荧光蛋白在双色蜡蘑中的构建与表达

菌根是真菌与植物之间形成的互惠互利的营养共生体，对生态环境有重大的意义。外生菌根真菌与植物互作机制以及真菌基因功能的深入研究都需要对菌根真菌进行遗传转化，本研究以外生菌根真菌模式生物双色蜡蘑（Laccaria bicolor）为研究对象，选择细胞核中的核小体蛋白H₂B基因为目的基因，以pCEBN为表达载体，融合红色荧光蛋白，最终构建在真菌中表达的双元载体，使用根瘤农杆菌介导转化法转化双色蜡蘑菌丝，随后利用PCR对真菌转化子进行验证后，通过激光共聚焦显微镜观察到菌丝细胞核中的红色荧光，成功将融合荧光蛋白转化菌根真菌，为后续研究菌根真菌中基因的亚细胞定位提供了实验平台。结果表明，利用双元载体和农杆菌转化方法，建立了高效的双色蜡蘑转化体系（93.33%），在激光共聚焦显微镜下观察到菌丝细胞核中红色荧光信号，验证了融合荧光蛋白在双色蜡蘑中的成功表达。本研究成功地构建了菌根真菌中的核小体蛋白和红色荧光蛋白融合表达的真菌转化体系。     

IL-6基因多态性与小儿全身炎症反应综合征的相关性研究

目的探讨白细胞介素-6（Interleuk in-6,IL-6）基因多态性与小儿全身炎症反应综合征（system ic inflamm atory response syndrom e,SIRS）的关系。方法 30例SIRS患儿为SIRS组,随机挑选30例健康体检的小儿为对照组,采用限制片段长度多态分析聚合酶链反应方法（PCR/RFLP）对2组儿童的IL-6基因的-174位点和-572位点基因进行分析;并应用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测2组儿童的血清IL-6水平,观察基因型对血清IL-6水平的影响。结果 IL-6基因-572位点基因型和等位基因频率在2组间分布差异有统计学意义,SIRS组GG基因型和G等位基因频率均显著高于对照组（P〈0.05）;携带G等位基因个体患SIRS的风险约是C等位基因型个体的6.84倍（OR95%CI：2.62～17.89,P〈0.05）;G等位基因携带者IL-6血清含量显著高于CC基因携带者（P〈0.05）。IL-6基因启动子-174位点在SIRS组与对照组中只发现GG基因型,CG和CC基因型在2组中均未发现;SIRS组IL-6血清水平显著高于对照组（P〈0.05）。结论 IL-6基因-572C/G多态性可能是中国汉族儿童SIRS发病的遗传危险因素之一,血清IL-6水平可能受其基因多态性的影响。而IL-6基因-174G/C多态性与中国汉族儿童SIRS发病可能不具有相关性。