基因组改组技术选育耐高温、耐高乙醇酿酒酵母菌株的研究

当以f4、f5、f6作为出发菌株,用酵母菌原生质体紫外诱变的方法,在不同温度下,用含有不同浓度乙醇的平板筛选,分别获得了在耐高温和耐乙醇性状有较大提高的f4.2、f5.1、f6.2、f4.5等正突变菌株。以这些菌株作为出发菌株,进一步用硫酸二乙酯诱变,获得了f5.1.1、f4.2.1两个乙醇耐受性能较高的菌株。在建立了上述不同突变株后,通过基因组改组(genome shuffling)的方法,将上述不同特性的菌株经过两轮genome shuffling,获得了耐高温性能和耐乙醇性能都较好的酵母菌株。经过摇瓶发酵后证明,R24株在35℃发酵过程中,发酵液中的最高乙醇浓度12.93%(W/V),比原始出发菌株f4在35℃的发酵液中最高乙醇浓度8.11%提高了近5%。     

耐热醋酸棱状芽孢杆菌中具有高的二硫键还原活性组分的提取和特性研究

用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ层析柱从Ｃ．ｔｈｅｒｍｏａｃｅｔｉｃｕｍ细胞提取物中分离出的两个具有相近分子量（７００）的活性组分,在ＭＶ＋存在下,对二硫键具有高的催化还原活性．这两组分参与的催化还原反应不以ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ为电子供体．在实验条件下,对二硫键的催化还原活性顺序为：ＧＳＳＧ＞硫辛酰胺＞胱氨酸＞硫辛酸．活性组分具有较高的反应稳定性和热稳定性．两组分在２６０、３５４和５０５（４６５）ｎｍ处具有特征吸收峰．     

啤酒废水二相厌氧消化动力学研究

本工作分阶段研究了啤酒废水厌氧消化反应特性。酸化初始速度很快,ｐＨ下降至４．０以下时,酸化产物对酸化菌代谢活性具有显著的抑制效应。系统ｐＨ值的大小对甲烷化过程中底物降解速率、产气速率和产气质量均有显著影响。ｐＨ６．５以上时,高浓度底物不构成底物抑制。底物浓度低于５００ｍｇ／Ｌ,甲烷化速率明显下降。合理控制预酸化程度以及甲烷化反应器的进料速率是提高厌氧消化处理效率,维持系统稳定性的关键措施。     

肺炎球菌表面蛋白的克隆表达与免疫原性研究

从肺炎球菌YF05中扩增了肺炎球菌表面蛋白A（PspA）和肺炎球菌表面黏附素A（PsaA）基因,以pET27b(+)为载体构建了重组表达质粒的表达系统后,转化入大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的75％,结果显示：表达的PspA蛋白和PsaA蛋白,分子量分别约为75kDa和37kDa。成功表达的重组蛋白具有较强的免疫活性和交叉免疫效果。     

六种弧菌多重PCR快速检测方法的建立

目的:检测鳗弧菌、哈氏孤菌、副溶血孤菌、溶藻胶弧菌、霍乱弧菌和创伤孤菌六种水产常见病原菌.方法:以toxR-toxS为靶基因设计引物,建立了一种多重PCR( multiplex PCR,mPCR)快速检测方法.结果:本研究设计的mPCR引物特异性强,与其他弧菌及非孤菌无交叉反应,每次反应的敏感性为10-100 CFU(cell forming unit)/每个反应.结论:应用建立的mPCR方法结果稳定可靠,有望成为检测病害弧菌的有效工具.     

肺炎克氏杆菌GDHt-γ亚基基因克隆与序列分析

目的：克隆编码肺炎克氏杆菌GDHt-γ亚基的基因并对其进行序列分析。方法：用酚氯仿抽提法提取肺炎克氏杆菌基因组DNA,用P1、P2为引物,PCR扩增GDHt-γ亚基基因,并对目的基因进行了测序并应用生物信息学进行序列分析。结果：PCR扩增出约426bp的目的DNA片段,与GenBank中报道的K．pneumoniae GDHt-γ亚基基因序列存在一个同义突变差异（Gin：CAG→CAA）。结论：成功地获得编码GDHt-γ亚基的基因,为进一步研究该亚基的结构与生物学功能奠定了基础。     

记忆性T细胞的形成与特点

免疫记忆是在缺乏抗原存在的情况下,免疫系统所具有的一个特殊警觉时期.关于记忆细胞的产生和维持机理以及体内的功能调控因子如何发挥功效等方面一直以来都存在着争论.随着生物化学和基因组学的发展,记忆性T细胞的形成及特点在分子水平方面已得到了良好的解释.     

氨基糖甙类抗生素JI-20A发酵培养条件的研究

研究了氨基糖甙类抗生素JI-20A分批发酵培养基和发酵工艺的优化。结果表明发酵培养基的优化组成为玉米淀粉60g/L,花生饼粉30g/L,麦芽糖10g/L,玉米浆8g/L,复合无机盐适量,淀粉酶适量,蛋氨酸1g/L和氯化钴6μg/mL。控制消后培养基pH值和氧的供应条件有助于抗生素JI-20A产生菌的菌体生长和产物合成。     

海藻多糖生物活性及分子修饰

简要介绍了近年来有关海藻多糖抗病毒、抗肿瘤、免疫促进、免疫抑制等生理活性的最新研究 ,重点介绍了不同种类海藻多糖的不同生理活性机理的研究进展。对多糖与生理活性之间的构效关系进行了阐述 ,在构效关系基础上进行多糖分子结构修饰是提高海藻多糖生理活性、降低毒副作用的有效手段。进一步介绍了目前多糖分子修饰常用方法 ,并对修饰后分子的生理活性改变进行了阐述。