趋化因子SDF-1在脂肪间充质干细胞向血管内皮细胞分化过程中的作用

近年来,研究发现,组织的局部缺血、肾功能不全、癌症、心脑血管等疾病的发生都与血管发生病变有着密切的联系。因此,使病变的血管减少并恢复正常的功能一度成为细胞学领域的热点。目前研究发现,来源于脂肪组织的脂肪间充质干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)能被有效地诱导成为血管内皮细胞(vessel endothelial cells,VECs),并且诱导过程中具有关键作用的趋化因子也不断地被发现,如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,b FGF)、类胰岛素一号增长因子(insulin-like growth factors-1,IGF-1)、基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1/CXCL12)等;诱导因子的含量、诱导时间都直接影响着结果;体外培养的ADSCs也可以分泌一定含量的趋化因子来进一步促进血管的形成。该文对近年来关于趋化因子SDF-1对血管生成影响的相关研究进行了综述,希望为模式动物的建立及人类疾病的研究提供理论依据。     

国产丝裂霉素处理的胎儿成纤维细胞支持具有生殖系转化能力的小鼠胚胎干细胞的分离

应用于胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES细胞)培养的国产药物可以降低ES细胞的实验成本。研究中以浙江海正药业生产的丝裂霉素(mitomycin,国药准字H33020786)处理小鼠胎儿成纤维细胞,用于胚胎干细胞建系。并制备饲养层,将小鼠囊胚种植在该饲养层上。4-6天后,挑选形态良好的内细胞团(inner cell mass)来源的克隆在胰酶中进行消化,将消化下来的细胞团块传至新鲜的饲养层上。之后,每2-3天传代一次。结果表明,经该丝裂霉素处理的胎儿成纤维细胞支持具有生殖系嵌合能力的胚胎干细胞的分离。     

试管牛繁殖能力的观察

利用屠宰母牛卵巢卵母细胞经过体外培养成熟、体外受精和体外发育后,以非手术移卵技术移植给受体母牛,于1989年8月15日出生的我国第一胎试管牛(雄性),现已达到繁殖年龄。为检测试管牛的繁殖能力,我们根据其自然交配情况以及采精后进行体外受精结果对其繁殖能力进行了研究评价。经过与5头母牛的情     

培养条件对牛体外受精胚胎核仁及线粒体发育的影响

牛体外受精胚胎分别在SOF FCS、SOF BSA和SOF PVA三种培养系统内进行培养,然后分别取三个系统中发育到原核期、2细胞、4细胞、8细胞、桑椹胚和囊胚阶段的胚胎进行透射电镜的观察,了解培养系统中血清和BSA的添加与否对胚胎发育过程中核仁和线粒体发育的影响。观察结果表明：与已报道的体内受精胚胎研究结果相比,体外受精胚胎核仁的发育比较迟缓,培养系统中血清及BSA的添加与否不会显著影响核仁的发育过程。在SOF FCS和SOF BSA培养系统中线粒体的发育明显滞后,表明培养系统中血清和BSA的添加可能是造成这种现象的重要原因。     

绵羊体外受精卵的体外发育及冷冻保存研究

将体外成熟、体外受精的绵羊卵子,在体外培养至桑椹胚—襄胚期并进行冷冻保存,观察了培养卵的体外发育和冷冻保存效果。从采自屠宰场的绵羊卵巢中抽取卵母细胞,用含有10％FCS(或NSS)、HCG、E_2和Hepes的M199培养24—26小时,再以经Ionophore A23187诱导获能的新鲜精子进行授精。授精后6—8小时移入发育用培养基内进行培养,发育用培养基为含有10％FCS(或NSS)、丙酮酸钠、Hepes的M 199。授精72小时后,FCS组和NSS组的卵裂率分别为36.9％和45.2％,后者显著高于前者。继续培养7—10天后,桑椹胚～囊胚的发育率分别为11.6％和23.4％,两者间差异极显著。将桑椹胚和囊胚冷冻保存于PBS+20％FCS+10％乙二醇冷冻液内,解冻后的胚胎形态正常率分别为82.0％和71.9％。     

MEC-1移植法构建慢性淋巴细胞白血病小鼠模型

目的 制备并评估慢性淋巴细胞白血病小鼠模型，以期为慢性淋巴细胞白血病的治疗提供临床前模型。方法 通过文献查阅及实验确定环磷酰胺(cyclophosphamide, CTX)注射剂量以制备免疫抑制小鼠模型；通过腹腔注射、尾静脉注射将1×10⁷个MEC-1细胞连续3 d移植到小鼠体内，以制备慢性淋巴细胞白血病小鼠；应用流式细胞术、免疫组化等方法，检测慢性淋巴细胞白血病小鼠外周血白细胞、CD19⁺CD5⁺B淋巴细胞变化情况，并分析肝、脾、胸腺、肺、淋巴及骨髓中MEC-1细胞浸润情况。结果 确定CTX注射剂量为150 mg/kg注射4 d能够显著降低小鼠免疫系统功能；移植MEC-1细胞后小鼠表现慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia, CLL)特征，其白细胞及B淋巴细胞数量增多、骨髓细胞发生增殖。结论 CTX注射剂量为150 mg/kg连续注射4 d,可以使小鼠免疫功能显著下降；成功制备CLL小鼠模型。