养殖乌鳢类立克次体分离纯化的初步研究

1989年,Fryer等从导致智利海水养殖Coho salmon(Oncorhynchus kisutch)90%死亡率的病鲑组织感染的鲑细胞系中首次分离得到一种类立克次体(Kickettsia like organism,RLO)并命名为Piscirickettsia salmonis gen.nov.,sp.nov.。近十年来,这种被日益重视的、专性细胞内寄生的RLO(细胞内的细菌),已被证实为导致鱼类严重传染性疾病的致病因子.2001-2002年,作者首次发现湖北省某养殖场淡水养殖乌鳢(Op hiocep halus argus C.)突发性大规模发病死亡系RLO感染引起。由于乌鳢细胞系的建立尚在进行之中,因此从病变组织直接进行RLO的分离、纯化对进一步开展病原体分类及快速、准确的诊断技术等分子生物学研究至关重要。       

蓝舌病毒HbC株与不同种系细胞相互作用及群特异性抗原特征

BTV-HbC株和蓝舌病毒标准株BTV-10分别接种在不同种系细胞如猴肾传代细胞(Vero)、人宫颈癌细胞(Hela)和小鼠神经胶质瘤细胞(C6)等细胞株上,比较研究了BTV-HbC在不同种系细胞上的增殖特征,BTV-HbC与BTV-10在相同细胞上的复制增殖特征,病毒与细胞相互作用的显微和超微结构特征.用免疫交叉反应研究了BTV-HbC株与BTV-10型标准株之间的血清学关系.本研究结合本室对BTV-HbC株基因组图谱分析和蓝舌病毒群特异性抗原编码基因S7的RT-PCR分析,进一步证实了BTV-HbC株可能是一个新的血清型蓝舌病毒.     

视网膜色素变性中GUCA1B、GNGT1和RGS9基因突变筛查

为寻找视网膜色素变性的致病基因,从120个家系收集视网膜色素变性先证者,制备基因组DNA。应用PCR―异源双链-SSCP法,分析GUCA1B基因4个外显子、GNGT1基因编码区和RGS9基因视网膜特异性转录区,寻找基因变异。序列分析确定突变。结果表明,31人的GUCA1B基因外显子1存在T/C多态。所有先证者中均未检测到GUCA1B、GNGT1和RGS9基因突变。认为本组病例未发现GUCA1B、GNGT1和RGS9基因的突变。 Abstract:To screen possible disease-causing mutations in the GUCA1B gene,GNGT1 gene,and the alternative-splicing region of RGS9 gene in 120 probands with retinitis pigmentosa,genomic DNA was collected from 120 probands with retinitis pigmentosa out of 120 families.The coding sequences of the GUCA1B and GNGT1 genes and the alternative splicing region of the RGS9 gene were analyzed by using PCR-heteroduplex-SSCP method.Mutation was confirmed by DNA sequencing.A T/C polymorphism was identified in exon 1 of the GUCA1B gene in 31 of the 120 probands.Heteroduplex-SSCP analysis of the GUCA1B and GNGT1 coding regions and RGS9 alternative splicing region showed no mutations in 120 patients with retinitis pigmentosa.We found no evidence that mutation in GUCA1B,GNGT1,or RGS9 gene is a cause of retinitis pigmentosa.     

小麦淀粉合酶基因III片段的克隆及反义和RNA干扰载体的构建

采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出淀粉合酶III基因（starch synthase III, SSIII）部分cDNA片段(509bp) (GenBank No. EF466009),同源性比较结果显示,它与GenBank 上已报道的SSIII基因有高度同源性。以pWM101质粒为基础,构建了由35S启动子调控的SSIII基因的反义表达载体pWM101SSIII;另外,还以pFGC5941质粒为基础,构建了SSIII基因的RNAi干扰载体pFGC5941SSIII,这些载体的构建为研究此基因的功能打下了很好的基础。     

