连续性血液净化治疗对急性胰腺炎的临床效果和预后状况分析

目的:探讨连续性血液净化(CBP)对急性胰腺炎(AP)的治疗效果及预后的影响。方法:选取2010年1月至2016年12月间我院1200例AP患者作为研究对象,按照随机数字表法分为常规治疗组及CBP治疗组,每组600例。常规治疗组接受常规药物治疗,CBP治疗组在常用药物治疗的基础上联合应用CBP治疗。对比治疗后两组患者临床症状消失时间以及治疗前、治疗后72h炎性因子水平变化情况和肠道功能变化情况,并对比两组治疗后7 d的死亡率。结果:CBP治疗组治疗后的腹痛消失时间、腹胀消失时间及腹部压痛消失时间均低于常规治疗组(P0.05)。两组治疗前内毒素、C反应蛋白(CRP)、淀粉酶(AMS)、二胺氧化酶及丙二醛比较无统计学差异(P0.05);治疗后72 h,内毒素、CRP、AMS、二胺氧化酶及丙二醛水平均较治疗前降低,且CBP治疗组低于常规治疗组(P0.05)。治疗后7 d CBP治疗组死亡率低于常规治疗组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:CBP可有效的提高AP的临床治疗效果,并改善患者的临床预后。     

青蒿琥酯抑制白血病耐药细胞株K562/ADM转铁蛋白受体表达

目的:观察青蒿琥酯对于白血病多药耐药细胞细胞株K562/ADM转铁蛋白受体表达的影响。方法:将K562/ADM(耐阿霉素)细胞分别经浓度为12.5、25、50μg/m L的青蒿琥酯处理48 h,同时25μg/m L实验组在12 h、24 h、36 h分别收集足量细胞。采用流式细胞术检测青蒿琥酯对细胞转铁蛋白受体(Tf R)密度的调控作用,Western blot检测青蒿琥酯对细胞Tf R蛋白表达的调控作用。CCK-8法分析青蒿琥酯对K562/ADM细胞生长增殖的影响。结果:K562/ADM细胞Tf R密度和Tf R蛋白表达水平分别经12.5、25、50μg/m L青蒿琥酯处理后均下降,呈浓度依赖性。25μg/m L青蒿琥酯处理K562/ADM细胞不同时间段后转铁蛋白受体蛋白表达水平随着Art作用时间延长而逐渐降低,表明呈时间依赖性。K562/ADM细胞经青蒿琥酯处理后其耐药性减弱:与对照组相比,12.5、25、50μg/m L实验组细胞耐药逆转倍数分别为1.38、2.12和2.95倍,从而抑制K562/ADM细胞增殖。IC50值为19.7μmol/L。结论:青蒿琥酯能降低细胞Tf R密度和下调Tf R蛋白的表达,逆转K562/ADM细胞的耐药性,从而起到抗肿瘤作用。     

原核生物基因组肽编码sORFs分布及功能特征

近期,从非编码RNA中发现具有肽编码能力的小开放阅读框(sORFs),激发了人们对这种长期被忽略的基因组元件的研究兴趣,sORFs迅速成为当前重点研究领域.由于表达水平及丰度低、序列短等因素,对肽编码sORFs的有效研究方法及数据资源还很缺乏,现有研究仅集中在少数真核模式生物,对自然界中广泛存在的原核生物研究非常少,肽编码sORFs的发现为目前精准背景下的基因组注释提出严峻挑战.在此背景下,本文首先系统研究了80余种不同类型原核生物中长度小于100个氨基酸的肽编码sORFs分布及功能特征,并对不同长度区间sORFs的序列组成、分布及进化特征进行了对比分析.结果表明,肽编码sORFs在原核生物基因组普遍存在,随着序列长度的降低,其序列复杂度降低,行使的生物功能也相对集中.在此基础上,进一步结合当前肽编码sORFs研究现状,深入总结了肽编码sORFs研究存在的问题及挑战,为今后肽编码sORFs研究奠定了坚实理论基础.     

