人受精蛋白β整联蛋白配体区cDNA的克隆、表达及抗体制备

从人睾丸中抽提mRNA,合成双链cDNA,利用合成的PCR引物扩增受精蛋白β（fertilinβ）的整联蛋白配体区cDNA（hf279)。序列分析表明,该区编码93个氨基酸,与文献报道安全相同。将hf29插入质粒pGEX－4T－2,构建pGEX-hf279表达质粒,转化大肠杆菌BL21（DE3）,表达菌株经IPTG诱导,可产生大量可溶性的表达蛋白GST－HF93。SDS－PAGE分析表明融合蛋白表观分子量为38kD,其含量占菌体可溶性蛋白的50％以上。表达产物经谷胱甘肽转硫酶（GST）亲和层析柱纯化,得到90％以上纯度的凳晤蛋白。融合蛋白经凝血酶切2h可得HF93肽。再经GST新和层析柱去除GST,得到纯度大于80％的HF93肽。将其和SDS－PAGE凝胶上切下的HF03多肽条带一起用于免疫BALB／c小鼠,经ELISA检测,证明获得了较高滴度的抗体。     

ADAMs与哺乳动物受精

ADAMs是近几年发现的一类具有多个结构区和广泛生物学功能的糖蛋白,它们在哺乳动物受精中的作用日益得到实验结果的支持,本文简要总结了近几年ADAMs在哺乳动物受精中作用的研究进展。     

硫酸乙酰肝素与口蹄疫病毒感染

受体是病毒宿主嗜性和致病机制的主要决定因素.硫酸乙酰肝素(HS)是一种多聚阴离子碳水化合物,广泛存在于真核细胞的细胞膜和细胞基质.HS是许多病毒在细胞膜上的特异受体或辅助受体.目前发现口蹄疫病毒可利用HS和整联蛋白(ανβ3、ανβ6、ανβ1、ανβ8)作为病毒受体.口蹄疫病毒可能在不同的感染阶段利用不同类型的受体与宿主细胞相互作用中.研究病毒受体的结构和功能对理解病毒与宿主细胞的关系具有重要意义.本文主要论述了HS的生物学特性及其与口蹄疫病毒感染的关系.     

整联蛋白与口蹄疫病毒感染

整联蛋白是一类分布广泛的细胞表面受体家族,它不仅在细胞的生长、移行、增殖和分化等许多方面发挥重要生物学功能,而且在多种病理过程中发挥重要作用。许多病毒都能利用整联蛋白分子作为病毒受体或共受体进入宿主细胞。本文主要就整联蛋白的特征及其在口蹄疫病毒感染宿主细胞过程中的作用机制进行综述。     

整联蛋白与生长因子受体信号转导通路间的"串话"

整联蛋白是由α、β两种跨膜亚基组成的异源二聚体,是介导胞外基质（ＥＣＭ）粘附的主要细胞表面受体家族。整联蛋白介导的粘附作用参与调节多种细胞功能。近十年间对整联蛋白的研究已从发现其家族的新成员转至描述各种整联蛋白的具体功能,主要热点在于：１．整联蛋白是细胞迁移的关键效应分子;２．整联蛋白与生长因子受体合作促进细胞的增殖,其原因至少部分是由于锚定依赖在细胞周期中由Ｇ１到Ｓ期所起的作用;３．粘附是细胞退出细胞周期开始分化的必要条件;４．当粘附的组织细胞脱离ＥＣＭ时,则丧失了存活信号而发生凋亡［１］。近…     

The αMβ2 integrin and its role in neutrophil function

Neutrophils are the first cell type to arrive at the injury sites and play a critical role in host defense,by virtue of its ability to adhere and transmigrate through endothelium,to phagocytose foreign pathogens,and to produce free oxygen radicals and proteolytic enzymes.Yet,inappropriate neutrophil activation causes tissue damage and various inflammatory diseases.These physiological and pathological functions of neutrophils depend on the engagement of certain surface receptors,especially αMβ2,the major β2 integrin receptor present on neutrophil surface.Understanding of the molecular mechanisms underlying ligand binding by αMβ2,as well as the rolea of αMβ2ligand interactions in neutrophil functions will enable us to regulate more precisely neutrophil activities:that is,to promote their host defense functions,and at the same time to minimize their deleterious effects of normal cells.     