用~（18）F-FDG观察脂肪肝患者肝脏葡萄糖摄取变化

目的：通过PET/CT检查观察脂肪肝患者肝脏及其他组织对18F脱氧葡萄糖（18F-FDG）摄入变化,探讨脂肪肝与糖脂代谢的相关性。方法：36例做PET/CT的健康和2型糖尿病男性患者,分为对照组（n=18例）;脂肪肝组（n=9例）;糖尿病脂肪肝组（n=9例）。常规测血糖、血脂及肝肾功能。PET/CT测肝脏CT值和肝脏、肾皮质,骨骼肌组织18F-FDG的最大标准摄入值（SUVmax）及平均标准摄入值（SUVmean）。结果：1.糖尿病脂肪肝组的TG显著高于单纯脂肪肝组和正常对照组,P=0.0003,0.0000。单纯脂肪肝组的TG亦显著高于正常对照组,P=0.028。2.糖尿病脂肪肝组的肝脏18F-FDG的SUVmean和SUVmax显著高于正常对照组的SUVmean和SUVmax,P=0.0054,0.0133。单纯脂肪肝组的肝脏SUVmean和SUVmax亦高于正常对照组,但比较无统计学差异。脑皮质、肾皮质和骨骼肌组织的18F-FDG的SUVmean和SUVmax三组间比较无显著性差异。3.Spearman相关性分析发现FBG与TG显著正相关（r=0.59919,P=0.0004）;FBG和TG与肝脏的CT值显著负相关（r=-0．55625,P=0．0004;r=-0．45739,P=0．0097）。结论：脂肪肝与空腹血糖和甘油三酯升高显著相关。脂肪肝及2型糖尿病脂肪肝患者肝脏对葡萄糖摄取增高。     

木薯外植体快速、高效消毒的简易方法

本研究以木薯栽培种华南7号的幼嫩茎段为外植体,就取材地点,取材时间,取材天气,消毒试剂进行筛选研究,以发展一套木薯外植体快速、有效消毒的简易方法.实验结果表明,来自室内培养植株的外植体接种污染率低.大田取样中午脱菌效果好于清晨和傍晚.连续晴天取材脱菌效果比雨后第2天稍好.0.1%HgCl2对室内所取材料消毒效果好于10%NaClO的消毒效果,前者无菌率平均高达90%以上.     

木薯的再生体系和基因转化方法

木薯是一种很有发展潜力的非常古老的作物,但是木薯的育种工作却处于非常年轻的阶段.随着生命科学技术的发展,木薯育种工作也得到了进一步提高,由传统育种向现代育种转变,从各个方面对木薯品种进行分子改良.本文对近几十年来木薯生物技术研究取得的进展进行了系统的回顾和分析.木薯分子改良包括两个方面:木薯遗传转化体系和基因转化方法的发生、发展.目前研究所用的木薯再生系统途径,主要包括器官发生途径、体细胞胚胎发生途径:常用且有成功先例的木薯基因转化方法,包括农杆菌介导法和基因枪法.最后对前人研究的成果和存在的问题进行了讨论,并展望了以后的发展方向.     

油菜花粉总黄酮的微波辅助提取及其抗氧化活性研究

采用微波辅助提取法提取油菜花粉总黄酮,通过单因素和正交试验,得到最佳提取条件：80％的乙醇、1：20的料液比、提取时间140s、微波功率242W、提取3次,总黄酮质量分数为（2．64±0．05）％。同时还研究提取物对羟自由基、DPPH自由基的清除作用,以及对小鼠肝组织脂质过氧化的抑制作用,自由基半清除质量浓度和脂质过氧化丰抑制盾奄浓度分剐为0．115、0．325和0．065mg／mL。     

外来物种入侵后的多物种竞争共存的集合种群模型

基于多物种竞争共存模型,提出外来物种与本地物种竞争共存途径的两种假想:外来物种通过插队竞争与本地物种实现共存;外来物种通过等位竞争与本地物种实现共存.并提出根据外来物种在两种竞争共存模式下占据生境斑块比例的稳定值大小来判断外来物种和本地物种的竞争共存途径.根据两种假想,分别建立了外来物种插队竞争共存模型和等位竞争共存模型.通过应用数学软件Mathematica 4.0对两个模型进行了模拟,得出以下结论:在外来物种与本地物种竞争共存状态下,如果外来物种通过插队竞争与本地物种实现共存,当本地物种竞争力差异较大时,外来物种极易对本地稀少物种构成危害.虽然外来物种不会直接造成本地稀少物种的灭绝,但是会使本地稀少物种的生境斑块急剧减少,增加本地稀少物种灭绝的可能性,而当本地物种竞争力差异较小时,外来物种对本地所有物种的影响都较小.如果外来物种通过等位竞争与本地物种实现共存,无论本地物种竞争力差异大小与否,外来物种只是影响到与其生态位相同的本地物种,影响程度取决于外来物种侵入时所占据生境斑块的比例大小.