霍山石斛种子萌发及原球茎发育的解剖结构观察

正霍山石斛(Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng)根茎具有益精强阴、生津止渴和补虚羸等功效~([1]),被批准实施地理标志产品保护~([2])。为解决霍山石斛种子在自然条件下萌发困难和繁殖周期长等难题,已成功建立其离体快繁体系并工厂化生产~([3]),并对其植株营养器官的解剖结构~([4])及采用茎段诱导类原球茎的发育过程~([5])进行了研究。为进一步明确霍山石斛种子萌发和幼苗生长发育的原理,作者采用植物组织培养和石蜡切片技术,对霍山石斛种子萌发及原球茎发育过程中细胞和组织结构的变化进行了解剖观察,以期为     

山羊分娩期子宫颈的成熟软化与扩张机制

通过检测山羊分娩前后的血清中前列腺素E2(PcE2),孕酮(P4),雌二醇(E2),白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-8(IL-8)的浓度在山羊分娩过程中所发挥的作用和对子宫颈成熟的影响;以及通过对山羊子宫颈电镜切片的观察,来分析子宫颈扩张所需能量的来源.结果表明PGE2、P4、E2、IL-1和IL-8在分娩期子宫颈的成熟和扩张过程中均起到重要的作用,其中P4虽然对子宫颈的成熟起到抑制作用,但对子宫颈的成熟具有重要的调控作用.电镜切片血管中大量的脂样物质及细胞中脂肪颗粒的释放提示了子宫颈扩张能量的来源,而线粒体的水肿及破坏则说明子宫颈的软化成熟机制.     

利用噬菌体展示技术淘选草鱼呼肠孤病毒的单链抗体

草鱼呼肠孤病毒（GCRV）是引起我国大面积草鱼幼鱼出血病暴发的主要病原,其外衣壳蛋白VP5和VP7在病毒入侵宿主细胞过程中起着至关重要的作用。研究以原核表达的VP7、全长VP5、VP5的N端片段及C端片段为靶蛋白,利用已构建的噬菌体展示单链抗体文库进行淘选。经过3轮淘选后,共获得7个针对VP7、VP5、VP5N和VP5C的单链抗体。经过验证,识别原核表达的VP7的两个单链抗体能够成功识别天然GCRV病毒。此结果对于进一步研究GCRV与宿主细胞的相互作用机理奠定了基础。       

一种特异性识别斑马鱼卵黄蛋白原的噬菌体展示单链抗体的可溶性表达方案

为了实现特异性识别斑马鱼卵黄蛋白原的噬菌体展示单链抗体的可溶性表达,将不能以可溶性蛋白形式表达的、只能以噬菌体展示形式特异性识别斑马鱼卵黄蛋白原的单链抗体F5的基因,克隆到pET 32a载体并转化入大肠杆菌ori DE3中。结果表明,通过诱导表达,可获得可溶性的并且仍特异性识别斑马鱼卵黄蛋白原的单链抗体32a-F5。噬菌体展示单链抗体不能可溶性表达是噬菌体展示技术应用中常见的问题,该方法提供了一种表达可溶性单链抗体的可行性方案。     

毛细管气相色谱内标法测定核桃油中的脂肪酸

测定了核桃油的脂肪酸组成,建立了以十七烷酸甲酯为内标物,用毛细管气相色谱同时测定核桃油五种脂肪酸（棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸）的方法。样品经氢氧化钾．甲醇皂化、三氟化硼．甲醇酯化后使生成相应的脂肪酸甲酯,以DM-FFAP毛细管柱分离,火焰离子化检测器测定。用保留时间定性,内标法定量。结果表明,在所选择的条件下,核桃油脂肪酸在10min内能获得较好的分离;五种脂肪酸的峰面积与其质量浓度有良好的线性关系,相关系数均大于0．998;样品加标回收率（n=6）为92．5％-100．3％,相对标准偏差为2．41％-4．31％。该方法操作简便、快速、准确,适合批量样品的测定。     

荧光蛋白在双色蜡蘑中的构建与表达

菌根是真菌与植物之间形成的互惠互利的营养共生体，对生态环境有重大的意义。外生菌根真菌与植物互作机制以及真菌基因功能的深入研究都需要对菌根真菌进行遗传转化，本研究以外生菌根真菌模式生物双色蜡蘑（Laccaria bicolor）为研究对象，选择细胞核中的核小体蛋白H₂B基因为目的基因，以pCEBN为表达载体，融合红色荧光蛋白，最终构建在真菌中表达的双元载体，使用根瘤农杆菌介导转化法转化双色蜡蘑菌丝，随后利用PCR对真菌转化子进行验证后，通过激光共聚焦显微镜观察到菌丝细胞核中的红色荧光，成功将融合荧光蛋白转化菌根真菌，为后续研究菌根真菌中基因的亚细胞定位提供了实验平台。结果表明，利用双元载体和农杆菌转化方法，建立了高效的双色蜡蘑转化体系（93.33%），在激光共聚焦显微镜下观察到菌丝细胞核中红色荧光信号，验证了融合荧光蛋白在双色蜡蘑中的成功表达。本研究成功地构建了菌根真菌中的核小体蛋白和红色荧光蛋白融合表达的真菌转化体系。