草莓TCP转录因子家族生物信息学鉴定及基因表达分析

TCP转录因子家族是植物特异的一类调控逆境胁迫的重要转录因子。该研究利用生物信息学方法对草莓TCP转录因子家族成员进行鉴定,采用qRT PCR方法检测转录因子家族在非生物胁迫中的表达,并对相应转录因子家族基因的结构和功能进行了预测,为探究TCP转录因子在森林草莓非生物胁迫中的作用奠定基础。结果显示：(1)从森林草莓(Fragaria vesca)基因组和凤梨草莓(Fragaria ananassa)基因组中分别筛选了18个和58个TCP基因,并根据基因在染色体上的位置分别命名为FvTCP1~FvTCP18和FaTCP1~FaTCP58,亚细胞定位显示TCP家族基因主要位于细胞核上。(2)qRT PCR分析表明,森林草莓家族基因对逆境胁迫具有响应作用,但不同成员在不同胁迫处理下的响应程度存在差异,FvTCP14在200 mmol·L^-1 NaCl、10% PEG、100 μmol·L^-1 ABA、4 ℃低温、40 ℃高温和100 mmol·L^-1 H₂O₂处理下相对表达量极显著高于对照,分别是对照的43.78倍、166.73倍、38.39倍、265.87倍、626.24倍和451.85倍,表明^FvTCP14响应干旱、盐、ABA、H₂O₂、低温和高温胁迫;另外发现,FvTCP12在4 ℃低温、100 μmol·L^-1 ABA和100 mmol·L^-1 H₂O₂胁迫下与对照相比呈下调趋势,推测FvTCP12基因对低温、ABA和H₂O₂胁迫具有负调控作用。研究表明,森林草莓TCP转录因子在不同逆境胁迫中的表达存在一定的差异。     

家兔胚胎细胞核移植的研究

本研究以兔为实验材料,对细胞核过程中显微操作、电融合、电活化以及移核胚的培养等基本问题进行了研究。对兔进行PMSG－hCG超数排卵,收集成熟母细胞和16－细胞胚;后者经胰蛋白酶消化,去除胶膜和透明带,在不含Ca62 、Mg^2 的分离中分成单个卵裂球;然后,分别对两者做CB预处理;首次尝试采用WQilladsen法,去除卵母细胞核、并将单个卵裂球注入透明带,同时、与McGrath-Solter法进行比较;通过电融合使供体核进入去核的卵母细胞内;将所得移核胚在体外或在中间内体内培养并观察。结果表明：一、Willadsen法与McGrath-Solter法比较,核移植操作的成功率及以后的电融合率均无明显差异（Tab.1)。相对于后者,Willadsen法更简便、易于掌握并提高去核率。二、hCG超排注射后13－15h,观察卵母细胞发现：其中,67．8％保留有第一极体。此时的卵子若去除1／3胞质量,去核率可以达到58．3％。若推迟去核时间,第一极体退化,失去去核标志。三、比较不同电脉冲条件,发现强度为0．63kv/cm,持续160μs的一次电脉冲可获较高移核胚的融合率（70．8％）（Tab.2）;并可使61．1％的成熟卵母细胞活化。四、比较移核胚在体外和在中间有体内两种培养条件,前者只有34．6％能发育到6－8细胞期,而后者有23．0％能发育到桑椹胚或囊胚（Tab.3)。说明：需进一步优化家兔胚体外培养条件。     