综述: 影响血管内皮细胞自噬的因素及其相关机制探讨

自噬对维持细胞自身的稳定及细胞成分更新、保持正常的生理状态起着至关重要的作用．机体在生理和病理过程中都存在自噬,基础状态下的自噬对细胞具有保护和修复作用,而自噬过度激活会引起细胞的损伤及死亡．近年来,对自噬的研究主要集中于肿瘤细胞,而对正常细胞的自噬研究较少．血管内皮细胞作为人体中最活跃的细胞之一,其功能变化与心血管疾病的发生和发展有密切相关．本文对影响血管内皮细胞自噬的因素及其相关机制进行综述．     

口蹄疫病毒受体猪源β6亚基基因的克隆和分子特征

从FMDV试验感染康复猪的舌皮和肺组织中克隆到了整联蛋白β6亚基的基因并对其核苷酸序列和推导的氨基酸序列以及蛋白结构进行了分析,该基因已登录到GenBank中,登录号为EF432729。猪整联蛋白β6亚基基因的编码区含有2367个核苷酸,编码788个氨基酸残基,含有9个潜在的糖基化位点,3个氨基葡聚糖结合位点,一个依赖于cGMP的蛋白激酶磷酸化位点,10个蛋白激酶C磷酸化位点,2个表皮生长因子相似结构域和2个半胱氨酸丰富区。其信号肽由26个氨基酸组成,胞外域由681个氨基酸组成,跨膜区由29个氨基酸组成,胞浆域由52个氨基酸组成。从起始密码子开始,共有11个核苷酸发生了变化,其中2079位和2256位核苷酸的突变是同义突变,其余9位核苷酸的变化为错义突变。猪β6基因与猕猴、小鼠、挪威大鼠、犬、豚鼠、人、牛和羊的β6基因的核苷酸序列一致性分别为79.5%、84.9%、85.4%、85.2%、88.7%、90.1%、91.9%和91.9%,推导的氨基酸序列一致性分别为93.5%、88.2%、88.5%、88.3%、91.0%、92.8%、93.3%和93.4%。为进一步深入研究FMDV嗜性、与宿主细胞的相互作用、病毒的侵入机制等问题奠定了基础。     

整联蛋白结构及其功能研究进展

整联蛋白是广泛存在于真核细胞表面的完整的膜受体家族,包括由至少18种不同的α亚基及8种β亚基形成的20多种αβ异二聚体。整联蛋白配体主要有胶原蛋白、纤维结合蛋白、层粘连蛋白、玻连蛋白、血小板凝血酶敏感蛋白、胞间黏附分子、细胞反受体、补体蛋白,以及多种细菌和病毒蛋白,在介导血管内皮细胞和肿瘤细胞的黏附、淋巴细胞运输、肿瘤生长及感染等都有重要的作用。     

FMDV整联蛋白受体b1亚基的克隆及其配体黏附区多抗的制备

采用RT-PCR技术从牛气管组织扩增出2400 bp的b1基因, 回收纯化连入PGEM-T载体, 测序。用Expasy软件对b1基因的抗原性进行分析, 选取胞外区334~861 bp的配体结合区与6×His融合, 在大肠杆菌中大规模诱导表达, 并经Ni2+亲和柱层析纯化。通过SDS-PAGE鉴定后, 应用纯化蛋白免疫新西兰家兔, 获得效价在1:12 800以上的多抗, Western blotting鉴定表明此抗体可特异性的与表达的融合蛋白作用。