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微生物菌种是一个“活的工厂”,是企业的技术核心,尤其是专利程序中涉及的微生物菌种因能产生巨大的经济效益受到社会各方面的关注。本文拟从专利微生物寄存的历史,专利法中对技术充分公开的要求出发,阐述在合成生物学背景下,部分生物技术领域的发明也能像机械领域发明一样,仅依靠说明书及相关附图记载支持就可重复和再现发明,专利申请并不需要前置程序的专利微生物菌种保藏。但作为人类文明的成果,发明人有义务适时将合成的微生物菌种进行遗传稳定性保藏,以利后续科学研究和社会发展的需要。 相似文献
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流感病毒感染诱导MDCK细胞凋亡的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用荧光染色、DNA凝胶电泳等方法检测了A型流感病毒株A1/京防86-1和B型流感病毒株B/沪防93-1诱导狗肾体代细胞(MDCKcells)的凋亡情况,并采用MTT法和流式细胞仪比较了这2株病毒对MMCK细胞的毒力和凋亡诱导能力水平。结果显示:病毒感染6h后,细胞DNA发生断裂,病毒感染12h后,可见明显的染色质凝聚;在一定范围内,细胞凋亡强度表现出明显的时间和剂量依赖关系;并且,A型流感病毒株的毒力和调亡诱导能力均强于B型流感病毒株。实验结果表明:流感病毒感染引起的细胞死亡主要是通过调亡实现的,毒力不同的流感病毒株诱导细胞调亡的能力不同。 相似文献
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本文应用高灵敏度的LKB2277生物活性检测仪测定FMDV感染BHK-21细胞的代谢热谱,并与传统方法测定的一步生长曲线进行比较,二者具有显著的相似性。结果表明,微量热法通过对细胞及其受病毒感染的细胞体系代谢热的测定,能有效地监测病毒在宿主细胞内增殖的过程。该方法还提供了一种动态连续分析病毒感染增殖的新手段。 相似文献
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口蹄疫病毒诱导宿主细胞凋亡的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
本文报道了口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth
Disease Virus,FMDV)在体外诱导PK-15细胞凋亡的研究结果。采用Hoechst33258荧光探针、DNA凝胶电泳、脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术均检测到了典型的细胞凋亡。结果显示使用感染性滴度为4.8lgTCID50/mL的口蹄疫病毒感染PK-15细胞,在培养32?h后荧光探针检测呈现典型的凋亡细胞核固缩和梅花状碎裂核,并伴随有凋亡小体出现,凋亡率约为20%;DNA凝胶电泳显示ladder梯带;末端标记检测到强绿色荧光标记物结合于凋亡细胞核上。研究结果提示口蹄疫病毒可以在体外诱导宿主细胞凋亡,细胞凋亡是其致细胞病变死亡的重要途径之一。 相似文献
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口蹄疫病毒持续感染细胞系的快速选择及其特性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
采用NH4Cl弱碱法处理感染口蹄疫病毒的叙利亚仓鼠肾细胞系(BHK-21), 存活细胞经过单克隆和选择,获得32株阳性克隆细胞株.随机选取一株(BHK-ROp),常规传代并采用RT-PCR,透射电子显微镜,流式细胞仪进行持续感染特性分析,结果表明,BHK-ROp第4,16,36代细胞中病毒持续存在,但不影响细胞的生长特性,表现出病毒持续感染的基本特征.可见,NH4Cl弱碱法用于建立病毒持续感染细胞系是十分有效的. 相似文献
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采用一种含有HCV全基因组和噬菌体T7启动子和终止子序列的载体(pHCV)转染Vero-E6细胞,随后感染高效表达T7 RNA聚合酶的重组痘病毒(vTF7-3),通过vTF7-3的辅助作用,使Vero-E6细胞高效增殖HCV病毒体,建立了一种新的HCV体外细胞培养体系.RT-PCR、荧光定量PCR检测转染细胞裂解液中HCV滴度的结果显示pHCV转染细胞内HCV基因拷贝达107-108/mL,同时有HCV正链RNA合成;免疫印迹显示该培养体系中有HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达;pHCV转染细胞经透射电镜观察,可见清晰的HCV病毒体,直径在40-50nm.这一新体系的初步建立,为研究HCV的复制机制、制备HCV疫苗和研发抗病毒药物奠定了基础. 相似文献
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