中国与澳大利亚医疗各项卫生保障制度的对比研究

通过对中澳两国的现行的医疗保障制度的对比分析,结合我国现阶段医疗卫生发展的现状,从不同的视角探讨分析我国现行的医疗保障制度。由于受宏观经济制度的制约和影响,加之我国的地域特点是南北跨度大,经济、文化等区域发展不均衡,我国的医疗保障制度中存在着诸多的问题：保障制度总体水平不高,人群待遇差距较大;适应流动性方面不足;保证可持续性方面不足等。我国借鉴和吸收了国外的先进经验,建立了全民可及的、人人享有的医疗保障制度,但就如何进一步完善我国现行的各项医疗保障制度,推进我国的医疗卫生事业的不断发展,提出了相应的对策及建议：建立完善的、可持续性的卫生服务体制;借鉴澳大利亚的成功经验,结合我国的国情,加大资金投入,简化报销流程,不断完善我国现代医疗保障制度;加强全科医生的培养,可以在一定程度上解决”看病难、看病贵”的问题。完善我国现代医疗保障制度是一个关系到国计民生的、复杂的、系统的大工程。我国的医疗卫生保障制度的改革面临着巨大的挑战,只有加快经济发展的步伐,借鉴和吸收更多国外成功的经验,不断完善我国的医疗保障制度,才能最终实现全民可及的、免费医疗的卫生保障制度。     

建立适合中国国情的高效双向转诊机制

建立适应我国国情的高效双向转诊机制,对于推进我国的医疗体制改革具有至关重要的作用。本文通过对中西方现行卫生制度的对比,结合我国有中国特色的社会主义国家的国情,对我国的卫生制度中存在的问题进行了深入剖析,探讨如何才能有效地实现高效的双向转诊。目前,我国医疗卫生事业的问题覆盖多个方面：主要表现在医疗资源,医院管理,在岗医护人员的个人职业素质,卫生部门的监管,医疗资源的大量浪费,医院分级不平衡另多数患者普遍选择三级医院就诊,而选择二级以下医院就诊的患者则较少。如何在符合我国国情的基础上改变我国的医疗卫生现状、满足人民群众不断提高的医疗服务需求是我国医疗改革亟待解决的问题。建立高效率的双向转诊制度势在必行。目前,在双向转诊中遇到的问题：1．传统理念导致的对各级医疗机构职能的理解上存在偏差,2．医疗机构自身定位不明确,3．双向转诊制度的各项相关配套政策不完善,4．双向转诊制度的社会认同度低。高效双向转诊机制建立以后,可以节省大量的医疗资源,减少了不必要的浪费,推进了医疗资源的合理配置,减少了因地区差异引起的治疗时机延误,高效的双向转诊制度会使医疗卫生资源配置进一步优化、还可以加强医疗机构之间的协作、降低医疗费用支出、促进社区卫生服务迅速发展等有重大的意义。     

响应面法优化Alcaligenes sp.产脂肽生物破乳剂培养基的研究

生物破乳刺是应用于石油开采业中的新型破乳剂之一,本研究对筛选得到的一株破乳剂产生菌(鉴定为Alcdigenes sp.)产生的脂肽类生物破乳剂进行了发酵培养基的优化,采用SAS软件的响应面回归方法对培养基中主要因素进行了研究,试验结果表明,在碳源石蜡为4.76%、氮源牛肉膏为0.12%、磷源K2HPO4/KH2PO4为0.53/0.8%时,破乳剂的产生量为最大,比优化前提高了近一倍.     

水平潜流人工湿地模型

人工湿地作为一种新型的处理技术,在水污染控制与水环境修复中具有重要的作用和广阔的应用前景.人工湿地处理工程数量的增多和日趋严格的水质标准促进了其设计手段的进步.本文从水动力学、污染物降解动力学和参数的不确定性3方面入手,系统回顾、评价了水平潜流人工湿地的设计模型,包括负荷法、衰减方程、一级k-C*模型及其若干改进型模型和动态机理模型.在比较上述模型的建立依据和方法的基础上,分析水平潜流人工湿地模型发展的内在关系,指出在工程设计中应用各类模型时需要考虑的主要事项,并对该领域的发展方向进行了展望.     

