双歧杆菌完整肽聚糖对小鼠骨髓来源树突状细胞分泌IL-12的影响

目的探讨相同剂量双歧杆菌完整肽聚糖（WPG）在不同时间对小鼠骨髓来源树突状细胞分泌IL-12的影响。方法将双歧杆菌WPG与小鼠骨髓来源树突状细胞共培养,分别在加入WPG后0、12、24、36、48和60h收集培养上清液,用ELISA法测定不同时间点上清液中IL-12的量。结果双歧杆菌WPG与树突状细胞共培养后,上清液中IL-12的量在24h内逐渐升高,至24h达高峰,24h后呈下降趋势;同0h组比较,12、24和36h组IL-12分泌量明显增加（P〈0.05）,而48、60h组同0h组比较差异无显著性（P〉0.05）。结论双歧杆菌WPG能够刺激小鼠骨髓来源的树突状细胞分泌IL-12;双歧杆菌WPG对树突状细胞的免疫刺激存在时间效应关系。     

扁蓿豆育成品系遗传多样性的RAPD研究

用 RAPD分子标记对4个扁蓿豆育成品系进行遗传多样性分析.结果表明:筛选的12条多态性RAPD引物共检测出126个等位基因位点,平均每条引物检测到10.5个位点,多态位点比率占94.4%.扁蓿豆品系的Nei's遗传多样性指数(H)为0.266 2,Shannon多样性指数(I)为0.414 5.Nei's指数估算和分子方差分析(AMOVA)均证实扁蓿豆品系的遗传多样性主要存在于品系内,品系间有一定的基因交流(基因流为2.756 7).聚类结果表明,品系00-61和00-81遗传差异相对较小,品系90-36与前两者之间的遗传差异较大,品系93-21与各品系的遗传差异最大.     

双歧杆菌WPG对正常和哮喘模型小鼠骨髓来源树突状细胞分泌细胞因子的影响

目的研究双歧杆菌完整肽聚糖(WPG)对正常和哮喘模型小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)分泌细胞因子的影响,探讨双歧杆菌WPG在防治过敏性疾病中的免疫调节作用。方法分离正常及哮喘模型小鼠骨髓单个核细胞,诱导生成未成熟DC,在培养的第7天将细胞分为WPG组、阳性组,其中WPG组每毫升培养液中加入双歧杆菌WPG 5μg,阳性组每毫升培养液中加入脂多糖(LPS)1μg,ELISA法检测DC培养上清中IL-12及IL-10的水平。结果正常小鼠WPG组DC分泌的IL-12、IL-10的量低于阳性组,哮喘小鼠WPG组DC分泌IL-12、IL-10的量高于阳性组,差异均具有统计学意义(P0.05);哮喘小鼠WPG组、阳性组DC分泌IL-12、IL-10的量分别低于正常小鼠WPG组、阳性组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论双歧杆菌WPG对具有功能缺陷的哮喘小鼠DC功能有一定调节作用,但其调节作用有一定限度,不能使细胞功能完全恢复到正常时的水平。     

中国北方农牧交错带C3草本植物δ13C与温度的关系及其对水分利用效率的指示

由于植物稳定碳同位素组成(δ¹³C)综合反映了植物光合过程中C、H₂O交换的信息,因而从理论上讲它可以作为植物长期水分利用效率的潜在指标,并揭示与植物生理生态过程相联系的一系列气候环境信息。通过对中国北方农牧交错带400 mm等降水样带上28个科的118种C3草本植物叶片δ¹³C值的测定,探讨了C3草本植物δ¹³C和水分利用效率(WUE)对环境温度梯度变化的响应以及气候环境因素对其产生的影响,揭示了样带控制植物δ¹³C变化的主要环境因子。结果显示: 在400 mm降水带上C3植物δ¹³C分布区间为-31.5‰ -23.0‰,平均值为-27.6‰,分布范围与黄土区干旱-半干旱区C3草本植物一致。整体C3植物δ¹³C随年均温度和夏季均温升高分别变重0.14‰/℃和0.27‰/℃,指示植物WUE随大气温度升高而增加。但这仅是一种表象,温度与植物碳同位素的这种关系实质上是温度升高导致的土壤相对湿度(或湿润指数)降低造成水分胁迫进而影响植物碳同位素分馏的结果,植物可利用的有效水分是本样带植物碳同位素分馏的控制因子。5种C3广适性植物δ¹³C均随温度升高而变重,但变化幅度不同,而且它们之间平均δ¹³C值有显著差异,表明不同物种的水分利用状况对温度的响应不同,说明不同物种有不同适应环境变化的策略。此外,本结果还显示不同寿命的草本植物δ¹³C值以及用碳同位素表征的WUE表现出多年生草本>2年生草本>1年生草本(可能与不同寿命草本植物的根系分布和吸水能力有关),这与Ehleringer等在沙漠地区研究的结果一致,而与湿润气候区的结果相反,表明不同寿命的草本植物δ¹³C值和WUE的变化可能与当地水分条件有关。     

