催化吲哚生成靛蓝的细胞色素P450BM-3 定向进化研究

以催化吲哚产生的靛蓝在 630 nm 处具有特殊的吸收峰为高通量筛选指标,将来源于 Bacillus megaterium 的细胞色素 P450BM-3 单加氧酶的基因序列用易错聚合酶链式反应进行定向进化,通过多轮突变,在原有的能产靛蓝的高活力突变酶的基础上成功获得了三个高于亲本酶的突变酶,突变酶的酶活分别是亲本酶的 6.6 倍 (hml001) , 9.6 倍 (hml002) 和 5.3 倍 (hml003) ,并对突变酶的动力学参数进行了分析 . 突变酶 DNA 测序的结果表明, hml001 含有一个有义氨基酸置换 I39V , hml002 含有三个有义氨基酸置换 D168N , A225V , K440N , hml003 含有一个有义氨基酸置换 E435D ,这些突变位点有些远离底物结合部位,有些位于底物结合部位 .     

甘蔗茎尖培养中减轻酚害

甘蔗茎尖组织预先在无菌水中浸泡30 min后,再接种到附加6-BA 2.0 mg·L-1、NAA 0.1 mg·L-1的MS培养基中,可减轻外植体的褐变;茎尖诱导培养基中直接附加适量的活性炭(AC,以0.02%为宜,最高不超过0.05%),减轻茎尖组织酚害的效果最理想.另外,在培养基中附加抗氧化剂(如:聚乙烯吡咯烷酮,PVP),或根据外植体的褐变情况及时转移到新鲜的培养基中,均能减轻甘蔗茎尖组织的酚害.     

同源重组法制备口蹄疫病毒多基因重组腺病毒

通过细菌内同源重组的方法成功构建了含有O型口蹄疫病毒P1—2A和3C蛋白酶基因和3D基因的重组腺病毒表达载体。首先将P1—2A、3C和3D基因亚克隆连接到穿梭质粒pShuttle—CMV上,再将重组穿梭质粒用PmeI线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy—1的大肠杆菌BJ5183感受态菌,经细菌内同源重组产生pAdcmv—p12x3c和pAdcmy—p12x3cd重组腺病毒质粒,经序列测定证实目的基因已正确的插入到腺病毒骨架载体中。重组腺病毒质粒经PacI线性化后转染HEK293细胞,转染1w内细胞出现典型病变。取转染细胞裂解液上清连续传代至第4代时,细胞于24～48h内即病变完全,收取接毒后24h细胞进行。PCR和RT—PCR检测,表明目的基因已整合到腺病毒基因组内,且在mRNA水平上有表达。取第4、6、8和10代病毒,用蛋白酶K处理后可扩增出目的基因,证明此重组病毒可稳定存在。本研究为FMDV腺病毒活载体疫苗的研究奠定了基础。     

鞣花酸的生理功能及工艺开发研究现状

综述了鞣花酸的防癌,抗癌作用及其机理,同时对它的抗人体免疫缺陷病毒,抗氧化,凝血、降压、镇静等作用也作了论述,并对其生产工艺作了简单介绍。     

痕量胺相关受体1信号转导通路的研究进展

痕量胺相关受体1 (trace amine-associated receptor 1, TAAR1)是一类经典G蛋白耦联受体,广泛分布于哺乳动物的脑内,尤其是边缘系统和富集单胺能神经元的区域,是一种在所有物种中高度保守的TAAR亚型。TAAR1可以特异性应答中枢神经系统和外周组织中的内源性微量胺,在单胺系统和谷氨酸系统失调引发的精神障碍的病理生理学机制中具有重要意义。另外,TAAR1调节剂可以作用于内向整流钾离子通道,对突触传递和神经元活动具有调节作用。最新的研究表明,TAAR1通过调节细胞内信号通路和底物磷酸化发挥一系列生理功能,与情绪、认知、恐惧和成瘾有着密切的联系。本综述对TAAR1信号转导通路的相关研究进行了详细的梳理,旨在揭示TAAR1作为神经精神疾病药物治疗新靶点的巨大潜力。     

非吞噬细胞NAD(P)H氧化酶生成的活性氧参与基因表达和信号转导

以前认为,NAD(P)H氧化酶仅存在于吞噬细胞,负责吞噬细胞呼吸爆发时产生活性氧(ROS)以杀灭微生物。现在发现正常非吞噬细胞也有NAD(P)H氧化酶,称之为类NAD(P)H氧化酶。该酶在生长因子和细胞因子的刺激下,介导非吞噬细胞产生胞内或胞外的ROS,通过此途径产生的ROS对细胞增殖、分化和血管形成和缺氧反应等生理过程至关重要。这些新的发现。有力地证明了ROS作为细胞“信号分子”和“基因表达开关”的积极作用,改变了过去只把ROS看作有害物的误解。     

花生蛴螬空间分布型研究及药效评价方法探讨

花生蛴螬田间分布属于聚集分布。在已知的m m回归关系的基础上提出了不同密度下花生蛴螬的理论抽样数和防治花生蛴螬的田间试验方法 ,并对 2种药效计算方法进行了评价。     

牛尾草中一新的对映-贝壳杉烷型二萜

从牛尾草[Isodon ternifolius(D.Don)Kudo]的地上部分分离得到一个新的对映－贝壳杉烷型二萜,命名为牛尾草素H（1）,通过波谱方法鉴定了它的结构。此外,还分离得到5个已知的对映－贝壳杉烷型二萜化合物：香茶菜醛（2）,长管香茶菜素A,E和G（3－5）,开展香茶菜素E（6）,以及木樨草素（7）,芹菜素（8）,α－香树脂醇（9）,乌索酸（10）和2α－羟基乌索酸（11）。     

土茯苓提取物抗细菌活性的研究

通过测定土茯苓提取物对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抑菌活性,来更全面的评价和综合利用土茯苓资源,实验结果表明土苓955乙醇和乙酸乙酯的提取物抑菌范围广,服抑菌活性强,这两种提取物的MIC和MBC值显示了土茯苓作为抗细菌资源的可利用价值。     

浅谈小学数学新授课的导入

俗话说"一出好戏要有好的开头,一堂好课要有好的开端"。上课伊始,为了使学生集中精力,自然地进入学习境地,激发学生浓厚的学习兴趣,我们有必要在新课的导入上做精心的设计,导入新课是教师教学艺术的重要组成部分。恰当导入新课,可以巧妙地拉开知识的序幕,吸引并激发起学生的学习兴趣和求知欲望,使学生主动获取知识。导入新课的策略主要有利用旧知,巧用素材,联系生活,动手操作,激发兴趣等导入法。总之,无论采用什么方式导入,只要能使学生对所学内容本身产生兴趣,就能成功地导入新课。