用微卫星标记构建两系稻培矮64s/E32的分子遗传连锁图 Construction of a Microsatellite Linkage Map in a DH Population

用两系杂交稻强优组合培矮64s/E32的一个加倍单倍体（DH）群体,共86个株系,构建了水稻的SSR标记遗传连锁图。选用美国康耐尔大学公布的302对SSR引物,共有127对在两个亲本间检测到多态性,比率为4205%。建成的水稻染色体的图谱（记为PEMAP）共包含122个SSLP标记座位,总长度为1213.4 cM。PEMAP与Temnykh等发表的图谱（记为CUMAP）具有很高的可比性,绝大多数标记都被定位于相同的染色体上,且排列顺序一致。该DH群体的偏分离情况较严重,122个标记座位中有34个发生显著偏分离,比例达27.8%。值得注意的是,在第1、3、10、11染色体上的标记全部偏向培矮64s,第4、6、7、8、9染色体上的标记则全部偏向E32。 Abstract:A doubled haploid population (DH) consisting of 86 lines derived by anther culture of Peiai64s/E32,a two-line hybrid rice variety with high heterosis,was used to construct a microsatellite or SSLP linkage map of rice chromosomes.A total of 302 PCR primers for SSLP analysis on these chromosomes were chosen from a map published by Cornell University (designated CUMAP) and 127 (42.05%) of them were found polymorphic between the two parents.Those polymorphic PCR primers were used for population genotyping.The map (designated PEMAP) comprises 122 microsatellite maker loci,covering a total length of 1213.4 cM.The PEMAP is highly comparable with the CUMAP.Most of the markers were mapped onto the same chromosomes and aligned in the same order.Serious segregation distortion was observed in this DH population,with 34 (27.8%) markers showing significant deviation.It is noted that all markers on chromosomes 1,3,10 and 11 were biased to Peiai64s,while those on chromosomes 4,6,7,8 and 9 were opposite.     

介导两种半纤维素酶分泌表达的信号肽比较

木聚糖酶和甘露聚糖酶是两种主要的半纤维素酶,广泛应用于诸多领域。选择了3种毕赤酵母内源信号肽Scw11、Dse4和Exg1,以α-factor为参照,分别在毕赤酵母X33中用于表达实验室前期获得的耐热木聚糖酶DSB和耐热甘露聚糖酶Man A,选择适合DSB和Man A表达的信号肽以提高胞外酶活水平。结果表明不同信号肽引导的两种半纤维素酶的酶活水平相差较大:对DSB(分子量为23k Da),α-factor介导的表达效率明显优于其它3种信号肽;但对Man A(分子量为30k Da),Dse4和α-factor介导的表达效率相当且明显优于Scw11和Exg1。因此在X33中表达DSB时应选用α-factor,而表达Man A时应选用Dse4或α-factor。此外胞内酶活的结果显示α-factor介导的DSB和Man A重组菌胞内滞留酶活明显高于其它信号肽,而分子量为30k Da的Man A的滞留酶活又明显高于分子量为23k Da的DSB,因此在表达Man A蛋白时,选用其它的信号肽,如Dse4,会减少外源蛋白在胞内的滞留从而在一定程度上提高外源蛋白的分泌量。因此为毕赤酵母表达系统鉴定更多可用的信号肽并筛选到针对目的蛋白的最优信号肽奠定了一定的基础。     

双向凝胶电泳-飞行时间质谱技术鉴定食管上皮细胞癌变时14-3-3 protein ε、S100A9的表达

[摘要] 目的：分析食管鳞癌和正常食管上皮细胞蛋白质的表达差异,获取鉴别两者的分子标志物。方法：通过激光捕获显微切割技术分离ESCC肿瘤细胞和癌旁上皮细胞,通过双向电泳和质谱技术鉴定表达异常的蛋白,并通过蛋白免疫印记证实部分差异蛋白的表达。结果：建立了食管癌组织和正常食管上皮蛋白的双向凝胶电泳图谱,通过质谱技术鉴定出14-3-3 protein ε、S100A9等蛋白在食管癌变时差异表达,蛋白印记结果证实14-3-3 protein ε、S100A9的表达量在食管癌变时分别上调和下调。结论：激光捕获显微切割是蛋白质组研究中的一个突破性的技术,可以有效地解决组织异质性的问题;本实验检测到的差异蛋白例如14-3-3 protein ε、S100A9可能成为鉴别食管癌组织和正常食管上皮特异性的分子标记物。     

