口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)的稳定性研究

目的评价细胞工厂工艺连续生产的口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)的稳定性。方法疫苗在-20℃放置24个月,检测病毒滴度、外观、抗生素残留量、无菌性,及对病毒血清型进行鉴别;2~8℃放置12个月检测疫苗稳定性;室温放置7周、37℃放置7 d检测加速热稳定性并冻融的稳定性。结果该疫苗-20℃可贮存24个月以上,2~8℃有效期可延长至12个月,且冻融不会影响疫苗的稳定性。结论疫苗质量稳定,各项检测结果均符合《中华人民共和国药典》三部(2010版)及企业《口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)注册标准》。     

SPLUNC1多肽抗体的设计、制备与鉴定

通过设计SPLUNC1蛋白的一段多肽,快速制备抗SPLUNC1的多肽抗体,检测多肽抗体的性能,为SPLUNC1的功能研究提供可靠的平台. 用DS Gene1.1软件分析SPLUNC1蛋白的跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性以及抗原性等,综合考虑抗体设计的其它因素,设计出两段15～20个氨基酸的多肽.将合成后的多肽与钥孔戚血蓝素（keyhole limpet hemocyanin,KLH）偶联,同时初筛出宿主血清与SPLUNC1无交叉反应的新西兰家兔,用与KLH相连的SPLUNC1多肽免疫家兔,2个月后获取血清,亲和纯化出抗SPLUNC1多肽抗体,通过ELISA法检测其效价,免疫印迹与免疫组化检测其特异性与适用范围.通过该方法得到了高效价与高特异性的SPLUNC1多克隆特异性抗体,ELISA法测定其效价可达到1∶10⁵,通过对包含有PLUNC家族不同成员的蛋白混合物进行Western印迹检测证明,该多肽抗体具有较高的特异性,不与同一家族中的其它蛋白发生交叉反应,而且该抗体可用于免疫组化,说明所制备的分泌性蛋白SPLUNC1抗体具有高特异、高效价等特点,将为SPLUNC1基因的功能研究提供有用的研究材料.     

白藜芦醇后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤海马CA1区Bax、Bcl-2的影响

摘要 目的：探讨白藜芦醇后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤Bax、Bcl-2表达的影响。方法：清洁级雄性SD大鼠60只随机分为假手术组（n=12）、I/R组（n=12）、白藜芦醇组（n=36）,白藜芦醇组按不同剂量分为低剂量、中剂量、高剂量组（10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg）,每组12只。假手术组：仅暴露大鼠颈外动脉,不做缺血处理;I/R组：采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型（缺血2 h,再灌注24 h）;白藜芦醇组：造模方法同I/R组,在大鼠缺血2h后,将不同剂量白藜芦醇腹腔注射入大鼠体内,比较各组SD大鼠神经功能缺损评分、采用Western blotting法、免疫组化法对大鼠脑组织缺血侧海马CA1区Bax和Bcl-2表达进行比较。结果：白藜芦醇低、中、高剂量组神经功能缺损评分均低于I/R组,随着白藜芦醇剂量的增加,神经功能缺损评分逐渐降低,其中白藜芦醇高剂量组神经功能缺损评分降低最为明显;白藜芦醇组与I/R组相比,不同剂量白藜芦醇组Bax表达逐渐减少,而Bcl-2表达明显增加,其中以白藜芦醇高剂量组改变最为明显。结论：高剂量白藜芦醇可以降低大鼠神经功能缺损评分,减轻脑缺血再灌注损伤,对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与Bax、Bcl-2的表达有关。     

HnRNPA2／B1和PGP9.5对肺癌早期诊断的研究进展

肺癌的发病机制中包括多种分子标记和特殊的突变。因此研究相关的分子标记和突变基因对于早期诊断肺癌价值重大。本对肺癌早期诊断中的两种新的分子标记hnRNPA2/B1和PGP9.5进行综述。     

HPV病毒检测分型芯片的研制和优化

研制和优化寡核苷酸芯片以初步实现对多种常见HPV(Human papillomavirus)病毒的分型检测.应用生物学软件对四型常见HPV病毒(6、11、16、18型)的全基因组序列进行分析,设计具有型特异性、熔解温度(Tm)相近的～60 mer寡核苷酸探针,对玻片片基进行优化处理后,点样制备成寡核苷酸基因芯片.将含HPV全长基因序列的质粒作为阳性标准品,利用梯度限制性荧光标记技术对其进行荧光标记,标记好的样品与芯片杂交.结果显示HPV样品与相应的型特异性探针杂交有明显的荧光信号,而与阴性对照探针和空白对照探针没有杂交信号.通过对芯片片基处理和样品荧光标记方法的优化,可以提高芯片检测的杂交特异性和荧光信号强度.     

