Monitoring glutamine in animal cell cultures using a chemiluminescence fiber optic biosensor

Together with flow injection analysis (FIA), a chemiluminescence (CL) fiber optic biosensor system has been developed for determining glutamine in animal cell cultures. Glutaminase (GAH) and glutamate oxidase (GLO) were onto separate porous aminopropyl glass beads via glutaraldehyde activation and packed to form an enzyme column. These two enzymes acted in sequence on glutamine to produce hydrogen peroxide, which was then reacted with luminol in the presence of ferricyanide to produce a light signal. An anion exchanger was introduced on-line to eliminate interfering endogenous glutamate in view of its negative charge at pH above 3.22 (isoelectric pH). Among several resins tested, the acetate form was most effective, and this type of ion exchanger also effectively adsorbed uric acid, acetaminophen, and aspartic acid.There was an excellent linear relationship between the CL response and standard glutamine concentration in the range 1 to 100 muM. A complete analysis could be performed in 2 min, including sampling and washing with a good reproducibility (+/- 4.4%). Both the bi-enzymic and ion exchange columns were useful for at least 500 analyses when the biosensor system was applied for the glutamine determination in murine hybridoma cell cultures and insect cell cultures. The values obtained compared well with those of HPLC, thus validating the applicability of the CL fiber optic system. (c) 1993 John Wiley & Sons, Inc.     

大鼠脚内核的镇痛作用

本实验应用核团内微量注射L谷氨酸,利多卡因,bieuculline,GABA以及用辐射热甩尾法测痛等手段观察脚内核的镇痛作用,向双侧脚内核注射25 100nmol的L谷氨酸可引起大鼠痛阈升高,这个作用可为缰核内注射2 利多卡因0.5mol或0.2 bieuculline0.5mol所阻断,反之,向缰核内注射200nmolGABA可引起大鼠痛阈升高,上述实验表明,参与痛觉调制,脚内核缰核的GABA能纤维参与了脚内核的痛觉调制活动。     

Flow injection assays for NADH and ethanol using photosensitized rose bengal and luminol–copper (II) chemiluminescence system

The online photoreaction of the rose bengal photosensitized luminol–copper (II) chemiluminescence (CL) system was used for the determination of β-nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) and ethanol (EtOH) in pharmaceutical formulations combined with a flow injection technique. NADH can significantly enhance the CL emission of the reaction. For EtOH, alcohol dehydrogenase in soluble form was utilized in the presence of nicotinamide adenine dinucleotide resulting in NADH production. The limit of detection (3σ blank, 𝑛 = 3) of 4.0 × 10⁻⁸ and 2.17 × 10⁻⁵ M, and linear range 1.3 × 10⁻⁷ to 2.5 × 10⁻⁵ M (R² = 0.9998, n = 6) and 0.11–2.17 × 10⁻³ M (R² = 0.9996, n = 6) were obtained for NADH and EtOH respectively. The injection rate was 100 h⁻¹ with a relative standard deviation (n = 3) of 1.5–4.8% in the range studied for both analytes. The procedure was satisfactorily applied to pharmaceutical formulations with recoveries in the range 91.6 ± 3.0% to 110 ± 2.0% for NADH and 88 ± 3.0% to 95.4 ± 4.0% for EtOH. The results obtained were very consistent and did not differ considerably from the reported approaches at a 95% confidence limit. The possible mechanism of the CL reaction is also explained briefly.     

油藏注入水靶向脱硫潜力的高温脱硫菌群富集驯化

【背景】海上油田见聚后产出水硫化物超标,影响到注聚水的配聚黏度,采用生物脱硫时,由于常规除硫菌难以适应除油后产出液的高温,使得脱硫效果不佳。【目的】分析海上采出液水处理过程的菌群结构,明确生物处理各节点的菌群构成变化;开展耐高温脱硫菌驯化筛选,获得耐高温的高效脱硫菌。【方法】采集来自胜利油田海三站的水样,以16S rRNA基因高通量测序技术分析样本菌群结构,并分别在不同温度(55、60和65℃)下的无机富集培养基中进行多轮转接驯化,结合常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma, ARTP)诱变技术筛选获得耐高温的脱硫菌群,采用宏基因组测序技术分析富集菌群的组成,并测定其脱硫能力。【结果】处理前的采出液水样含有较多的嗜热菌和硫酸盐还原菌,如Thermodesulfovibrio、Pseudothermotoga、Thermolithobacter、Fervidobacterium、Thermovenabulales和Pseudomonas;以厌氧气浮除油工艺处理的出水中,嗜氢菌属(Hydrogenophilus)成为最主要的优势菌,...     

