猪γ-干扰素的克隆表达及单抗的潜在应用

以刀豆素A(ConA)刺激长白猪外周血单个核细胞(PBMC),提取的总RNA为模板,采用一步法RT-PCR扩增出包含猪γ-干扰素(PoIFN-γ)完整基因的片段。将完整的PoIFN-γ基因亚克隆到pET-32a(+)上,构建pET-IFN-γ融合表达载体,转化入Rosetta(DE3)后IPTG诱导表达,得到大小约为36.8kD的目的蛋白。将目的蛋白检测及纯化后免疫后BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,最终筛选出3株能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞。ELISA叠加试验显示,3株单抗针对相同或邻近的PoIFN-γ抗原表位,制备的腹水中单抗间接ELISA效价为1×104。选取单抗IF-2株进行单抗的潜在应用研究,Westernblotting分析结果显示单抗IF-2株能与融合表达蛋白产生特异性反应,与pET-32a(+)标签蛋白无反应;间接免疫荧光检测(IFA)发现,在采用腺病毒表达系统表达PoIFN-γ的HEK-293细胞中散在大量特异性荧光。     

华中特有珍稀植物裸芸香的AFLP遗传多样性分析

采用选择性扩增片段多态性(AFLP)方法对华中特有单种属植物裸芸香(Psilopeganum sinense)的8个自然居群的遗传多样性进行了检测与分析。结果表明:裸芸香的遗传多样性较低,且居群内遗传多样性显著低于物种水平遗传多样性。筛选出的5对引物共得到180个位点,76个为多态位点,多态位点百分率为42.2%,8个居群多态位点百分率为:3.3%～16.7%,居群平均多态位点百分率为9.4%;8个居群Nei多样性指数为0.01987～0.06987,Shannon’s多样性指数为0.0197～0.0816。居群间分化系数Gst=0.5069,居群间基因流为0.2432,不足以维持居群间的基因交流及现有的遗传结构。AMOVA分析表明总遗传变异的13.17%存在于4个地理区域之间,50.45%存在于地理区域内的居群间,36.38%的遗传变异存在于居群内个体间。NTSYS分析表明遗传距离与地理距离不存在相关关系。UPGMA聚类结果表明长江南北两岸的居群并没有产生明显分化。最后,分析了裸芸香的濒危原因并提出了有效的保育措施。     

伞花猕猴桃的分类学修订

在查阅猕猴桃属植物标本时,发现了伞花猕猴桃(Actinidia umbelloidesC.F.Liang)的新分布点,分布地点位于西藏和云南,补充了其花部特征的描述,并将扇叶猕猴桃(Actinidia umbelloidesC.F.Liang var.flabellifoliaC.F.Liang)作为伞花猕猴桃的异名处理。     

地黄属和崖白菜属等位酶的变异研究

利用超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳技术,对玄参科Scrophulariaceae地黄属Rehmannia 6种植物和崖白菜属Triaenophora 2种植物共52份材料进行了7个酶系统的等位酶分析。在7个酶系中共检测到18个清晰位点和45个等位基因,多态位点为17个;并将遗传学数据用软件Biosys-1进行分析,结果表明:同种内个体间表现出较大的遗传同质性,而不同种的个体则表现出明显的趋异性。除高地黄R.elata和裂叶地黄R.piasezkii外,其余6种植物之间遗传分化较明显,8个种按聚类结果分为两支,崖白菜属的崖白菜T.rupestris和神农架崖白菜T.shennongjiaensis聚为一支,位于分支树的基部;地黄属的地黄R.glutinosa、茄叶地黄R.solanifolia、天目地黄R.chingii、湖北地黄R.henryi、高地黄和裂叶地黄为另一支。在地黄属中,高地黄和裂叶地黄之间的亲缘关系最近,地黄和裂叶地黄关系最远。本研究结果不支持把高地黄和裂叶地黄作为两个独立的种。地黄属与崖白菜属在遗传上具有较高水平的相似性,它们在生活史和形态学上仍然保留有许多共同的特征,说明它们之间分化的时间可能不长。     

伞花猕猴桃的分类学修订

在查阅猕猴桃属植物标本时,发现了伞花猕猴桃(Actinidia umbelloides C.F.Liang)的新分布点,分布地点位于西藏和云南,补充了其花部特征的描述,并将扇叶猕猴桃(Actinidia umbelloides C.F.Liang var.flabellifolia C.F.Liang)作为伞花猕猴桃的异名处理。     

湖南小溪自然保护区巴东木莲群落结构

巴东木莲(Manglietia patungensis)分布于湖南西北部、湖北西南部和重庆市,是中国特有的稀有濒危物种。湖南小溪自然保护区是巴东木莲分布面积最大且最集中的地区。对巴东木莲群落乔木层结构及优势树种径级组成的分析结果表明,该群落属于典型的常绿阔叶林,群落乔木层可分为三个亚层:第一亚层优势树种为落叶树种枫香(Liquidam bar form osana)和常绿树种巴东木莲;第二亚层以利川润楠(Machilus lichuanensis)为优势树种;第三亚层的优势树种是长叶石栎(Lithocarpus henryi);优势树种径级组成表明,巴东木莲在该群落中与其它优势树种形成稳定的共存群落;巴东木莲在群落中呈聚集分布格局。本研究为正处于生境消失、群落结构被破坏的巴东木莲群落恢复与重建提供科学依据。建议在小溪自然保护区内严格限制对巴东木莲种子的采收,禁止在林下采挖巴东木莲的幼苗,确保巴东木莲在自然状态下得以保持其种群和个体数量的自然增长。     

赤■属的胚胎学研究(英)

描述了葫芦科赤爬属植物生活史的主要过程以及胚胎学的重要特征,它们是：腺质绒毡层,胞质分裂同时型,小孢子四分体四面体型和等面体型,花粉粒散发时具两细胞,双珠被,厚珠心,寥型胚囊,珠孔端受精,胚胎发育柳叶菜型。     

赤■属的系统学研究

采用比较形态学方法,本文详细地描述了赤属植物根、根状茎、茎、卷须、花序、花萼、花冠、雄蕊群、雌蕊群、果实、种子以及毛被的形态特征,并讨论了某些形态学性状的系统学意义。本文首次描述和记录了该属植物的传粉生物学特征以及传粉媒介,并讨论了造成该属某些种结实率低的原因。本文还根据现存赤属及其近缘属植物的分布式样以及它们的属下分类群的系统演化式样,确定了中国的横断山系和大巴山系地区是该属植物的现代分布中心和分化中心,而中国云南南部和中南半岛北部地区的季节性山地雨林是该属植物的起源中心。在综合大量资料的基础上,本文对赤属作了分类学修订。确认该属有２２种,２变种,归并了２种和１０变种。