南方鲇碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质的研究

用正丁醇抽提,硫酸铵分级沉淀,ＤＥＡＥ－纤维素和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００柱层析,从南方鲇（Ｓｉｌｕｒｕｓ　ｍｅｒｉｄｉｏｎａｌｉｓ　Ｃｈｅｎ）肠粘膜中提取出碱性磷酸酶（ＡＫＰ）。提纯倍数为３９．５０倍,比活为６８．３５μ／ｍｇ蛋白,提取酶液经ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ只呈现一条区带。该酶的分子量为１３２１４０,Ｎ末端氨基酸为门冬氨酸,最适ｐＨ为１０．１０,７．５＞ｐＨ＞１１．５时不稳定,最适温度为４０℃左右,对热不很稳定,以磷酸苯二钠为底物其Ｋ_ｍ值为１．７２×１０~（－３）ｍｏｌ／Ｌ。Ｍｇ~（２＋）、Ｍｎ~（２＋）为该酶的激活剂,ＫＨ_２ＰＯ_４、Ｌ－ＣｙＳ、ＭＥ、ＤＦＰ、ＥＤＴＡ－Ｎａ_２为抑制剂。选用ＫＨ_２ＰＯ_４和ＤＦＰ作抑制类型的判断,结果表明,ＫＨ_２ＰＯ_４属竞争性掏剂,其抑制常数为２．３ｍｍｏｌ／Ｌ;ＤＦＰ为非竞争性抑制剂,抑制常数为１．０５ｍｍｏｌ／Ｌ。     

不同磷脂和糖脂对莱氏衣原体膜上Mg~（2＋）－ATPase活性的影响

莱氏衣原体膜上Ｍｇ~（２＋）－ＡＴＰａｓｅ用ＤＯＣ溶解后,经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－６Ｂ和ＤＥＡＥ－ＣｅｌｌｕｌｏｓｅＤＥ－５２离子交换柱,得到了部分纯化的Ｍｇ~（２＋）ＡＴＰａｓｅ,并将此ＡＴＰａｓｅ与不同极性头部的磷脂和膜糖脂重组,研究了不同的极性头部的磷脂和膜糖脂对ＡＴＰａｓｅ活性的影响。此酶的活性不依赖酸性磷脂,ＰＧ、ＤＰＧ、大豆磷脂等明显抑制酶活性,中性磷脂ＤＭＰＣ、ＰＥ、ＰＣ则能增加酶活性,其中尤以非双层脂ＰＥ的作用最为明显。从莱氏衣原体膜上提取的糖脂（ＭＧＤＧ,ＤＧＤＧ）单独和ＡＴＰａｓｅ重组时,酶活性增加并不明显,当ＭＧＤＧ和ＤＧＤＧ以等比例混合时,能大大地增加酶活性。这表明Ｍｇ~（２＋）－ＡＴＰａｓｅ的活性很大程度上与磷脂的表面电荷及磷脂的组成相关。     

碱提水溶小皮伞多糖B_3的研究

用ＧＣ,ＩＲ,ＮＭＲ,ＧＣ－ＭＳ及高碘酸氧化,Ｓｍｉｔｈ降解,甲基化分析,部分酸水解等方法确定了一个新的碱提水溶小皮伞多糖的一级结构：分子主链α－Ｄ－（１→２）Ｍａｎ,支链α－（１→４）,α－（ａ→６）Ｇｌｃ,且均连在主链的０─６上。     

氰类和酯类取代基水溶金属卟啉与DNA相互作用的共振拉曼研究

用共振拉曼和紫外－可见吸收光谱研究了水溶金属卟啉４－Ｎ－乙酸乙酯基－吡啶基铜卟啉和镍卟啉［简称Ｃｕ（ＮＥＡＥ）和Ｎｉ（ＮＥＡＥ）］及４－Ｎ－乙腈基－吡啶基铜卟啉［简称Ｃｕ（ＮＡＣＮ）］与小牛胸腺ＤＮＡ的相互作用。分析表明Ｃｕ（ＮＥＡＥ）、Ｎｉ（ＮＥＡＥ）和Ｃｕ（ＮＡＣＮ）分别以外部键联、部分插入和沟槽方式与ＤＮＡ作用;卟啉插入ＤＮＡ时吡啶基团向卟啉环平面转动但不可能转成与之共面;而以非插入方式作用时吡啶基团会向垂直于或者平行于卟啉环平面转动。吡啶取代基的大小和空间位阻是影响相互作用方式的关键因素之一。     

