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91.
构建了含有pGHcDNA的重组痘苗病毒,用ELISA证明该重组病毒在被感染的h143细胞中,可表达出猪生长激素并将之分泌到培养基中,表达量约为1.05μg/10 ̄6细胞(24h)。用定位免疫化学法进一步证明该病毒可感染小鼠并在小鼠体内表达pGHcDNA。同时还构建了含双拷贝pGHcDNA的重组痘苗病毒,并证明其pGH表达量比单拷贝重组病毒有明显提高,约为1.50μg/10 ̄6细胞(24h)。 相似文献
92.
通过DNA体外重组技术,以pET-3b为表达载体,构建了重组表达质粒pET-6R(B)和PET-6R(B)4,分别编码28kD的hIL-6R配基结合区片段及其53kD的二联体蛋白,并为酶切分析和DNA序列分析所证实。SDS-PAGE分析表明,含有重组表达质粒的菌株可分别表达出28kD的蛋白rIL6R-28和53kD的rIL6R-53。重组蛋白分别占菌体总蛋白的45%和29%左右。重组蛋白主要以包涵体形式存在,Western印迹表明重组蛋白具有IL-6R的抗原性。 相似文献
93.
以人胃癌细胞BGC-823为模型,研究了毛喉萜(forskolin)对胃癌细胞中蛋白激酶C活性及其亚类基因表达的作用,同时也观察了毛喉萜对癌基因c-jun及抑癌基因p53表达的影响.结果表明,2×10~(-5)mol/L毛喉萜处理BGC-823细胞72h,细胞质、膜和细胞核PKC活性下降,PKC亚类β,γ基因表达被抑制,癌基因c-jun的表达也明显降低,而抑癌基因p53表达升高,上述变化可能是毛喉萜抑制胃癌细胞增殖等生理效应的重要分子事件。 相似文献
94.
重组水蛭素HV2的稳定性 总被引:3,自引:0,他引:3
重组水蛭素HV2是凝血酶的特异性抑制剂,是一种非常稳定的蛋白质。温度的升高(100℃水浴)和pH(1─13)的改变不影响其活力,在某些变性剂(8mol/L尿素、1%SDS和6mol/L盐酸胍)存在的条件下也非常稳定,0.1mol/L的DTT在70℃时使其部分失活,只有pH和温度同时升高其活力才开始下降,pH13、80℃处理15min即完全失活,氨基酸组成和活性分析发现失活样品的Cys和Lys被破坏。重组水蛭素HV2含有一个结构紧密的N端核心区和一个无序的C端尾部。其N端的3个Lys-Xaa键均不被胰蛋白酶水解;胃蛋白酶及糜蛋白酶消化后,分离所得片段,氨基酸组成分析发现N端核心区依然保持很高的抗凝血酶活性,继续消化24h,核心区不被进一步降解。 相似文献
95.
利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子-1(rPAI-1)具有许多与天然PAI-1相同的性质,rPAI-1对u-PA抑制活性研究的内容包括:几种化学物质(盐酸胍、尿素、硫氰酸钾、SDS、氯化钠等)对rPAI-1的激活作用、盐酸胍激活rPAI-1的浓度与温度效应、显色底物法和SDS-PAGE纤维蛋白自显影对rPAI-1活性的测定、活性态rPAI-1向潜状态的转变及其与盐浓度和pH值的关系。 相似文献
96.
黄河清 《中国生物化学与分子生物学报》1995,11(4):465-469
在紫外可见光谱区内,固氮酶铁钼辅基〔(Mo_2Fe_(12)S_(12))4-〕均无特征吸收峰,不含高柠檬酸盐。含双钼的铁硫簇〔(Mo_2Fe_(6~12)S_(6~12))~(1~4)-〕的电荷数、颜色与该金属簇中的亚铁量成对应关系,并都有较高的生物重组活性. 相似文献
97.
将编码人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pEX31A中,在大肠杆菌中表达出MS2/MCP-1融合蛋0白,该表达产物约占菌体总蛋白的15%左右,Westernblot检测表明,表达产物可与MCP-1抗体特异反应。采用琼脂糖平板法进行活性测定表明,表达产物具有明显的单核细胞趋化活性,说明N端融合一段细菌蛋白对MCP-1有无趋化活性可能没有影响。 相似文献
98.
t-PA cDNA在CHO细胞中的高效稳定表达 总被引:1,自引:0,他引:1
我们曾报道t-PA mRNA非翻译区序列对其表达有明显的抑制作用,在此基础上,通过对5′-UTR及3′-UTR的改造,使t-PA在COS-7细胞中的表达水平提高30倍左右。将t-PA表达质粒用电击法转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株(CHO-dhfr),经过混合加压及筛选,在CHO细胞中高效表达了t-PA,表达水平达到5000~6000 IU/10~6细胞/24hr。重组t-PA具有与天然t-PA相同的分子量及酶活性。经过8个月连续传代,表达水平未下降,表明细胞株是稳定的,其主要指标均符合工程细胞株的要求。 相似文献
99.
人染色体脆性位点部位的显微光谱学研究
Study of Microspectroscopy for the Position of the Fragile Sites in Human Chromosome 总被引:5,自引:1,他引:4
采用显微分光光度法,对染色体脆性位点的部位进行了显微光谱学研究。实验证明,带有脆点的染色体其DNA含量大多数趋向减少,少数略有增加,推测染色体脆性部位的产生是由于染色质DNA在高度凝缩形成中期染色体过程中超旋结构改变的结果。
The position of fragile sites in human chromosome was studied by means of the microspectroscopy. The results show that the amount DNA in chromosome with fragile sites decreases in most condition. We can suppose that the fragile sites of chromosome is caused by the superhelix structure changes of chromosome DNA during the formation of metaphase chromosome which is formed in high condensation. 相似文献
100.