人类肥胖基因瘦素蛋白的原核表达

目的：原核表达人类肥胖基因瘦素蛋白,方法：以携人类肥胖基因的pUC119-ob为模拟,PCR扩增瘦素蛋白基因片段,并克隆到pET-32a构建重组表达质粒pET-32a-ob,经酶切和测序鉴定后,转化至大肠埃希菌DH5α中表达,SDS-PAGE电泳鉴定表达产物。结果：测序和限制性分析均证明了pET-32a-ob的序列正确,转化的DH5α可高效表达一个30kD融合蛋白,与预期结果一致。结论：经pET-32a-ob转化的DH5α可有效表达重组人类瘦素蛋白,为进一步研究瘦素蛋白的生物活性提供了基础。     

中国单胞锈菌属若干种的订正

对我国5种单胞锈菌的名称作了订正。有4种是我国的新记录,即异形单胞锈菌(Uromyces aberrans,假木贼单胞锈菌U.anabasis,异芒菊单胞锈菌U.blainvilleae和盐角草单胞锈菌U.salicorniae。基于无性型标本描述的芽单胞锈菌Uromyces gemmatus被改订为巴西单胞锈菌Uromyces brasiliensis。     

HPVl6和11型Ll基因双价重组质粒的构建

目的　人乳头瘤病毒 (Humanpapillomavirus ,HPV)是一种性传播疾病的病原体 ,由于HPV目前在体外无法进行大量有效地繁殖 ,所以国内外专家都将重点放在基因工程疫苗的研制上。而HPV各型别之间不具有明显的交叉性 ,为防止各型别混合感染 ,联合不同型别的多价基因工程疫苗的研制势在必行。HPV基因组晚期基因L1主要编码主要衣壳蛋白L1,可以自我组装成病毒样颗粒 (virus likeparticles,VLP) ,并可刺激机体产生中和抗体 ,对病毒的攻击起到保护作用。本研究构建HPV16 11L1双价真核表达质粒 ,为制备一种同时可以预防宫颈癌和尖锐湿疣的基…     

HPV16和11型L1基因双价重组质粒的构建

目的人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HpV)是一种性传播疾病的病原体,由于HPV目前在体外无法进行大量有效地繁殖,所以国内外专家都将重点放在基因工程疫苗的研制上.     

假丝酵母Candida rugosa产脂肪酶条件的优化

对假丝酵母Candidarugosa产脂肪酶的条件进行了优化.比较实验证明,碳源是影响酶产量的主要因素.其中,糖类使细胞生长良好,但酶产量较低,而脂类是较为适合的碳源.本实验首次发现长链的不饱和脂肪酸酯,三油酸甘油酯是最好的碳源.氮源的影响较小.而添加物的使用是有效提高脂肪酶产量的另一种方法.PVA可促进碳源的乳化,从而提高脂肪酶产量.吐温虽没有促进细胞生长,但却大幅度提高了酶的产量.将以上优化的结果应用于发酵罐中,分批流加操作时,脂肪酶产量高达每毫升128.2单位,为目前报道的最高值.     

SARS-CoV(BJ01)基因预测及功能推测

通过对有关SARS—Cov文献的调研,指出了有关基因预测和功能研究的不足。为制备有效的药物和疫苗,对SARS—CoV(BJ01)重新进行了基因预测和功能推测。比较12种基因预测方法对冠状病毒属中已知基因的预测优劣,选用Heuristic models、Gene Identification、ZCURVE—CoV和ORF FINDER4种较好的方法来预测基因,然后运用AT—Gpr分析第一起始密码子的可能性及是否符合Kozak规则,同时搜索转录调控序列,以提高基因预测的准确性。共预测出34个ORF,排除NCBI及有关文献中完全相同或有微弱差别的13个,得到21个大于50个氨基酸的可能新基因。对于预测出的蛋白质,运用ProtParam分析它们的物理化学特征,用SignaIP分析蛋白是否有信号肽,用BLAST、FASTA分析是否有相似序列,用TMPred、TMHMM、PFAM和HMMTOP分析结构域或模体,以提高基因功能推测的可靠性。根据4种基因预测方法使用情况、与其他冠状病毒属已知基因匹配分值、匹配预期值、已知基因与预测基因长度差别,将21个可能的新基因按出现可能性分为4类。同时对结果进行了讨论。     

丹参氮、磷肥效效应及最佳施肥模式研究

在陕西省商州市山阳县不同肥力土壤上,采用N、P二因素五水平最优设计,进行了丹参氮、磷优化配方施肥模式研究的多点田问试验。根据田间试验结果,求得不同土壤肥力水平下的N、P肥效反应方程,根据方程提出丹参不同产量水平的N、P合理配比和肥料用量。寻优结果表明,在山阳低肥力土壤目标产量10000～11500kg／hm^2之间的施氮为88．17～165．7kg／hm^2,施磷(P2O4)为88．18～165．7kg／hm^2;中肥力土壤目标产量在11000～14000kg／hm^2之间的施N量为108．5～187．4kg／hm^2,施磷(P2O5)为105．1～179．5kg／hm^2;高肥力土壤目标产量在20000～25000kg／hm^2之间的施N量为85．4～173．1kg／hm^2,施磷(P2O5)为121．95～179．01kg／hm^2。合理施用N、P肥有利于提高丹参产量,但过量施肥会造成丹参减产。     

Fd的制备及其参与的HPLC—荧光法检测PaO活力研究

PaO体外活力测定需要Fd作还原剂。通过丙酮沉淀法、DEAE柱层析等制备菠菜Fd,并将其应用于HPLC—荧光法研究PaO催化的Pheide α降解反应。结果表明：经DEAE柱层析纯化得到的是氧化型Fd,而未经DEAE柱层析得到的是还原型Fd,还原型Fd可以参与Pheide α降解反应,色谱峰面积可以表示PaO的活力;FCC的HPLC洗脱时间是5．1min,遮光条件下FCC的半衰期是34．66min,PaO在20℃催化Pheide α降解的活力较高。小麦幼苗离体暗诱导衰老过程中PaO活力变化幅度较大,暗处理5d其活力增加24．47倍,“PaO”Chl降解途径在麦类作物叶片衰老过程中普遍存在。     

朱Huan分布与栖息地内农民的关系

1998到2000年间,我们在陕西省洋县应用样方法调查了朱Huan(Nipponia nippon)活动区（面积约1000平方公里）内所有正在使用的巢和部分往年的旧巢,以及主要夜宿地和觅食地,并将当地的地形,水系和居民区数字化,建立了地理信息系统数据库。通过对共空间位置的统计分析,发现朱Huan显著倾向于在村庄附近栖息。朱Huan的活动区与湿地的分布密切相关,而村庄都分布在湿地附近。朱Huan与人类保护一定的预警距离,同时也对农民的日常活动表现出一定的适应性。我们分析了朱Huan二十年来的繁殖成功率,发现它与巢址到农户的距离无关。而且,朱Huan营巢的海拔逐年降低,其主要活动区正向人口更密的低海拔农村转移。因此,我们认为朱Huan对以人类为主导的山村生态系统有良好的适应性。     

紧密连接蛋白Claudin-7参与调节恶性肿瘤发生发展过程的研究进展

claudin-7是构成细胞间紧密连接的重要分子,在维持细胞极性和紧密连接屏障功能方面起着重要的作用。近年来的研究发现claudin-7的异常表达与多种恶性肿瘤的发生发展有密切关系。ERK1/2等信号分子参与了调节claudin-7在恶性肿瘤细胞中的表达。本文对claudin-7分子在多种恶性肿瘤中的表达变化及相关机制进行综述。