瞬时受体电位香草醛亚家族1(TRPV1)的生物学功能

瞬时受体电位香草醛亚家族1 (TRPV1)又称辣椒素受体(VR1),是一类可被辣椒素、热(>43℃)、酸(pH<6.0)所激活的配体门控性非选择性阳离子通道,对Ca²⁺有高度通透性。早期研究发现TRPV1主要分布在神经系统并介导瘙痒及痛觉反应,近些年研究表明其在非神经细胞如肥大细胞、膀胱上皮细胞、单核细胞、皮肤角化上皮细胞、胰岛细胞等中也广泛分布,在代谢性疾病、消化、呼吸和心血管系统疾病、皮肤病及肿瘤等疾病的发生发展中均发挥了重要作用。本文介绍了TRPV1的分布、结构特征及其功能研究的最新进展,并重点综述了TRPV1介导的瘙痒和疼痛信号通路及以TRPV1为靶点的中草药研究进展,以期为以TRPV1为潜在治疗靶点相关疾病的中西医防治提供理论指导。     

中老年肩痛患者疼痛及肩关节功能恢复的影响因素分析

摘要 目的：探究分析中老年肩痛患者疼痛及肩关节功能恢复的影响因素分析。方法：采用便利抽样法,随机抽取2020年9月至2022年9月期间于我院门诊就诊的2010名中老年患者作为调查对象,对患者进行筛查、复查、确诊、随访等。并对所搜集信息进行疼痛及肩关节功能恢复单因素与多因素Logistic回归分析。结果：单因素分析显示,年龄（x²=15.274, P＜0.001）、性别（x²=10.401, P=0.001）、病程（x²=16.410, P＜0.001）和是否进行功能锻炼（x²=6.293, P=0.012）为影响中老年肩痛患者肩关节功能恢复的主要因素;年龄≥70岁（OR=1.292, 95%CI 0.953-1.750）、女性（OR=1.672, 95%CI 1.348-2.074）、病程＞1个月（OR=1.470, 95%CI 1.021-2.116）和未进行功能锻炼（OR=1.844, 95%CI 1.175-2.894）为影响中老年肩痛患者肩关节功能恢复的独立危险因素。结论：年龄≥70岁、女性、病程＞1个月和未进行功能锻炼为影响中老年肩痛患者肩关节功能恢复的独立危险因素,根据上述因素尽早快速甄别高风险患者,及早给予合理有效的康复治疗措施,可显著改善肩痛患者肩关节功能的预后。     

人脐带间充质干细胞重复静脉注射动物毒性试验

摘要 目的：评价多次尾静脉注射脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）对小鼠的体内毒性作用。方法：48只健康ICR小鼠,按性别和体重随机分为4组（即对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组）。小鼠通过微静脉注射不同剂量hUC-MSCs悬浮液,间隔3天给药1次,共给药4次。记录小鼠摄食量、体重、体温,给药结束后恢复两周后牺牲动物作大体解剖,检查各个器官器质性病变;利用流式细胞仪分别检测CD3、CD4、CD8阳性细胞亚群数量;ELISA试剂盒检测血清IgM、IgG、C3、C4指标;对肺脏、脾脏、肾脏行组织病理学检查。结果：实验组与对照组相比较,注射不同剂量干细胞后一般观察、体重、体温、摄食量、IgM以及C3在给药期和恢复期均未发生显著变化。在恢复期,注射中、高剂量hUC-MSCs组血清IgG和C4水平略有降低,但未达到显著水平P<0.05;CD4阳性T细胞集群数量以及CD4/CD8系数在hUC-MSCs中、高剂量组显著上升（P<0.05）。大体剖检,除脾脏相比溶媒对照组略显增大外其它各器官均未发现肉眼可见明显异常;称重后发现hUC-MSCs高剂量组脾重量与溶媒对照组相比显著升高（P<0.05）。脾脏、肺脏、肾脏病理学检测未见明显异常。结论：健康ICR小鼠尾静脉注射临床剂量hUC-MSCs（1×10⁶ cells/kg）可能调动动物免疫反应,此外,未观察到hUC-MSCs对小鼠有明显毒副作用。     

