平菇漆酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及酶学性质研究

采用RTPCR技术克隆到一个平菇(Pleurotusostreatus)漆酶基因的全长cDNA,命名为lccPo1,其序列提交GenBank,登录号为AY450404。将其ORF克隆到毕赤酵母表达载体pHBM906,转化3株毕赤酵母GS115、KM71和SMD1168,该漆酶基因在3种毕赤酵母菌株中均实现了分泌表达。3种摇瓶培养条件①25℃,1.0%(VV)甲醇;②20℃,1.0%(VV)甲醇;③20℃,0.5%(VV)甲醇,进行比较研究后发现适当提高甲醇浓度有利于漆酶在低温条件下表达,而降低培养温度到20℃则可以提高漆酶的产量2～6倍。3株重组毕赤酵母在其最适反应条件下测得三者粗酶液最高漆酶酶活分别为3.19UmL[GS115(pHBM565)]、2.56UmL[KM71(pHBM565)]和2.49UmL[SMD1168(pHBM565)]。对重组酶进行相关的酶学性质分析表明,三者的最适反应pH值约为4.2,最适反应温度约为60℃。重组毕赤酵母GS115(pHBM565)所产酶的热稳定性稍好,在pH稳定性方面三者没有太大差异。     

三叶悬钩子的组织培养

1植物名称三叶悬钩子(Rubus delavayi Franch.). 2材料类别腋芽. 3培养条件基本培养基为MS.启动培养基(即初代培养基):(1)MS培养基;继代培养基:(2)MS 6-BA 0.2 mg·L-1(单位下同) NAA 0.1;生根培养基:(3)1/2MS IBA 1.5.以上培养基均附加30%蔗糖和6 g·L-1琼脂,pH 5.8.培养温度为(23±2)℃,光照时间12 h·d-1,光照强度40～50μmol·m-2·s-1.     

1993～1994年度中国生物化学核心期刊

１９９３～１９９４年度中国生物化学核心期刊张晓加（中国科学院上海文献情报中心,上海２０００３１）关键词核心期刊,生物化学,引文法我国１９８６～１９９０￣［１］和１９９０～１９９２￣［２］年度生物化学核心期刊已有报道,《生物化学与生物物理进展》、《生物...     

垫囊绿绵蜡蚧生物学特性及防治研究

<正> 垫囊绿绵蜡蚧Chloropulvinaria psidii(Maskell)属同翅目蜡蚧科,是为害茶树和多种果树的重要害虫。近年来在湖南省石门、洞口、衡山等县茶园发生严重,如国营东山峰农场     

人头骨雕制标本制作法

头部是人体最重要的部分,结构比较复杂,因此初学者甚感困难。为了减少学习中的困难,制作一定的标本是很需要的。标本的制作应尽量在一个标本上多做几个地方,这样一方面节约材料;一方面还可显示各部之间的相互关系。比单独显示一个部位的标本更为有益。为此,介绍头骨雕制标本的制作方法。操作过     

叶面喷施钙镁肥对‘妃子笑'荔枝果肉苹果酸积累的影响

为探讨叶面喷施钙镁肥对‘妃子笑''荔枝果肉苹果酸积累的影响,该文对‘妃子笑''荔枝树冠作喷布0.3%氯化钙(Ca)、0.3%氯化镁(Mg)及其二者混合(Ca+Mg)等水溶液处理,以树冠喷布清水为对照(CK),测定不同生长时期果肉水溶性钙和镁、苹果酸等含量及苹果酸代谢相关酶活性的动态变化,并作多元线性相关分析。结果表明:(1)苹果酸含量呈“L”型变化,Mg、Ca和Ca+Mg处理在果实发育前期促进苹果酸积累,Ca处理在后期促进苹果酸积累。(2)果肉水溶性钙含量总体呈上升趋势,水溶性镁含量大致呈“M”的动态变化趋势。(3)CK和Ca处理的苹果酸含量与NADP-ME活性、Ca+Mg处理的苹果酸含量与PEPC和NAD-MDH活性等均呈正相关,CK的苹果酸含量与PEPC活性、MS活性呈负相关。(4)水溶性钙抑制NAD-MDH、NADP-ME等活性,水溶性镁抑制NAD-MDH、MS等活性。综上认为,钙、镁叶面营养通过改变水溶性钙、镁等含量和苹果酸代谢途径不同关键酶活性而影响果肉苹果酸积累,其中Ca处理可能通过积累更多的苹果酸而抑制果肉呼吸作用,进而使果肉减少糖分损失,在生产中可作施肥技术应用。该研究结果为我国荔枝实际生产提供一定的理论参考和技术支持。     

