球状香菇菌株的氨基酸特征分析及蛋白质品质评价

比较分析香菇球状菌株与正常菌株的形态特征、氨基酸特征和蛋白质品质,并基于现行国际氨基酸模式谱,采用蛋白质的氨基酸评分（amino acid score,AAS）、氨基酸比值系数分（ratio coefficient of amino acid,SRC）、IOM（Institute of Medicine）模式评分、化学评分（chemical score,CS）、必需氨基酸指数（essential amino acid index,EAAI）以及蛋白质校正氨基酸计分（protein digestibility corrected amino acids score,PDCAAS）多种指标进行评价。结果表明：与正常菌株相比,球状菌株形态上没有菌褶和菌柄的分化,同时营养成分也发生了变化,就粗蛋白含量而言,球状菌株为正常菌株的1.37倍（分别为32.32%和23.60%）;就平均总氨基酸含量而言,球状菌株（209.58mg/g）是正常菌株（163.10mg/g）的1.28倍。这些球状菌株的特征可作为新品种的培育材料进一步被利用。     

利用加权基因共表达网络分析方法挖掘香菇发育不同阶段的关键基因

香菇是世界产量第二大食用菌,栽培历史悠久。在木屑袋料栽培模式下,香菇发育可以分为菌丝生长期（G）、菌丝褐化期（B）、原基形成期（P）以及出菇期（FB）4个阶段。褐化期和原基形成期是香菇从营养生长期到生殖生长两个关键发育阶段,对香菇子实体产量和质量至关重要。本研究以3种不同栽培材料为重复,对香菇发育的前3个阶段进行了转录组分析。主成分分析和相似性分析表明,基因随着发育进程的推进,不同栽培基质样本的基因表达特征相似。以菌丝生长阶段的转录本为参照,通过基因差异表达分析,获得与菌丝褐化成熟和原基形成相关的基因,并对这些基因进行GO和KEGG功能富集分析;其次,对9个转录本数据进行加权基因共表达网络分析（WGCNA）,分别获得了与菌丝生长、褐化阶段及原基形成各阶段高度相关的黑色、蓝色及黄色基因模块,并利用网络节点分析获得了与菌丝褐化成熟和原基形成得到7个关键基因;最后,结合差异基因和基因模块分析,得到了菌丝生长阶段的17个重要基因、褐化阶段的167个重要基因以及原基形成阶段的67个重要基因。通过多分析手段结合为筛选候选基因提供了更为高效的方法。     

香菇多糖对幼建鲤免疫指标的影响

在基础饲料中添加0 g/kg、0.8 g/kg、1.2 g/kg、1.6 g/kg、2.0 g/kg、2.4 g/kg饲料的香菇多糖,连续饲喂幼建鲤Cyprinus carpio var.Jian 49 d后,检测香菇多糖对幼建鲤红细胞、白细胞数量及白细胞杀菌指数、血清溶菌酶活性、血清SOD活性及IgM含量的影响。结果表明,试验第49 d时,不同添加剂量的香菇多糖对各组实验鱼白细胞、红细胞数量影响不大,与对照组无显著差异(P>0.05)。在饲料中添加不同剂量香菇多糖后对幼建鲤白细胞杀菌指数、血清溶菌酶活性、血清SOD活性及IgM含量有不同程度影响。试验期间,0.8 g/kg、1.2 g/kg、1.6 g/kg、2.0 g/kg和2.4 g/kg组试验幼建鲤白细胞杀菌活性比对照组明显增强,差异极显著(P<0.01);血清溶菌酶活性逐渐升高,1.6 g/kg、2.0 g/kg和2.4 g/kg组极显著高于对照组和0.8 g/kg组(P<0.01),当香菇多糖添加量增加到1.6 g/kg时,对血清溶菌酶活力增加不显著(P>0.05)。在饲料中添加不同剂量香菇多糖后对幼建鲤血清SOD活性有不同程度影响。2.0 g/kg添加组对SOD增加明显,与对照组、0.8 g/kg、1.2 g/kg组差异极显著(P<0.01),与2.4 g/kg组差异显著(P<0.05)。试验期间,0.8 g/kg、1.2 g/kg、1.6 g/kg、2.0 g/kg和2.4 g/kg组试验幼建鲤血清IgM含量变化与对照组相比变化不明显,各组间差异不显著(P>0.05)。     

香菇印gpd-Le和ras-Le启动子的功能分析

利用从香菇菌丝体中克隆的启动子片段gpd-Le(613bp)和ras-Le(715bp)分别连接于报告基因gfp(绿色荧光蛋白基因)的上游,构建了启动子功能活性检测表达质粒pLg-gfp和pLr-gfp。采用PEG介导法把表达质粒pLg-gfp和pLr-gfp分别与辅助质粒pCc1001(含有trp1基因)共转化进色氨酸营养缺陷型的灰盖鬼伞粉孢子的原生质体中。经过选择培养基筛选、假定转化子的分子鉴定以及GFP荧光检测。结果表明:香菇gpd-Le启动子在灰盖鬼伞的菌丝中具有较强驱动外源gfp基因表达的活性,在荧光显微镜和共聚焦显微镜下观察到gfp基因表达的绿色荧光。而香菇ras-Le启动子没有检测到有驱动外源gfp基因表达的活性。     

