土壤含水量调控高寒草原生态系统N_2O排放对增温的响应

土壤氧化亚氮(N_2O)排放是大气N_2O不可忽视的来源。然而,目前学术界在气候变暖对土壤N_2O排放影响方面的认识仍存在较大争议,且调控土壤N_2O排放的微生物机制尚不明确。为此,该研究以青藏高原高寒草原生态系统为研究对象,使用透明开顶箱(OTCs)模拟气候变暖,并基于静态箱法测定了2014和2015年生长季(5–10月)的土壤N_2O通量,同时利用定量PCR技术测定了表层(0–10 cm)土壤中氨氧化古菌(AOA)和氨氧化细菌(AOB)的基因丰度。结果显示:增温处理导致2014和2015年生长季表层(0–10 cm)土壤温度分别升高了1.7℃和1.6℃,土壤体积含水量下降了2.5%和3.3%,其他的土壤理化性质没有发生显著变化。土壤N_2O通量呈现年际差异,2014和2015年生长季的平均值分别为3.23和1.47μg·m~(–2)·h~(–1),然而,增温处理并没有显著改变土壤N_2O通量。2014年生长季主导硝化作用的AOA和AOB的基因丰度分别为5.0×10~7和4.7×10~5拷贝·g~(–1),2015年为15.2×10~7和10.0×10~5拷贝·g~(–1)。尽管基因丰度存在显著的年际差异,但在两年中与对照相比并未发生显著变化。在生长季尺度上,增温导致的土壤N_2O变化量与其引起的土壤水分变化量之间显著正相关,而与土壤温度的变化量之间没有显著相关关系。以上结果表明,增温导致的土壤干旱会抑制土壤N_2O通量对增温的响应,意味着未来评估气候变暖情景下土壤N_2O排放量时需考虑增温引发的土壤干旱等间接效应。     

人转化生长因子β1在大肠杆菌胞内表达的研究

转化生长因子β(transforming growth factor β,TGFβ)是细胞增殖、分化的重要调节蛋白之一,同时还参与了细胞外基质形成、胚胎发育、骨重建等多项病理和生理过程,并在创伤愈合、免疫抑制、肿瘤抑制等多方面具有广阔的     

人神经生长因子基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

神经生长因子(Nerve　Growth Factor,NGF)是最早发现的生长因子之一。它对中枢和周围神经元具有存活分化效应^[1]。NGF有可能治疗Alzheimers老年痴呆病、某些周围神经病变和脊髓损伤^[2]。NGF在人体组织中含量极微,已有报道从胎盘中纯化hNGF,但其组织来源极其有限,成本高,产量低．不能满足对hNGF的需求,所以如果能利用基因工程方法获得大量有生物学活性的hNGF制品,对其基础理论研究和临床应用具有深远的意义。我们根据已知序列设计合成一对引物,以人基因组DNA为模板,用PCR获得hNGF基因,并构建重组表达质粒．使rehNGF在大肠杆菌中获得表达,表达产物具有免疫学和生物学活性。     

hBMP－2cDNA在COS细胞和小鼠肌肉中的表达

研究了骨形态发生蛋白ＢＭＰ－２ｃＤＮＡ在ＣＯＳ细胞和小鼠肌肉中的表达的情况,从ｐＳＰＳ６５ＢＭＰ－２质粒中回收ＢＭＰ－２ｃＤＮＡ,删除５＇端的非翻译序列,插入ｐＳＶＬ载体中,构建了含有ＢＭＰ－２全长编码序列的重组表达质粒ｐＳＶＬＢＭＰ－２。将表达质粒导入ＣＯＳ－７细胞中,细胞ＲＮＡ点杂交结果表明,转染ＢＭＰ－２基因的细胞内ＢＭＰ－２的ｍＲＮＡ水平明显升高;细胞培养上清的ＥＬＩＳＡ显示,转染ＢＭＰ－２ｃＤＮＡ后,细胞分泌产生的ＢＭＰ－２显著增加。小鼠实验发现,在肌肉内用注射法导入ＢＭＰ－２重组质粒后,局部组织内ＢＭＰ－２的ｍＲＮＡ转录水平也明显提高。     