甲型副伤寒杆菌抗噬菌体及生物膜形成基因的筛选及鉴定

细菌生物膜(bacterial biofilm,BF)与大部分的细菌感染相关,有助于病原菌抵抗外部不利的环境,包括抗生素和抗噬菌体等.为了研究生物膜和抗噬菌体的作用机制,本文以6株抗噬菌体甲型副伤寒杆菌(副甲菌)突变菌作为研究对象,在Rif+(利福平)(200 mg/L)平板中划线并滴加噬菌体验证能否抗噬菌体,将6株突变菌接种于96孔板中,每组3个重复,观察其成膜能力以及生物膜的形态,定点突变和互补实验验证突变菌的噬菌体抗性是否由突变基因所引起.结果显示:划线平板中野生型副甲菌在滴加1.2×106个噬菌体处出现空缺,而6株突变菌在滴加2.4×109个噬菌体后仍能生长,表明6株突变菌具有抗噬菌体特性;6株突变菌中,σ-54依赖的翻译调节器突变菌成膜能力(A595=1.1±0.2)较野生型副甲菌(A595=0.5±0.1)显著性增强,且差异显著(P0.05),光学显微镜下菌体聚集成粗大的不规则团块;同源重组敲除野生型副甲菌σ-54依赖的翻译调节器,突变菌出现噬菌体抗性,将表达σ-54依赖的翻译调节器的载体转化该突变菌,突变菌又恢复了噬菌体敏感性.结果表明,σ-54依赖的翻译调节器是抗噬菌体和生物膜形成相关的基因.     

山核桃种质资源遗传多样性的RAPD分析

运用RAPD分子标记技术对山核桃种质资源的五处天然居群遗传多样性进行了初步研究。20条10bp随机引物共检测出252个扩增位点,其中多态性位点168个,多态性位点比率为66.7%。依据Shannon’s表型多样性指数,山核桃种质资源的遗传多样性水平相对较高,群体内变异占总变异的60.32%,居群间变异率为39.68%。五处天然居群中,岛石居群遗传多样性水平最高,为0.2800,临目居群最低,为0.1992。群体内平均遗传距离为0.0914,居群间平均遗传距离为0.1188。丰富的遗传多样性可保证山核桃种质群体能够持续生存和发育,也为山核桃选优、品种改良及遗传育种工作奠定了遗传学基础。     

青藏高原高原鼠兔Na+,K+-ATP酶β2亚基基因编码区的克隆与分析

目的:克隆青藏高原高原鼠兔Na ,K -ATP酶β2亚基(ATP1B2)的基因编码区,并分析其序列特征,以揭示高原鼠兔低氧适应的分子基础。方法:采用RT-PCR技术从高原鼠兔脑组织中扩增出ATP1B2基因编码区cDNA序列并进行序列测定,采用生物信息学技术对其进行分析。结果:ATP1B2基因编码区由873bp组成,编码290个氨基酸残基。序列分析结果显示,高原鼠兔ATP1B2编码区的核酸序列与兔、人、牛、大鼠、小鼠及狗分别有99%、93%、91%、91%、90%和90%的同源性。结论:克隆出青藏高原高原鼠兔ATP1B2基因编码区,为进一步了解高原鼠兔低氧适应的分子机制提供了基础。     

外源氨基酸胁迫下植物体内游离氨基酸的测定

目的：通过检测外源氨基酸胁迫下植物体内的游离氨基酸含量,探讨氨基酸胁迫下植物生长受抑制的机制。方法：小麦胚接种在加入D-丙氨酸、D-丝氨酸和L-缬氨酸等3种外源氨基酸的培养基中,其发芽和生长会受到强烈抑制。取材胁迫植株和对照植株,提取并用HPLC方法检测游离氨基酸含量,分析主要氨基酸特征的改变。结果：作为处理的胁迫氨基酸在体内有数倍到数十倍的增高,其他氨基酸,尤其是同族及相近族氨基酸的量也出现较大改变,有增加也有减少,有些氨基酸甚至检测不出。结论：在外源氨基酸胁迫下,植物可直接吸收这些氨基酸,胁迫氨基酸在体内的积累。至少影响到了部分氨基酸的合成,使细胞内正常游离态氨基酸的数量增加或减少,这些变化引起代谢失调,进而引起生长抑制。