Galectin-7对食管鳞癌细胞株Eca-109迁移、侵袭的影响及其机制

为了探讨半乳糖凝集素-7(Galectin-7)在食管癌Eca-109细胞发生发展中的细胞外功能及其机制,该实验采用免疫印迹法检测浓缩细胞上清液中Galectin-7的表达,并利用不同浓度的重组Galectin-7培养食管癌Eca-109细胞。使用免疫印迹、实时荧光定量PCR、细胞划痕实验、MTT实验检测在培养后细胞中基质金属酶-9(MMP-9)、p38、pp38表达水平的变化以及Eca-109细胞迁移和增殖能力的改变。结果显示,Galectin-7存在于Eca-109细胞细胞上清液中,加入重组Galectin-7培养细胞后,MMP-9、pp38的表达水平明显上升,并且细胞的迁移能力也得到了提高,增殖能力无明显变化。由此说明,在食管癌Eca-109细胞中,Galectin-7可以被细胞分泌至细胞外,可能通过结合细胞外膜上特异性糖基配体激活p38 MAPK通路诱导MMP-9的表达,从而在Eca-109细胞侵袭、迁移过程中发挥重要的作用。     

杀虫剂微胶囊Ⅱ型的杀虫效能

<正> 我们曾报告复凝聚法杀虫剂微胶囊(Ⅰ型)的研制及其缓释长效、安全、减臭的特性。1981年我们又研制成界面聚合法缩脲囊壁的新型杀虫剂微胶囊,称为杀虫剂微胶囊Ⅱ型(简称Ⅱ型微囊)。现将其杀虫效能的材料整理如下。 一、Ⅱ型微囊的研制 以聚甲基聚苯基异氰酸酯、甲苯二异氰酸酯为囊壁材料。先使杀虫剂原油在水相中分散成微滴,在一定温度下,囊壁材料在水与油的界面聚合而成囊壁,将原油微滴包裹在内。在囊壁材料的用量、保护胶的品种与用量、制备干     

水稻叶绿素含量的QTL定位

利用由两个籼稻品种Acc8558和H359杂交构建的一个包含131个株系(F19)的重组自交系群体,及其相应的包含147个RFLP和78个AFLP标记的遗传图谱,采用多性状复合区间定位方法,对控制水稻叶绿素含量的QTL进行了定位分析。对叶绿素a和叶绿素b含量各检测到6个QTL,其中5个QTL在两性状问是相同的。这些QTL主要分布在第1和第4染色体上,因此这两条染色体对叶绿素含量是重要的。QTL qChlAlc／qChlBlb(二者位置相同)在4个观测时期均表现较大效应,且在最后的剑叶期贡献最大,因此对叶绿素含量最为重要。另两个QTL(qCh-LA4a／qChlB4a和qChlA4b／qChlB4b)只在第2次观测时期效应显著,表明它们只在特定发育阶段发挥作用。     

Galectin-7与MMP-9在食管鳞状细胞癌中的表达与术后早期复发转移的关系

通过免疫组织化学法检测半乳糖凝集素-7（Galectin-7）与基质金属酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）在食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）组织和癌旁组织中的蛋白表达,分析其表达与食管鳞癌的临床病理参数及早期复发转移（≤1年）的关系。结果显示,Galectin-7和MMP-9在食管鳞癌组织中的阳性表达率增高。Galectin-7和MMP-9蛋白表达与TNM分期、浸润深度以及淋巴结转移密切相关,二者表达呈正相关。联合检测MMP-9和Galectin-7对于预测术后早期的复发转移的灵敏度、特异度高于单独检测Galectin-7和MMP-9。Galectin-7和MMP-9在食管鳞癌的发生发展过程中可能起着重要的协同作用,联合检测二者可为预测食管鳞癌的复发转移提供帮助。     

基于SSLP分子标记验证遗传学三大定律的教学实践探索与体会

文章对“水稻SSLP分子标记的遗传分析”作为遗传学实验教学案例的实施过程及其效果进行了探讨。利用位于水稻两条染色体上的3个SSLP标记,对两亲本及其杂交构建的F₂代群体进行单株SSLP标记基因型检测,利用检测所得到的基因型结果验证分离定律、独立分配定律及连锁交换定律等遗传学三大定律。实践证明这不仅有利于加深学生对遗传学三大定律的认识,而且在提高学生实验操作技能和综合分析能力的基础上,还有助于培养学生的科研兴趣和创新意识。同时,对该实验的适用范围以及尚需完善之处做了讨论。此综合性实验也是科研成果转化为本科实验教学的一个有益探索。