共培养的树突状细胞与CIK细胞的体外增殖和杀瘤活性研究

本文观察树突状细胞与同源CIK细胞共培养后培养物的表型、增殖活性变化,及DC对CIK细胞细胞毒活性的影响。提取健康供血者的PBMC,常规诱导出DC与CIK细胞,用A549肺腺癌细胞裂解液抗原冲击DC,并和CIK细胞共培养,动态观察DC-CIK培养物增殖活性和表型变化;定量检测细胞培养上清中的IFN-γ和IL-12;并用MTT法检测共培养细胞杀伤A549肺腺癌细胞和BEL-7404肝癌细胞的活性。结果表明DC与CIK细胞共培养,通过彼此的相互作用诱导出比CIK细胞增殖活性和杀伤活性更强的细胞群体。经A549肺腺癌细胞裂解液抗原冲击的DC活化的CIK,对A549肺腺癌细胞的杀伤活性高于单纯CIK细胞,差异显著(p<0.05)。二者对BEL-7404肝癌细胞的杀伤活性无显著差异。实验证明DC与CIK共培养细胞是一种增殖活性和细胞毒活性高于CIK细胞的免疫活性细胞,经肿瘤抗原冲击的DC能明显提高CIK对肿瘤细胞的杀伤活性,具有更广阔的应用前景。     

自噬通路基因多态性与晚期非小细胞肺癌含铂化疗疗效的相关性分析

对晚期非小细胞肺癌患者采用含铂化疗是肺癌临床治疗中非常重要的方法,然而不同患者对含铂化疗的敏感性却存在着明显的个体差异,这提示发现潜在的分子标志物对预测临床中含铂化疗疗效具有关键作用。本研究旨在探索自噬通路基因多态性与晚期非小细胞肺癌含铂化疗疗效之间的相关性,以期寻找可能影响含铂化疗药物敏感性的分子标记。本研究纳入了1004例接受含铂化疗的晚期非小细胞肺癌患者,分析了自噬通路中13个基因上的99个SNP位点与含铂化疗临床获益、无疾病进展时间及总生存时间之间的相关性。研究发现,位于ULK1基因的位点rs7953348(G>A) (P=0.017, OR:0.67, 95%CI:0.49~0.93)和rs12303764(A>C) (P=0.009, OR:0.63, 95%CI:0.45-0.89)及位于ATG14基因上的位点rs17742719(C>A) (P=0.002, OR:1.83, 95%CI:1.26~2.66)、rs8003279(A>G) (P=0.006, OR:1.65, 95%CI:1.16~2.35)和rs1009647(G>A) (P=0.002, OR:1.70, 95%CI:1.22~2.37)与临床获益存在显著关联,位于DRAM基因上的位点rs7955890(G>A) (P=0.004, HR:0.63; 95%CI:0.46~0.86)和rs17032060(G>A) (P=0.006, HR:0.65, 95%CI:0.48~0.88)及位于ATG3基因上的位点rs13082005(G>A) (P=0.012, HR:1.27,95%CI:1.05~1.53)与含铂化疗的无疾病进展时间显著相关,位于ULK1基因的位点rs7953348(G>A) (P=0.011, HR:0.74, 95%CI:0.58~0.93)和位于ATG10基因上的位点rs1864183(G>A) (P=0.016, HR:0.42, 95%CI:0.21~0.85)对含铂化疗的总生存时间有着显著影响。研究结果提示自噬通路在含铂化疗敏感性中发挥着重要作用,自噬通路基因多态性可能是预测含铂化疗疗效的潜在分子标志物,这可能为临床上肺癌的个体化医疗提供一定的理论基础。     

细颗粒物对呼吸系统疾病的影响

大城市阴霾天气的频频出现,引起社会对其罪魁祸首——细颗粒物(即PM2.5)的广泛关注。PM2.5对健康的影响成为人们普遍担忧的问题。本文综述了PM2.5与呼吸系统疾病关系的流行病学研究进展。结果显示,短期暴露于较高浓度的PM2.5与哮喘急诊就诊率、慢性阻塞性肺病(COPD)患者急性加重住院率、肺炎急诊住院率的上升及COPD日死亡风险的增加均有关;长期暴露于较高浓度的PM2.5与肺癌及肺炎死亡风险增加、肺腺癌和哮喘发病风险增加有关。上述研究结果大部分来自西方发达国家,提示了我国有效控制PM2.5浓度及开展更多关于PM2.5流行病学研究的必要性和紧迫性。     

RNA干扰技术在哺乳动物中的应用

RNA干扰(RNAi)是生物界普遍存在的一种抵御外来基因和病毒感染的进化保守机制.RNAi是由双链RNA触发的转录后基因沉默机制,具有序列特异性,在哺乳动物细胞中,RNAi由21～23个核苷酸组成的双链RNA引发.小干扰RNA(siRNA)可以在体外合成或通过表达载体在哺乳动物细胞内合成.由于RNAi技术具有快速、简单和特异性强等特点,在基因功能研究、抗病毒治疗和抗肿瘤治疗等方面有广泛的应用前景.     

