附层析和Source 30Q离子交换层析精制获得质粒纯品,并对纯品进行质量分析。结果每升培养液可获得质粒纯品43.9mg,质量符合Ferreira等推荐的药用标准。 相似文献
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本文首次报道疟疾多表位抗原基因在转基因烟草中表达成功。疟疾是当今最需要研究有效疫苗的主要传染病之一。过去的研究表明,AWTE基因编码的疟疾多种抗原表位是有效的抗疟表位,CTB基因编码的霍乱毒素B亚基,是一种既能引起细胞免疫又能引起体液免疫的免疫载体和佐剂。本研究把AWTE-CTB融合基因构建到植物表达载体pBVG-ny1上,采用共转化的方法,通过基因枪导入转化烟草。经PCR扩增AWTE-CTB基因片段检测,证实了疟疾多表位抗原基因在转基因烟草中的整合。SDS-PAGE蛋白电泳结果显示转基因烟草中表达了AWTE-CTB融合基因分子量相同的特异蛋白。经抗原性分析实验和Western免疫印迹实验结果表明,特异表达的融合蛋白可与CTB和AWTE抗体结合,具有CTB和AWTE抗原性。 相似文献