在流行性非甲非乙型肝炎病人粪便中检出疑似非甲非乙型肝炎病毒

流行性非甲非乙型肝炎首先在印度发现(Khuroo,M.S.:Am.J.Med.,68:818,1980),我国新疆南部地区自1984年开始相继发生流行(刘玉璋等:中华预防医学杂志,20:209,1986)。1986年11月～1987年4月,在和田地区洛甫县又发生了局部爆发流行。经排除甲、乙型肝炎,巨细胞病毒(CMV)和EB病毒感染后,证明为一次流行性非甲非乙型肝炎。患者主要为青壮年。在流行区采集急性期病人粪便,用病人恢复期血清做免疫电镜,在甲,乙两名病人粪便中查见有清晰抗体桥的直径27～30nm的廿面体病毒颗粒集落。     

基于辅因子调控对大肠杆菌两阶段发酵产丁二酸的影响

考察了E.coli NZN111及其重组菌株E.coli NZN111/pTrc99a-pncB发酵生产丁二酸的性能。E.coli NZN111两阶段发酵丁二酸的同时,会造成丙酮酸的大量积累。研究发现:通过过量表达烟酸转磷酸核糖激酶,两阶段发酵重组菌株E.coli NZN111/pTrc99a-pncB,减少丙酮酸的积累且无副产物乙酸生成,提高丁二酸的产量,丁二酸得率和耗糖速率分别提高了139%和20%。     

CTLA4Ig-IRES-OX40Ig重组腺病毒的构建及其生物学特性

利用基因重组技术,拼接目的基因CTLA4Ig-IRES-OX40Ig,并亚克隆入腺病毒载体pTrack-CMV中,构建pT/CTLA4Ig-IRES-OX40Ig载体,与pAdeasy-1共同转染BJ5183以进行同源重组,所获得的重组子用LipofectAMINE2000转染293A细胞包装病毒,获得了可同时分别表达CTLA4Ig和OX40Ig的重组腺病毒AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig,并进行扩增和滴度测定,用Western印迹鉴定293A细胞培养上清中目的基因的表达,用混合淋巴细胞反应研究其免疫抑制活性.利用上述方法成功构建了穿梭质粒pT/CTLA4Ig-IRES-OX40Ig;并且获得了重组腺病毒AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig,在感染的293A细胞的培养上清中可以同时检测到CTLA4Ig和OX40Ig分子;AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig、AdCTLA4Ig和AdOX40Ig感染的Lewis大鼠脾细胞(刺激细胞)对Balb/c小鼠的脾细胞(反应细胞)的增殖均具有抑制作用,但AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig感染组的抑制效率明显强于AdCTLA4Ig和AdOX40Ig感染组,体外实验证实该两种分子可协同作用,强烈抑制混合淋巴细胞反应.     

封闭CD28-B7和OX40-OX40L共刺激通路诱导异种胰岛移植物耐受的研究

抑制T细胞的活化可以有效延长移植物的存活时间. 研究表明, 在体外混和淋巴细胞反应体系中分别加入CTLA4Ig和OX40Ig蛋白, 可以强烈地抑制T细胞的增殖. 用链脲佐菌素(200 mg/kg)腹腔注射诱导糖尿病小鼠, 在进行胰岛移植的-1天, 经尾静脉输注5×10⁸ pfu AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig, 胰岛移植物的存活时间明显延长(100.3±14.94)天, n = 6, 并对外源性葡萄糖的刺激反应正常, Th1型细胞分泌细胞因子的能力明显受到抑制, 表明重组腺病毒AdCTLA4Ig-IRES-OX40Ig在小鼠体内可以高效地表达CTLA4Ig和OX40Ig分子, 并且诱导对大鼠胰岛移植物的耐受, 提示其在器官移植耐受的诱导中具有潜在的应用价值.     

过量表达烟酸转磷酸核糖激酶对大肠杆菌NZN111产丁二酸的影响

大肠杆菌NZN111厌氧发酵的主要产物为丁二酸,是发酵生产丁二酸的潜力菌株。但是由于敲除了乳酸脱氢酶的编码基因 (ldhA) 和丙酮酸甲酸裂解酶的编码基因 (pflB),导致辅酶NADH/NAD+不平衡,厌氧条件下不能利用葡萄糖生长代谢。构建烟酸转磷酸核糖激酶的重组菌Escherichia coli NZN111/pTrc99a-pncB,在厌氧摇瓶发酵过程中通过添加0.5 mmol/L的烟酸、0.3 mmol/L的IPTG诱导后重组菌的烟酸转磷酸核糖激酶 (Nicotinic acid phosphor