乳杆菌吸附塑化剂的影响因素分析及效果评价

【目的】评价嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus) NCFM和类食品乳杆菌(Lactobacillus paralimentarius) 412吸附塑化剂的效果,初步探讨影响其吸附的因素。【方法】基于3种邻苯二甲酸酯类塑化剂：邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)的HPLC检测方法,评价了菌株NCFM和412与塑化剂共同温育时的吸附状况,优化菌株吸附DBP的条件,研究菌株在热、酸及NaCl处理后吸附塑化剂的稳定性。【结果】乳杆菌NCFM和412对3种邻苯二甲酸酯类塑化剂均有不同程度的吸附效果,其中菌株NCFM对3种塑化剂DEP、DBP和DEHP的吸附率分别为21.48%、43.32%和9.62%,吸附效果优于菌株412,其中DBP的吸附效果最好。在温度为37 °C时,菌株NCFM吸附DBP的最佳时间是4 h。热、酸和NaCl处理都会显著提高菌体NCFM吸附塑化剂的效果。【结论】嗜酸乳杆菌NCFM通过吸附作用具有清除3种邻苯二甲酸酯类塑化剂的效果,可以作为潜在的塑化剂生物脱除剂使用。     

猪瘟病毒T细胞表位E290多肽与猪细小病毒VP2蛋白在干酪乳杆菌中的共表达及免疫小鼠特异性抗体的测定

将分别编码猪瘟病毒T细胞表位E290多肽和猪细小病毒主要保护性抗原VP2蛋白的重组基因插入干酪乳杆菌分泌型表达载体pPG中,构建了重组表达载体pPG-VP2-E290,将其电转化干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393,获得了猪瘟病毒T细胞表位E290多肽与猪细小病毒VP2蛋白的乳酸菌共表达系统,经2%乳糖在MRS培养基中的诱导表达,对诱导表达的菌体及培养上清液进行SDS-PAGE检测表明,有约70kDa蛋白得到了表达,表达蛋白的大小与理论值相符。Western blot分析结果表明所表达的蛋白具有与天然病毒蛋白一样的抗原特异性。以诱导表达上清液作为抗原进行的间接ELISA实验也表明,重组的目的蛋白获得了分泌表达。将该重组干酪乳杆菌经口服接种途径免疫BALB/c小鼠,收集粪便样品检测小鼠产生抗PPV的特异性sIgA抗体,采集血液样本检测血清中抗PPV及抗E290的特异性IgG。结果表明分泌型的重组菌pPG-VP2-E290/L.casei 393免疫小鼠能够产生明显的抗体水平,为重组猪瘟与猪细小病毒乳酸菌口服活菌疫苗的研制奠定了重要的物质基础。     

重组干酪乳杆菌在模拟消化环境中生存性能的研究

目的 探讨重组干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393在模拟胃肠道环境中的存活能力.方法 人工模拟胃肠道环境,即人工胃液（pH=1.5～4.5）、人工肠液、胆汁（质量浓度0.3～3.0 g/L）和高盐（质量浓度40～90g/L）.结果 重组干酪乳杆菌在pH为2.5～4.5的人工胃液中具有较强的生存能力,3 h活菌数仍达108/ml;在人工肠液中经过不同时间的作用后,重组干酪乳杆菌显出生长趋势;在0.3%的胆汁环境作用8 h仍有存活,且能耐受7%NaCl浓度的高渗环境.结论 实验为干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393能否作为益生菌制剂在胃肠道中发挥作用提供了理论基础.     

不同添加物对D-核糖产量的影响

采用短小芽孢杆菌转酮酶缺陷突变株 ,通过先后向培养基中添加适量的葡萄糖酸钠、Mn2 + ,直接或间接地影响D 核糖的生物合成途径 ,最终影响D 核糖的产量。此外向培养基中添加芳香族氨基酸中的酪氨酸 ,有机酸中的山梨酸可以促进D 核糖的生物合成 ,使其产量达 6 4.2 g/L。     

肺形侧耳低温胁迫时期的转录组分析

本文以肺形侧耳栽培菌株X57为研究对象,利用高通量RNA测序技术对4℃低温处理0h、6h和12h后的肺形侧耳进行基因表达分析来探讨肺形侧耳低温应答机制。分析结果筛选出低温处理6h差异表达基因742个,其中上调表达基因374个,下调表达基因368个;低温处理12h差异表达基因1 489个,其中上调表达基因占53%,下调表达基因占47%。Gene Ontology（GO）功能聚类分析表明,差异表达基因主要富集在结合、催化分子功能组和代谢过程、细胞过程生物学过程中。KEGG功能富集分析结果显示,差异基因主要富集在氨基酸、核糖体和类固醇生物合成,及氮类物质代谢的通路上,富集到与低温胁迫相关通路MAPK signaling pathway-yeast上的基因表达随低温处理时间的增加呈上调趋势。已报道HOG-MAPK通路是MAPK途径研究较为明确、信号传递单一的真菌低温胁迫中重要的通路,本文运用生物信息学软件构建肺形侧耳的HOG-MAPK通路,并利用荧光定量PCR对相关基因表达进行验证,结果显示以低温处理0h为参照,随着低温胁迫时间增加通路上大部分基因的表达量持续上升,且差异显著,与RNA‐Seq分析结果一致。本文通过全面分析肺形侧耳低温胁迫时期基因表达情况,为进一步研究肺形侧耳低温胁迫相关重要基因的功能鉴定与信号通路调控机理提供基础。     

代谢工程在D-核糖生产中研究现状及应用前景

简要介绍了代谢工程的进展情况,并较为详细地从宿主的选择、加速限速反应、改变代谢流和生产过程的优化等方面论述了代谢工程在D-核糖基因工程菌构建方面的应用及其应用前景。