右美托咪定联合经皮穴位电刺激对混合痔剥扎术后患者肠胃功能及术后疼痛的影响

摘要 目的：探讨右美托咪定联合经皮穴位电刺激对混合痔剥扎术后患者肠胃功能及术后疼痛的影响。方法：选择2022年3月-2022年7月我院行混合痔剥扎术的患者60例,将60例患者随机分为对照组（30例）与观察组（30例）,对照组患者给予右美托咪定镇痛,观察组给予术前经皮穴位电刺激,时间为手术开始前2 min至手术结束,右美托咪定使用方法、剂量同对照组。对比两组患者术前、术后0.5 h、1 h、2 h、3 h的疼痛评分,对比两组患者的术后疼痛疗效,对比两组创面愈合时间、腐肉完全脱落时间、住院时间及胃肠功能恢复情况,对比两组术前、术后的血管活性肠肽、胃动素及胃泌素水平。结果：术前及术后3 h时,两组的疼痛评分对比无统计学意义（P>0.05）;术后0.5 h、1 h、2 h时,观察组的疼痛评分明显较对照组低（P<0.05）。观察组的术后疼痛有效率明显较对照组高,P<0.05。观察组的创面愈合时间、腐肉完全脱落时间及住院时间明显较对照组低（P<0.05）。观察组的肠鸣音恢复时间、术后恶心呕吐发生率及排气时间明显较对照组短（P<0.05）。术前,两组的血管活性肠肽、胃动素及胃泌素水平对比无统计学意义（P>0.05）;术后,两组血管活性肠肽、胃泌素水平升高,胃动素水平降低,且观察组变化幅度明显较对照组低（P<0.05）。结论：右美托咪定联合经皮穴位电刺激可改善混合痔剥扎术后患者肠胃功能及术后疼痛情况。     

不同容量胸段经椎间孔硬膜外注射阻滞范围的CT影像研究及诊断性阻滞的可行性分析

摘要 目的：探讨不同容量对胸段经椎间孔硬膜外注射（TFEI）药液扩散范围和镇痛效果的影响以及胸段TFEI用于诊断性阻滞的可行性。方法：选择2021年1月至2022年12月南京大学医学院附属鼓楼医院收治的胸段带状疱疹相关疼痛患者140例,随机分为4组,实施单次TFEI并分别注入不同容量含造影剂局麻药（A组：0.2 mL;B组：0.5 mL;C组：1.0 mL;D组：2 mL）,CT扫描并观察造影剂在硬膜外向头侧、尾侧及总扩散节段,造影剂在椎间孔、同侧椎旁间隙、同侧及对侧硬膜外间隙扩散情况,判断是否为选择性神经根阻滞。评估注射前、注射后30分钟及24小时视觉模拟评分（VAS）。结果：头侧和尾侧扩散节段以及总扩散节段数,D组最多,A组最少（P<0.05）;C组、D组造影剂扩散≥3个节段发生率明显高于B组（P<0.05）;C组、D组病例造影剂扩散至同侧椎旁间隙和对侧硬膜外间隙的发生率明显高于A组、B组（P<0.05）,仅A组37.1%的病例实现选择性神经根阻滞,其余各组均无选择性阻滞病例。注射后30分钟,C、D组VAS评分显著低于A、B组（P<0.05）;注射后24小时,D组VAS评分显著低于A、B组（P<0.05）。结论：胸段带状疱疹相关疼痛患者TFEI药液扩散范围随注射容量的增加而扩大,且在硬膜外倾向于头侧扩散,2 mL容量单次TFEI可阻滞3个以上的神经节段,获得良好的镇痛效果。胸段TFEI行诊断性阻滞的可行性较差。