哺乳动物细胞电融合技术及其影响因素的研究进展

细胞电融合技术是指利用电脉冲促使两个或更多个不同的细胞融合在一起的过程。由于可以获得较高的融合率,而且可以在显微镜下定向诱导细胞融合和直接挑选杂种细胞,故电融合技术得到了广泛的应用。电融合技术对于哺乳动物杂种细胞的构建;哺乳动物四倍体发育的研究;以及胚胎细胞核移植都具有十分重要的意义。因此,人们对哺乳动物的电融合问题进行了大量的研究,现将这方面的研究进展做一综述。 (一)电融合技术的原理及方法 悬于平行电极之间的低电导率溶液中的细胞,在适当强度与持续时间的直流电脉冲的刺激下,其细胞膜可发生可逆电击穿,此时如两个具有膜微孔的细胞紧穿接触,可导致细胞质桥的形成,进而发生细胞融合。     

pH、温度和癸酸对厌氧颗粒污泥产甲烷毒性关系的研究

在间歇培养中研究了癸酸对UASB反应器厌氧颗粒污泥的产甲烷毒性,并考察了pH、温度和癸酸抑制的关系。结果表明,癸酸对厌氧颗粒污泥产甲烷活性有强烈的抑制,对厌氧颗粒污泥比产甲烷活性产生50％抑制的浓度为1．9mmol/L。pH影响癸酸在液相中的存在形式,pH越低,游离癸酸比例越大,对厌氧颗粒污泥的抑制越严重。高温条件下癸酸使厌氧颗粒污泥的结构变得松散,对厌氧颗粒污泥产甲烷毒性较中温和低温条件下严重。     

三维适形放疗治疗32例食管癌γ-刀放疗后复发的近期疗效分析

目的:研究三维适形放疗治疗32例食管癌γ-刀放疗后复发的可行性,观察其近期疗效与安全性.方法:对32例食管癌γ-刀放疗后复发患者实施三维适形放疗,评价急性放疗反应及近期疗效.结果:28例患者顺利完成放疗计划,初次放疗与再次放疗中位间隔时间7月,再次放疗中位剂量57.6Gy,近期完全缓解率9％,部分缓解率69％,稳定9％,进展13％,总治疗总有效率为78％.患者急性放射性食管炎发生率1-2级16％(5/32),3-4级31％(10/32);急性放射性肺炎发生率1-2级16％(5/32),3-4级9％(3/32);骨髓抑制的发生率为47％,1-2级37.5％(12/32),3-4级9.5％(3/32),急性心脏损伤发生率3％,1-2级3％(1/32),3-4级0％(0/32).结论:三维适形放疗治疗γ-刀放疗后复发食管癌的近期疗效较好,患者可耐受,晚期并发症及疗效有待进一步观察.     

不同培养体系对鼠-猪异种嵌合胚胎发育和嵌合能力的比较

近年来,随着干细胞分化与再生医学研究的不断深入,异种嵌合已成为当前干细胞和再生医学领域的热点问题,并有望为未来解决器官移植供体来源严重短缺等再生医学难题开辟新的方向。异种嵌合以及异种器官再造过程中面临众多科学问题和技术难题,而异种嵌合过程中嵌合胚胎时期的选择,后续培养液的选择以及这些环节所造成的供体细胞与受体胚胎之间的发育平衡成为建立异种器官再造的第一个科学问题。猪由于具有与人类器官大小相似、繁殖快等特点,成为异种嵌合最适合的潜在研究对象。为了提高鼠-猪异种嵌合胚胎中小鼠供体细胞——诱导多潜能干细胞(Induced pluripotent stem cells,i PSCs)的存活率和增殖率,我们尝试以i PSCs培养液(N2B27)以及N2B27→PZM-3梯度更换的培养液(N2B27(3.5 h))作为研究异种嵌合胚胎体外发育培养的对象,并与猪胚胎培养液(PZM-3,Porcine zygotic medium)体系下发育进行比较,从而评价了这3种培养液在8-细胞和囊胚期注射后,对嵌合胚胎后续发育的影响及嵌合情况。结果显示,8-细胞期注射后,PZM-3不仅对嵌合胚胎的后续发育较为有利,更有利于小鼠i PS嵌合到猪胚胎中;囊胚期注射后3种培养体系下GFP阳性嵌合率差异不显著,但其嵌合率显著低于8-细胞期嵌合率。结果表明,PZM-3培养体系更有利于鼠-猪异种嵌合胚胎的体外发育,对8-细胞期胚胎进行嵌合操作有益于提高鼠-猪异种嵌合后胚胎的嵌合率。