紫草素逆转埃克替尼对肺癌EGFR-TKI 耐药及其机制的研究

目的:观察紫草素联合埃克替尼对肺腺癌耐药细胞H1975增殖的影响,探讨克服耐药可能的作用机制。方法:应用MTT法检测紫草素(1.25~20μmo/L)、埃克替尼(5~100μmol/L)及两药联合干预对H1975细胞生长的抑制作用;流式细胞术观察紫草素(1.25μmol/L)、埃克替尼(10μmol/L)及联合使用对H1975凋亡作用;Western blot检测不同干预对H1975细胞EGFR、p-EGFR、AKT、p-AKT、ERK、p-ERK和凋亡相关蛋白PARP表达水平的影响。结果:MTT检测结果显示,与单药组相比,联合用药组细胞H1975增殖能力明显减弱,差异有统计学意义(P0.05);流式细胞术结果显示,联合用药组细胞的凋亡率达到(52.45±3.04)%,较紫草素组细胞凋亡率(22±1.17)%和埃克替尼处理组细胞凋亡率(15.35±5.85)%明显提高,差异有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示,单药组下调了p-EGFR、p-Akt蛋白水平的表达,而联合用药组显著抑制了p-ERK、PARP蛋白水平的表达,差异有统计学意义(P0.05),EGFR、AKT、ERK蛋白表达无差异(P0.05)。结论:紫草素联合埃克替尼能明显抑制H1975细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡;抗肿瘤机制可能与调节EGFR信号通路相关蛋白表达有关。     

静注人免疫球蛋白(pH4)中抗-HBs效价双抗原夹心ELISA的验证

目的用双抗原夹心ELISA检测静注人免疫球蛋白(p H4)(human immunoglobulin for intravenous injection,IVIG)中抗-乙型肝炎病毒表面抗体(HBs)效价并进行方法验证。方法依据2003年版《药品生产验证指南》,对用双抗原夹心ELISA进行专属性、重复性、中间精密度、线性、准确度、范围、耐用性的验证;并与放射免疫方法测定抗-HBs效价的结果进行比对。结果专属性验证中,6次独立试验的回收率在83.7%~101.1%区间内;重复性试验中10、40、80、160 IU/L 4个浓度的3次重复检测结果的RSD均<20%;中间精密度验证结果显示,两位分析人员不同时间各测定6次,检测结果的RSD=5.2%,均<20%。F检验显示,人员和时间两因素在α=0.05水平上对检测结果均无统计学意义(P=0.41>0.05,F=2.19);线性验证中,抗-HBs免疫球蛋白国家标准品和IVIG成品各重复3次的相关系数r分别为0.984 3、0.990 7、0.982 2、0.991 7、0.988 3、0.992 5,均>0.980 0;在准确度验证中,3次重复检测结果的回收率为84.10%~114.10%;耐用性结果显示,在试验加入终止液后0、3、6、9、12 min的测定结果均与0 min无统计学意义(Dunnett t test,α=0.05,P>0.05,t(3)=1.350.05,t=2.27)。结论经验证,用双抗原夹心ELISA检测IVIG中抗-HBs效价,其专属性、重复性、中间精密度、线性、准确性、范围和耐用性均符合要求,该方法准确可靠、简便快速,可替代放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)用于IVIG中抗-HBs效价的测定。     

55例社区获得性肺隐球菌病病例分析

本文旨在通过研究社区获得性肺隐球菌病的临床特点,提高医务人员对肺隐球菌病的认识,做到早期诊断和治疗.采用回顾性病例分析研究,统计2003年1月~2009年12月入住复旦大学附属中山医院的55例确诊及临床诊断为肺隐球菌病患者的临床资料.55例患者中,男性34例,女性21例;年龄17~75岁,平均(44.8±13.4)岁....     