对氨基苯甲酸酯同系物形成细胞色素P_（450）代谢中间体络合物的定量结构与活性关系

细胞色素Ｐ４５０（Ｐ４５０,Ｅｃ１．１４．１４．１）是一种十分重要的催化氧化反应的酶。本文测定了１２个对氨基苯甲酸酯同系物与Ｐ４５０相互作用而形成Ｐ４５０代谢中间体络合物的活性,用半经验分子轨道法ＭＮＤＯ－ＰＭ３计算得到了这些同系物的分子轨道指数,并用逐步多元回归分析法导出了活性与分子轨道指数及正辛醇／水分配系数的对数值（ＬｏｇＰ）之间的定量结构与活性关系（ＱＳＡＲ）。结果表明：对氨基苯甲酸脂同系物形成Ｐ４５０代谢中间体络合物的活性与原子净电荷的绝对值之和（∑Ｑ）和ＬｏｇＰ均具有很好的抛物线型相务性,同时,ＬｏｇＰ与∑Ｑ之间也存在相当好的相关性。     

降血脂药物（DEHP）对酰基CoA氧化酶基因反式作用因子的影响

从对照和用ＤＥＨＰ处理的大鼠肝脏提取核蛋白,以含酰基ＣｏＡ氧化酶（ＡＯＸ）基因表达调控部位的ＤＮＡ片段和该基因的不同蛋白结合位点的ＤＮＡ片段作为核蛋白结合反应的探针,通过凝胶电泳迁移率改变实验和Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析检查了ＤＥＨＰ对ＡＯＸ基因反式作用因子的影响。结果表明,降血脂药物ＤＥＨＰ可显著增加ＡＯＸ基因反式作用因子的含量和（或）与基因的结合活性,在转录水平上促进基因的表达。     

核蛋白基本单元的合成－O－乙基－UMP－丙氨酸甲酯

在合成磷酰蛋白的模型化合物体Ｎ－（Ｏ,Ｏ－二烷基）磷酰化氨基酸（１）的基础上,首次合成了有机磷生命化学的模型化合物──核蛋白基本单元Ｎ－（Ｏ－烷基,Ｏ－核苷）磷酰化氨基酸（２）,并对上述物质进行了分离、鉴定、比较了两种模型的合成方法。这对在小分子水平上,深入研究磷酰基的参与作用和蛋白质与核酸之间的互相作用机理提供了较好的模型化合物。     

广西HBsAg阳性母亲的胎儿肝、肾细胞中乙肝病毒DNA存在状态的研究

采用核酸分子杂交Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法,以３２Ｐ标记的ＨＢＶＤＮＡ为探针,检测ＨＢｓＡｇ阳性母亲引产的４０例胎儿的肝、肾组织。结果有２例胎肝和１例胎肾细胞ＤＮＡ出现大于３．２ｋｂ的杂交带,表明ＨＢＶＤＮＡ已处于整合状态。胎肾细胞基因组中查出ＨＢＶＤＮＡ整合为首次报道。     

促髓细胞分化的锌指基因单向PCR扩增直接测序的研究

锌指基因是一种造血调节基因,编码锌指结构蛋白,主要在髓细胞中表达,促进髓细胞分化,在急性早幼粒白血病维甲酸治疗中,促使病情缓解。本文报道了我们从基因分子上研究锌指基因作用中,探索并建立了单向聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增特定单链ＤＮＡ,直接测序的新方法。它能产生质和量均佳的单链ＤＮＡ,无需纯化即可直接用于测序,使复杂的测序研究简便易行,可在２,３天内完成。这种单向ＰＣＲ扩增特定单链ＤＮＡ直接测序的方法,经对锌指基因的ｃＤＮＡ测序,得到验证。此法不仅适用于疾病研究中的ＤＮＡ测序,还可制各单链ＤＮＡ探针,更利于基因结构组成的研究。