野生大熊猫与放牧家畜的空间利用格局比较

空间利用是野生动物对环境资源的利用模式和活动格局,影响着种群之间的基因交流和生存发展。我们于2010～2012年在四川卧龙国家级自然保护区的“核桃坪”及其附近区域,采用GPS颈圈跟踪技术对分布和放养于该区域的野生大熊猫和放牧家畜—马群进行了定位监测和样地调查。分别选择了3只大熊猫和3个马群的代表性个体的GPS颈圈数据,在地理信息系统（GIS）中通过数字高程模型（DEM）、动物移动模块等工具提取和计算了它们活动区域的地形地势、巢域大小、日移动距离和核域数量,并检验了野生大熊猫和放牧家畜空间利用的差异性。结果表明：野生大熊猫和放牧家畜不同月份和整体之间在海拔高度、坡度坡向、巢域面积、日移动距离和核域数量等方面都具有显著性的差异。野生大熊猫表现为随季节和食物类型（竹笋、竹秆、枝叶）丰度的变化分别活动于拐棍竹林、短锥玉山竹林和冷箭竹林中,活动空间较大（海拔范围、巢域大小）、日移动距离较短和核域数量多等特征的随机扩散模式,且不同个体和月份之间波动性较大;放牧家畜则因初始放养于不同区域的竹林（拐棍竹林、冷箭竹林）和人为干涉程度的大小差异,显示出不同的空间利用格局,但与大熊猫相比,总体而言都具有巢域面积小、日移动距离略大、核域数量极少等“步步为营”空间利用模式的特征,且不同畜群和不同时间之间的变化幅度也小于大熊猫。不同的空间利用格局对环境资源的影响强度截然不同,大熊猫的利用模式有利于竹子资源的更新恢复和生境结构的持续发展,而放牧家畜的利用模式将造成竹子资源的死亡衰败和生境结构的破坏退化。因此,加强放牧家畜的管控,有效协调社区经济发展和生物多样性保护成为卧龙自然保护区（特区）今后工作和管理的当务之急。     

影响脐带血采集质量的相关性因素分析

目的回顾性分析影响脐带血采集质量的母婴因素和采集处理因素。 方法记录389份脐带血的采集量、母亲年龄、孕龄、新生儿体重、分娩方式、新生儿性别、胎次及脐带血采集至计数间隔以及采集方式。用KX-21型全自动血液分析仪进行细胞计数并计算有核细胞总数（TNC）。采用Pearson相关和Spearman秩相关进行相关性分析,采用t检验、Mann-Whitney U检验、方差分析及Kruskal-Wallis H检验进行分组比较,分析影响脐带血采集量和TNC的相关因素。? 结果脐带血采集量与TNC显著相关（r = 0.723,P < 0.001）,脐带血采集量大于80 ml时的TNC显著高于低体积者。在母婴因素中,母亲年龄与采集量及TNC差异均无统计学意义;孕龄与采集量负相关（r = -0.119,P = 0.019）,而与TNC正相关（r = 0.138,P = 0.007）,足月儿脐带血的TNC显著高于早产儿（P = 0.038）;婴儿出生体重与采集量及TNC均正相关（r = 0.236,P < 0.001;r = 0.275,P < 0.001）,体重较大婴儿脐带血的采集量和TNC均显著高于体重较小者（P?< 0.001）;剖宫产的脐带血采集量虽高于阴道分娩（P < 0.001）,但其TNC不及阴道分娩;男婴与女婴在脐带血采集量和TNC之间无显著差异。在采集处理因素中,脐带血采集至计数的时间间隔与采集量及TNC均无显著相关。 结论为提高脐带血的保存质量,应侧重选择胎儿体重较大、经阴道分娩的产妇作为脐带血供者,实验室应首先处理采集量较大的脐带血。     

原发性高血压对良性前列腺增生病程发展的影响研究

目的：探讨原发性高血压与良性前列腺增生（BPH）发生与-临床进展的相关性。方法：将确诊为良性前列腺增生的78例BPH患者分为单纯性BPH组和BPH合并有高血压组两组,其中BPH组33例,BPH合并有高血压组45例。对两组患者的尿流率、残尿量、血清前列腺特异性抗原（PSA）、血尿发生率、前列腺体积、国际前列腺症状（tPSS）评分、尿潴留次数及不稳定膀胱发生率指标进行对比分析。结果：两组患者间在年龄、尿流率、残尿量、PSA、最大膀胱容量及最大逼尿肌压力指标差异无统计学意义（P〉0．05）。而BPH合并高血压患者在血尿发生率、前列腺体积、IPSS评分、尿潴留次数及不稳定膀胱发生率指标上明显大于单纯良性前列腺增生组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：原发性高血压患者发生前列腺增生的病例报道越来越多,高血压状态能够促进BPH的发生以及临床进展。     

独立学院分子生物学引导式教学改革实践

分子生物学是生命科学专业的基础课程,但由于信息量大、知识更新快、生物大分子之间的作用关系错综复杂,使得该课程内容庞杂抽象、较难理解。学生在学习过程中往往感到十分枯燥,从而失去了学习兴趣,学习效率不高。生物科学教研室通过学业自我效能感评价,科学地分析出独立学院学生的学习特点,并使用信息化引导、双语引导、模块引导及互动引导等方式对分子生物学教学进行了改革。教学改革评价显示,此次教学改革提高了分子生物学的教学效果,增强了学生学习的主动性,激发了学生的科研兴趣,为分子生物学教学改革提供了理论依据。     

核型分析与FISH技术诊断成人B细胞急性淋巴细胞白血病等臂双着丝粒费城染色体

目的提高对携带复杂费城染色体(Philadelphia chromosome,Ph)的急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的鉴别诊断和治疗的认识。方法用染色体核型分析技术对1例成人B细胞ALL(B-ALL)患者骨髓细胞做细胞遗传学检查;核型异常细胞用荧光原位杂交(FISH)进行验证。结果首次发现该B-ALL患者异常细胞系携带等臂双着丝粒Ph,并呈现克隆演化趋势;干系克隆细胞携带典型的Ph,旁系克隆细胞的Ph发生多种演化;FISH检测显示BCR/ABL1融合基因的拷贝数逐步增加。结论成人B-ALL中Ph经复制重排形成等臂衍生Ph非常罕见;这些重排使BCR/ABL1拷贝数增加,可能是导致白血病细胞快速增殖及耐药的机制。