MRI对卵巢成熟畸胎瘤术前诊断初步探讨

目的:探讨MRI对卵巢成熟畸胎瘤术前诊断价值及手术方式选择的指导意义.方法:回顾性分析经妇科手术治疗、病理诊断为卵巢成熟畸胎瘤58例,术前均行MRI扫描.采用自旋回波(SE)序列、快速自旋回波(FSE)序列、压脂序列、DWI序列扫描.常规行矢状面、横断面及冠状面扫描.结果:(1)病变位于右侧卵巢30例,左侧卵巢28例,双侧卵巢3例.(2)病变大小为1.2-16.7cm,边缘较清晰,形态多为类圆形.(3)病变为囊性或囊实性.其内成分多样,MRI信号显示混杂,脂肪成分MRI上T1W、T2W为双高信号,脂肪抑制序列为低信号;牙齿、毛发、软骨、纤维成分T1W、T2W为双低信号;肌肉、神经成分T1W、T2W为等信号.(4)病变小于10 cm,其内脂肪成分较多,无腹腔镜手术禁忌症患者行腹腔镜卵巢畸胎瘤切除术;病变大于10 cm,钙化、毛发等实性成分较少时,能耐受膀胱截石位,行阴式卵巢畸胎瘤切除术;病变大于15 cm,或病变较小但以钙化、牙齿、毛发等实行性成分为主,怀疑恶性卵巢畸胎瘤或者不能判断病变性质时行传统方式开腹卵巢畸胎瘤切除术.结论:MRI能较好显示卵巢畸胎瘤内部结构及成分,在临床手术术式选择方面具有指导意义.     

PDCD4和DNMT1在卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义

目的:检测PDCD4和DNMT1在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织、卵巢上皮性癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:采用免疫组化法检测20例正常卵巢、25例卵巢良性肿瘤、40例卵巢上皮性癌组织中PDCD4和DNMT1的表达情况,分析其与卵巢上皮性癌临床病理参数之间的关系。结果:正常及良性卵巢组织中PDCD4的阳性表达率明显高于卵巢癌组(P0.05),卵巢癌的FIGO分期越高,PDCD4的表达越低,卵巢癌的病理分化程度越低,PDCD4的表达也越低,PDCD4的表达与卵巢癌的组织类型、腹水、年龄、是否绝经无关。正常及良性卵巢组织中DNMT1的阳性表达率明显低于卵巢癌组(P0.05),卵巢癌的病理分化程度越低,DNMT1的表达越高,但其与卵巢癌的FIGO分期、组织类型、腹水、年龄、是否绝经均无关。卵巢癌中DNMT1的与PDCD4的表达呈显著负相关(P0.05)。结论:PDCD4和DNMT1在卵巢癌中的表达呈负相关,PDCD4的表达下调和DNMT1的表达上调可能在卵巢癌的发生及发展中起重要作用。     

心力衰竭患者症状群变化研究及对患者生活质量的影响

摘要 目的：探讨心力衰竭患者症状群的变化情况,并分析其对生活质量的影响。方法：前瞻性选取我院2018年10月～2020年10月收治的心力衰竭患者122例,分别在患者入院时及出院3后个月、6个月进行Memorial心力衰竭症状评估量表（MSAS-HF）、明尼苏达心力衰竭生活质量量表（MLHFQ）评分,分析患者MSAS-HF评分与MLHFQ评分的相关性以及患者出院后6个月生活质量的影响因素。结果：心力衰竭患者出院后3个月、6个月的疲倦、不适、情绪、淤血、缺血、呼吸困难症状群评分及总分均低于入院时,且出院后6个月的情绪症状群评分低于出院后3个月（P＜0.05）;心力衰竭患者出院后3个月、6个月的情绪领域、躯体领域、其他领域评分及总分低于入院时,且出院后6个月的情绪领域评分、总分低于出院后3个月（P＜0.05）;出院后6个月心力衰竭患者MSAS-HF各维度评分及总分与MLHFQ总分呈正相关（P＜0.05）;单因素分析显示：患者出院后6个月生活质量与入院时左室射血分数（LVEF）、入院时MSAS-HF总分、入院时纽约心功能分级（NYHA）、病程有关（P＜0.05）;Logistic多元回归分析提示：入院时LVEF≤40%、入院时NYHA Ⅳ级、病程＞5年是患者出院后6个月生活质量的危险因素（P＜0.05）,而入院时MSAS-HF总分＜40分是患者出院后6个月生活质量的保护因素（P＜0.05）。结论：心力衰竭患者出院后3、6个月的症状群程度均减轻,生活质量有所改善,患者入院时症状群对生活质量有影响。