中国香菇种质资源中主要真菌病毒的多重RT-PCR检测技术

【背景】病毒是食用菌生产上较重要的一类潜在隐患。我们在前期的研究中发现,中国香菇(Lentinula edodes)种质资源中最常见的病毒有2种,分别为L. edodes partitivirus 1 (LePV1)和L. edodes mycovirus HKB (LeV-HKB)病毒,这2种病毒能单一或复合感染香菇。【目的】建立香菇种质主要病毒的快速检测技术,提高香菇病毒检测效率,降低检测成本。【方法】依据香菇β-actin基因及病毒LePV1和LeV-HKB编码依赖RNA的RNA复制酶(RdRp)基因序列分别设计引物,以复合感染了这2种香菇病毒的菌丝体为材料,对影响RT-PCR反应的主要因素模板浓度、引物浓度、dNTPs浓度、退火温度和循环次数等进行优化筛选,建立同时检测LeV-HKB病毒(LeV-HKB相关病毒)和LePV1病毒的多重RT-PCR检测技术。【结果】模板浓度、退火温度和循环次数对多重RT-PCR检测结果均有较大影响,而引物浓度和dNTPs浓度对检测结果的影响较小。所建立的多重RT-PCR技术在香菇核心种质病毒检测中表现为扩增目标条带清晰分明,检测结果与单重RT-PCR检测结果一致。对两种病毒的多重RT-PCR产物进行了序列测序,结果表明扩增片段序列与目标基因序列相似性在99%以上。【结论】所建立的多重RT-PCR检测体系具有较好的特异性与适用性,为室内和田间香菇病毒早期检测、病害流行的监测提供了技术储备。     

香菇液体发酵高产多糖菌株筛选

通过评价香菇野生菌株发酵产多糖性能,筛选高产香菇多糖菌株.以采自长白山野生香菇通过组织分离获得的6株菌株和2株人工栽培菌株为出发菌株,对不同发酵培养时间菌丝体生物量、胞内多糖含量、胞外多糖含量等进行测试分析,结果表明,8株菌株随着培养时间的延长,菌丝体生物量均有不同程度的增加,但胞内多糖含量和胞外多糖得率变化趋势不同,...     

几种主要食用菌的遗传转化研究进展

对平菇、香菇、草菇、银耳、双孢蘑菇的遗传转化体系的构建及其应用的研究进展进行了综述,对存在的问题进行了分析,并对未来的发展前景进行了展望。     

香菇杂交子农艺性状与差异基因表达类型的相关性研究

以香菇(Lentinula edodes)4个菌株为亲本组成3个杂交组合,采用单孢菌株配对获得杂交子,观察锁状联合鉴别出真正的杂交子,测定杂交子及其亲本的农艺性状。在每个杂交组合中分别各选取3个杂交子,研究杂交子和亲本在子实体发育阶段差异基因表达情况。结果表明:杂交子共有4种基因表达类型:双亲沉默型(W1型),单亲沉默型(W2型),杂交子特异表达型(W3型),单亲表达型(W4型)。香菇杂交子农艺性状与基因差异表达类型的相关性分析表明:菌盖厚与双亲沉默型(W1型)呈极显著负相关,而菌柄长与单亲沉默型(W2型)呈显著负相关。     

香菇多糖联合TA方案化疗治疗晚期乳腺癌的临床观察

目的:观察香菇多糖联合TA方案(紫杉醇、阿霉素)治疗晚期乳腺癌患者的近期疗效及毒副反应。方法:将确诊为Ⅳ期的52例乳腺癌患者随机分为对照组及治疗组,两组均采用TA方案化疗,治疗组加用香菇多糖,观察两组近期疗效及毒副反应,计算和比较两组治疗前后的CD4+/CD8+值。结果:治疗组及对照组的治疗总有效率分别为67.86%、62.50%,其差异无统计学意义(P>0.05);两组的生活质量(Karnofsky评分)改善率分别为71.43%和41.67%,治疗组显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后CD4+及CD8+细胞绝对计数均较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组CD4+/CD8+值上升,但与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05),对照组CD4+/CD8+值较治疗前下降,差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗后CD4+/CD8+值差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组毒副反应较对照组明显减轻(P<0.05)。结论:香菇多糖联合TA化疗方案能有效改善晚期乳腺癌患者的生存质量、调节免疫力并减轻毒副反应。     

作物节木代料香菇与纯木屑代料香菇蛋白质营养比较研究

采用国际通用的蛋白质营养评价方法,对2种作物节木代料和纯木屑代料(CK)香菇子实体蛋白质的营养价值进行了比较研究。结果表明,2种作物节木代料香菇子实体蛋白质的NI指标低于纯木屑代料香菇,而CS、AAS、EAAI、BV、SRCAA等指标均高于纯木屑代料香菇。结论:作物节木代料香菇子实体和纯木屑代料香菇子实体蛋白质均具有较高营养价值,且二者之间无显著差异。