55例社区获得性肺隐球菌病病例分析

本文旨在通过研究社区获得性肺隐球菌病的临床特点,提高医务人员对肺隐球菌病的认识,做到早期诊断和治疗.采用回顾性病例分析研究,统计2003年1月~2009年12月入住复旦大学附属中山医院的55例确诊及临床诊断为肺隐球菌病患者的临床资料.55例患者中,男性34例,女性21例;年龄17~75岁,平均(44.8±13.4)岁....     

用核磁共振波谱技术结合多维变量分析研究人体肺癌组织萃取液的代谢组特征

肺癌严重威胁着人类的健康, 其发病率和死亡率均居世界恶性肿瘤首位. 临床上, 肺癌的诊断主要依靠组织病理切片. 清楚地了解肿瘤的生化代谢特征能为肺癌的准确诊断提供重要帮助. 当前, 生物组织萃取液的高分辨核磁共振波谱作为一个极好的调查组织生化代谢的工具已得到广泛应用, 特别是它与多维变量分析方法相结合已成为研究生物组织代谢特征的重要平台. 本研究通过HR NMR波谱技术结合多维变量分析方法(主要包括主成分分析和偏最小二乘法-判别分析方法)得到了34个肺癌病人在3个不同组织位点的101例肺组织萃取液的代谢组特征. PCA研究显示, 肺癌组织在不同的位点具有不同的代谢组学特征. 与临近的非侵入肺组织相比, 肺癌组织中乳酸的含量显著升高, 而肌醇、谷氨酰胺和缬氨酸的含量显著下降. 本研究表明, 用正交偏最小二乘法-判别分析方法可很好地区分临近的非侵入组织和肺癌组织, 该模型预测肺癌的准确性为100%.     

一种线性化聚乙烯亚胺介导的EGFR靶向siRNA转运系统在人肺腺癌细胞中的优化与评价研究

RNA干扰技术在靶基因验证和人类肿瘤治疗研究方面都已显示出良好的应用前景。目前小干扰RNA（siRNA）体内应用较为理想的转运工具是非病毒载体,其中聚乙烯亚胺（PEI）以其高效性和通用性而最具代表性。本研究以一种线性化PEI为载体构建靶向表皮生长因子受体的siRNA转运系统,采用琼脂糖凝胶电泳阻滞实验,和以Lipofectamine2000为对照的SPC-A1腺癌细胞转染实验,对决定LPEI／siRNA-EGFR复合物转染效率的N／P比条件进行优化,用RealtimeRT-PCR和流式细胞技术检测各组细胞的EGFR表达,最后以动态光散射技术和原子力显微镜对最优化条件下形成的LPEI／siRNA-EGFR复合物进行基本物理特性观察。结果显示,N／P≥5时siRNA可被LPEI充分聚合浓缩,且N／P=5时形成的LPEI／siRNA-EGFR复合物可引发最高效且特异的EGFR表达抑制,其效率与Lipofectamine2000转染结果相当。该最优化N／P比条件下所形成的复合物是一种大小较为均一的椭圆形颗粒,其粒径小于100nm,表面带有较低的正电荷,该特性可有利于细胞摄取和内吞。以上研究表明,这种LPEI介导的以EGFR为靶向的siRNA转运系统极可能成为人肺腺癌基因治疗的新策略,对此仍需进一步的体内验证。     

肺腺癌细胞中STAT3表达对细胞生长及药物敏感性的影响

目的:探讨STAT3表达变化对细胞生长及化疗药物敏感性的影响.方法:采用AG490处理细胞、SOCS3基因转染A549细胞后.Western blot检测STAT3蛋白酪氨酸磷酸化水平变化;MTT法检测细胞增殖情况;不同浓度泰素处理细胞后观察细胞对药物的敏感性.结果:AG490处理细胞、SOCS3基因转染细胞后,Western blot证实其能显著抑制STAT3蛋白酪氨酸磷酸化水平(P<0.01);MTT法结果示细胞增殖明显受到抑制;细胞对泰素敏感性显著增高.结论:STAT3能促进细胞增殖,AG490、SOCS3能显著抑制A549细胞中STAT3蛋白的活性,从而抑制A549细胞生长并增加其对化疗药物的敏感性.