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目的:探讨打靶恒河猴CD4~+ T细胞的TRIM5α基因对其感染HIV-1能力的影响。方法:从恒河猴的外周血中通过磁珠分选获得CD4~+ T细胞,并采用流式检测阳性率。构建打靶TRIM5α基因的TALEN质粒,通过电转导入CD4~+ T细胞,流式分选出转染TALEN质粒的细胞,提取基因组T7E1酶切检测打靶效率。HIV-1病毒感染打靶TRIM5α的CD4~+ T细胞,并通过ELASA检测病毒感染的情况。结果:成功地从恒河猴的外周血中分选出了CD4~+ T细胞,流式检测阳性率为99.5%。打靶TRIM5α基因的TALEN质粒转染CD4~+ T细胞的转染效率约为24.8%,并可成功打靶TRIM5α,打靶效率约为40%。ELASA检测结果表明打靶TRIM5α的恒河猴CD4~+ T细胞对HIV病毒的感染能力增强。结论打靶恒河猴CD4~+ T细胞的TRIM5α基因可使其易感HIV病毒,为进一步建立恒河猴HIV-1感染动物模型奠定基础。 相似文献
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目的:通过研究人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)Tat蛋白对骨髓间充质干细胞(BMSC)造血支持功能的影响,进一步揭示HIV-1感染者造血损伤的机理。方法:原代培养BMSC,流式检测其表面标志,诱导分化鉴定其多向分化潜能;免疫磁珠分选造血干细胞(HSC),流式检测其纯度;HIV-1 Tat蛋白添加到培养基中培养20天的BMSC(BMSC_(Tat))与对照BMSC(BMSC_(Con))分别作为滋养层与HSC分6组进行共培养,随后计数各组造血细胞总数,诱导分化检测造血细胞集落形成能力;RT-PCR检测BMSC_(Tat)和BMSC_(Con)造血相关因子mRNA的表达强度,ELISA检测BMSC_(Tat)和BMSC_(Con)条件培养液中造血相关因子GM-CSF及IL-6的浓度。结果:经鉴定成功培养获得原代BMSC;免疫磁珠分选的HSC纯度可达95%以上;分6组共培养进行比较,以BMSC_(Tat)为滋养层培养的造血细胞总数及造血细胞形成的集落总数均明显少于以BMSC_(Con)为滋养层;BMSC_(Tat)的造血相关因子的mRNA的表达明显弱于BMSC_(Con),BMSC_(Tat)的条件培养液中GM-CSF和IL-6的浓度均明显低于BMSC_(Con)。结论:HIV-1 Tat蛋白对BMSC的造血支持功能有明显的抑制作用。 相似文献
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按照Promega公司的mRNA提取试剂盒操作手册,从圆斑蝰蛇(Daboia russellii siamensis)的毒腺中提取mRNA;利用RT-PCR的方法进行体外扩增,获得C-型凝集素蛋白的基因,克隆到pMD18-T载体中。随机挑选14个阳性克隆进行核酸测序,获得7个编码不同蛇毒C-型凝集素样蛋白亚基的cDNA,分别命名为DRS-L1、DRS-L2、DRS-L3、DRS-L4、DRS-L5、DRS-L6和DRS-L7。由基因序列推导出的氨基酸序列表明,克隆到的7个蛇毒C-型凝集素样蛋白的亚基中均有糖识别结构域存在。BLAST分析显示,仅有DRS-L1的蛋白序列与目前已知的蛇毒C-型凝集素样蛋白的α亚基相似。序列同源性比较并结合半胱氨酸位点分析,推测DRS-L1和DRS—L2可能分别是圆斑蝰蛇毒X因子激活剂的轻链LC2和LC1。DRS-L3和DRS-L4可能是高分子量的蛇毒C-型凝集素样蛋白的β亚基,而DRS-L5和DRS-L6可能是低分子量的蛇毒C-型凝集素样蛋白的β亚基。DRS—L7可能是类似于血小板膜糖蛋白Ib结合蛋白的β亚基。 相似文献
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目的:探讨COX-2和Survivin在B细胞非霍奇全淋巴瘤(B-NHL)中的表达及临床意义.方法:采用免疫组化SP法检测43例B-NHL和10例良性淋巴结病变组织中COX-2和Survivin的表达.结果:COX-2和Survivin在B-NHL中的阳性表达率分别为55.8%(24/43)和69.8%(30/43),与对照组相比差异具有显著性(P<0.05.Ⅲ/Ⅳ期B-NHL患者COX-2蛋白的表述要高于Ⅰ/Ⅱ期患者(P<0.05).Survivin的表达与B-NHL的组织病理学等级和国际预后指数(IPL)具有相关性(P<0.05).Spearman相关分析表明COX-2的表达与Survivin的表达呈正相关(r=1.000,P=0.030).结论:COX-2和Survivin在B-NHL中表达上调以及两者之间的阳性表达密切相关,表明COX-2和Survivin在B-NHL的发生和发展中具有协同作用. 相似文献
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目的:探讨脐血干细胞局部肌内注射治疗坏死溃疡期巨大压疮的临床治疗效果。方法:坏死溃疡期巨大压疮合并瘘道患者,经常规综合治疗2月,伤口不能愈合,采用脐血干细胞局部肌内注射治疗,治疗后观察局部血液循环及肉芽组织生长情况。结果:局部血液循环改善,肉芽组织生长迅速,4周创面及瘘道痊愈。结论:对于经目前各种综合治疗和护理无效的坏死溃疡期巨大压疮患者,脐血干细胞局部肌内注射治疗是简单、安全、有效的方法,医护人员对这种治疗方法应持更为积极的态度。 相似文献
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目的:研究自体骨髓和脐带间充质干细胞联合移植治疗杜氏型肌营养不良(DMD)的疗效和安全性方法对经临床表现、血清酶学、肌电图、基因分析、肌肉活检、肌肉核磁共振成像(MRI)确诊的1例DMD患者采用自体骨髓和脐带间充质干细胞联合移植的方案进行治疗.术后第3、6、9、12个月定期观察患者临床症状及各项疗效指标的变化并结合国内外文献进行综合分析.结果随访12个月,该患者肌力提高,动作灵活.血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶较前明显下降,活动能力评分和徒手肌力较前增加,肌电图运动单位电位波幅减低及时限缩短较前改善,肌肉MRI复查显示肌肉病变程度较前减轻、肌肉轮廓较前清晰.结论自体骨髓和脐带间充质干细胞联合移植是一种治疗DMD的有效治疗方法. 相似文献
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