加速衰老小鼠脑组织中的衰老相关基因的表达

从分子水平上研究衰老对大脑的影响有助于揭示机体衰老的分子机理 ,也有助于揭示衰老相关性脑功能异常的发生过程。本研究应用DDRT PCR方法研究衰老相关基因在SAM (Senescence acceleratedmouse)小鼠脑组织中表达的变化情况。在SAMR1TA、SAMP8/Ta、SAMP1 0 /Ta三个品系中 ,通过比较不同鼠龄SAMP1 0 /Ta (2、 4、 1 2、 1 8月龄 )的基因表达情况 ,发现在 4月龄和 1 2月龄分别有一个差异表达片段 ;对不同鼠龄的SAMP8/Ta (2、 4、 1 1月龄 )经差显比较 ,发现在 2月龄和 1 1月龄各有一差异表达片段。在不同品系的比较中发现了 1 6个差异性片段 ,分别属于SAMP1 0 /Ta (3个 )、SAMP8/Ta (6个 )和SAMR1TA (7个 )。测序结果经检索显示 ,它们分别与下列基因转录产物同源 :热休克识别蛋白 70、ATP依赖性线粒体RNA螺旋酶、DleumRNA、小鼠X染色体RP2 3 334C4克隆DNA序列、还原型辅酶Q 细胞色素c还原酶复合物 7 2kD亚单位、 6 0S核糖体蛋白L2 1、FIS、苯基烷基胺钙离子拮抗物结合蛋白、岩藻糖基转移酶 9、胶质细胞源性神经营养因子家族受体α1、内切核酸酶 /逆转录酶、PER1蛋白相关超级融原核蛋白、中心体蛋白CG NAP、转铁蛋白重链基因、巢蛋白 2基因、DNA依赖性蛋白激酶催化亚单位基因 prkdc     

体内系统转基因新方法

建立了一种全新而高效的制备转基因动物新方法.无需外科手术,将含有绿色荧光蛋白的重组质粒直接多次多点反复注射到雄性ICR小鼠的睾丸内.几周后,上述雄性动物与自然发情的雌性交配,制备转基因动物.经PCR检测、DNA印迹,实验结果表明:F1代小鼠转基因阳性率为41%.经DNA印迹证明:外源基因已经整合到子代转基因动物的基因组内并能遗传给后代.将F1代阳性鼠与正常ICR鼠交配,产生F2代转基因鼠,F2代转基因阳性率37%.上述实验结果表明,建立的体内系统转基因方法简便、高效,适用于大规模制备转基因动物,特别适用于一些大型家畜.     

干扰素在哺乳动物早期胚胎发育中的作用研究进展

干扰素是由多种细胞产生的可溶性糖蛋白,具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用。但是越来越多的实验结果表明干扰素在哺乳动物胚胎植入子宫、怀孕的维持以及早期胚胎发育中发挥着重要作用。本文将结合本实验室的研究工作对干扰素的作用机制和近年来这一领域的研究进展做一综述。     

兔早期胚胎发育相关新基因IFRG的克隆和表达

近来的研究表明干扰素在哺乳动物早期胚胎发育中有重要的作用。我们首次克隆了兔早期胚胎发育相关新基因IFRG（干扰素应答基因）的全长cDNA序列（AJ584672）,根据该cDNA序列以兔卵巢cDNA为模板经PCR扩增后克隆了兔IFRG cDNA的完整开放阅读框(396bp)。将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-2上,在大肠杆菌BL21中进行了GST-IFRG融合蛋白的表达。 经IPTG诱导培养后,SDS-PAGE电泳检测结果显示在41kDa处有特异性表达蛋白,回收融合蛋白作为抗原免疫小鼠,制备多克隆抗体,通过Western杂交表明该融合蛋白具有生物免疫活性。     

兔植入前移核胚中发育相关基因的差异表达分析

与早期胚胎发育相关的一些重要基因异常表达致使克隆胚细胞核的再程序化过程受阻,是导致动物克隆失败的重要原因.为了分离鉴定再程序化相关基因,我们改进了mRNA差异显示技术,成功地建立了单胚差示技术体系.以不同发育时期的兔克隆胚（MⅡ卵、2细胞、4细胞、8～16细胞克隆胚胎）为材料进行单胚差示, 分离了80个差异片段.经反向RNA印迹验证、亚克隆、序列分析及NCBI GenBank数据库检索, 结果表明：A028片段与CstF3基因有93％的同源性, 在早期胚胎发育过程中的表达有阶段特异性, 该基因在兔克隆胚的早期发育过程中起重要作用.RNA印迹显示：该基因在所检测的组织中,只在卵巢中有表达.这项研究为再程序化相关基因全长的克隆及功能研究奠定了良好的基础.     

基因差异表达研究方法的探讨--从DD-PCR到cDNA RDA

ＤＤ－ＰＣＲ和ｃＤＮＡ ＲＤＡ都是近年发展起来的新技术,它们被应用于生物及医学领域,在基因差异表达和筛选差异基因的研究中有着广泛的前景。本文论述了ＤＤ－ＰＣＲ及ｃＤＮＡ ＲＤＡ的基本技术策略,并对两者进行了比较分析。     

Expression of Porcine Growth Hormone Gene in CHO Cell

ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＰｏｒｃｉｎｅＧｒｏｗｔｈＨｏｒｍｏｎｅＧｅｎｅｉｎＣＨＯＣｅｌｌＣＨＥＮＱｉｎｇ－ｘｕａｎ（陈清轩）;ＨＥＸｉｎ（何新）;ＤＥＮＧＨｕｉ－ｎａｎ（邓辉南）（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌＢｉｏｌｏｇｙ,Ａｃ...