用于测定小分子多肽的两种电泳方法的比较

对于小分子多肽的分析目前多采用甘油－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ系统,但经实践后发现,此系统电泳时间太长,导致小分子扩散丢失较多,小分子成像不清,后经用尿素代替甘不同,同时降低三层胶的浓度,制成１５.5％Ｔ（Ｃ＝６％）的分离胶、１０％Ｔ（Ｃ＝３％）的间隙胶与４％Ｔ（Ｃ＝３％）的浓缩胶档但节省了电泳时间,且小分子多肽成像清楚。     

低分子量有机酸对红壤无机态磷转化及酸度的影响

以鄂南、赣北两红壤样品为材料,加入不同有机酸并经室温培养后,测定不同P组分、pH及活性Al含量的变化。结果表明,供试有机酸均使土壤Ca2－P含量增高,增幅大小依次为柠檬酸＞苹果酸＞琥珀酸＞乙酸;2种土壤的Ca8－P和Ca10－P含量无明显变化规律,Fe-P、Al-P和O－P含量有所下降,除乙酸处理的土壤pH值无显著变化外,其它有机酸的加入使pH下降0．65－1．96;有机酸引起活性Al量增多,除乙酸处理的变化较小外,其它有机酸或混合物的加入使土壤中0．02mol.L^-1CaCl2提取Al增加4．7－50．3倍,1mol.L^-1提取Al增加4．0－67．3倍。可见,有机酸具有双重作用,既增加P的有效性,又增加土壤酸度和Al毒。     

金矿床区蜡状芽孢杆菌孢壁蛋白SDS-PAGE图谱及聚类分析

用SDS PAGE方法对 5株从我国金矿床区采集到的典型的蜡状芽孢杆菌 (Bacilluscereus)C6,C14 ,B2 ,JY I T1,JY X T9的孢壁蛋白同标准株AS1.12 6的孢壁蛋白共同进行比较分析 ,计算出了各蛋白电泳带的近似分子量 ,又以它们的迁移距离为标准同苏云金芽孢杆菌 (Bacillusthuringiensis)的孢壁蛋白相比较 ,得到聚类分析树状图谱 ,表明具有聚金作用的蜡状芽孢杆菌在分类学上具有相似性 ,而与具有杀虫作用的Bt菌株在分类学上则相差较远。     

小伞山羊草高分子量麦谷蛋白亚基及其基因的鉴定

运用SDS_PAGE和分子克隆技术 ,对小伞山羊草 (Aegilopsumbellulata ,UU ,2n =2x =14)的高分子量麦谷蛋白亚基 (1Ux ,1Uy)及其编码基因进行了鉴定。SDS_PAGE分析表明小伞山羊草不同基因型中的 1Ux的电泳迁移率接近或慢于普通小麦 1Dx2 .2亚基的电泳迁移率 ,1Uy亚基的电泳迁移率一般接近或慢于普通小麦的 1Dy类亚基。采用PCR扩增技术获得了 1Ux和 1Uy亚基编码基因的全长编码区 ,并对一个 1Uy基因的全长编码区进行了全序列测定。对推导的氨基酸序列进行比较发现 1Ux和 1Uy亚基具有与来自于其他物种的高分子量麦谷蛋白亚基一致的一级结构 ,聚类分析显示 1Ux和 1Uy亚基与D基因组编码的高分子量麦谷蛋白亚基在起源和进化上具有较高的相似性。     

高温加速老化过程中甜菜种子线粒体小分

甜菜(BetavulgarisLcv.Loke)种子的人工老化(30℃,100％RH)导致种子的干重、生活力和活力逐渐丧失,线粒体的呼吸速率、细胞色素c氧化酶和苹果酸脱氢酶的活性下降。线粒体蛋白质随着种子老化而显著变化,小分子量热休克蛋白(LMWHSP)22从老化的0d到30d增加,然后从30d到90d下降。可以认为甜菜种子人工老化过程中线粒体活性和LMWHSP22的含量变化与种子活力密切相关。     

高分子量和低分子量尿激酶的分离纯化及动力学性质研究

人尿激酶粗品经苯甲脒亲和柱纯化和Protein-PahSP柱分离后,得到两种分子量的尿激酶（UK）,即高分子量尿激酶（HUK）和低分子量尿激酶（LUK）．采用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,纤维蛋白平板法测定活力,测得HUK比活为2.9×105IU／mg蛋白,LUK为3.5×105IU／mg蛋白,活力回收为70％以上．经SDS-PAGE鉴定,HUK和LUK均是单一条带,分子量分别为54kD和33kD．HUK和LUK水解显色底物S2444的动力学常数,分别测得HUK的Km为64μmol/L,Kcat为15s-1,LUK的Km为49μmol／L,kcat为13s-1,LUK的催化效率（Kcat／Km）稍高于HUK．     

高分子量和低分子量尿激酶的分离纯化及动力学性质研究

人尿激酶粗品经苯甲脒亲和柱纯化和Ｐｒｏｔｅｉｎ－ＰａｋＳＰ柱分离后,得到两种分子量的尿激酶（ＵＫ）,即高分子量尿激酶（ＨＵＫ）和低分子量尿激酶（ＬＵＫ）,采用民斯亮蓝法测定蛋白质浓度,纤维蛋白板法测定活力,测得ＨＵＫ比活为２．９×１０＾５ＩＵ／ｍｇ蛋白,ＬＵＫ为３．５１０＾５ＩＵ／ｍｇ蛋白,活力回收为７０％以上,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定,ＨＵＫ和ＬＵＫ均呈单一条带,分子量分别为５４ｋＤ和３３ｋＤ,Ｈ     

纳豆激酶的研究与应用

纳豆激酶的研究与应用付利,杨志兴（黑龙江省科学院应用微生物研究所）纳豆为日本的传统发酵大豆食品,已食用了２０００年以上。它是由枯草杆菌（ＢａｃｉｌｌｕｓＳｕｂｔｉｌｉｓ）或纳豆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｎａｔｔｏ）发酵大豆制造成的,日本民众十分喜欢食用。同时也被用作民间药品,以预防和治疗心脑血管性疾病。     

微生物学

<正> 从聚丙烯酞胺凝胶中有效地电泳转移DNA片段到硝酸纤维素纸上的方法得到发展。此法已用于带有小牛胸腺载体DNA的未经处理的Xl74-RF-DNA和用NaOH处理过的变性DNA。制备好末端标记的限制性片段,进行样品的聚丙烯酸胺凝胶电泳。     

鼠抗人纤维蛋白单链抗体-尿激酶杂合基因的构建及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达

采用 DNA重组技术构建了表达鼠抗人纤维蛋白单链抗体与低分子量尿激酶融合基因的真核表达载体。通过磷酸钙共沉淀法 ,将该表达载体转染到中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶基因缺陷株 ( CHO- dhfr-)中 ,利用选择培养基筛选出稳定表达的细胞株 ,溶解圈法测定融合蛋白的表达水平为每 1 0 6细胞每天 5 8IU。该融合蛋白保留了与纤维蛋白的结合活性和溶解纤维蛋白的溶纤活性。SDS- PAGE,Western印迹法分析证明融合蛋白的相对分子质量约为 70× 1 0 3