MT1受体在无蹼壁虎肝脏的分布

目的为观察褪黑激素受体1(melatoninreceptor1,MT1)免疫反应在无蹼壁虎肝脏分布。方法我们采用苏木素染色和免疫荧光单标的方法。结果发现无蹼壁虎肝脏主要由肝细胞和肝脏库普弗细胞组成;肝细胞单位区域细胞数右叶(rightlobe)(217·159±3·571个/mm2)较左叶(84·317±2·072个/mm2)明显多(P<0·05),库普弗细胞单位区域细胞数左叶(leftlobe)(50·276±2·257个/mm2)较右叶(18·241±1·563个/mm2)明显多(P<0·05);左、右叶库普弗细胞数占细胞总数的百分率明显不同(左叶:4·054%±1·642%,右叶:1·261%±0·536%)(P<0·05)。免疫组化结果显示MT1受体在肝细胞和库普弗细胞均有表达。MT1免疫阳性反应主要位于细胞膜和细胞质。MT1受体阳性反应肝细胞单位区域细胞数右叶(72·381±3·614细胞数/mm2)较左叶(38·153±2·684细胞数/mm2)明显多(P<0·05);库普弗细胞阳性反应单位区域细胞数左叶(12·541±0·572细胞数/mm2)较右叶(6·443±0·761细胞数/mm2)明显多(P<0·05)。MT1受体阳性反应细胞数在左、右叶库普弗细胞也存在明显的部位差异(P<0·05)。结论上述结果提示褪黑激素经褪黑激素受体的介导对无蹼壁虎肝脏左、右叶肝细胞和库普弗细胞生理功能的调控存在差异。     

种貉被毛微量元素的分析

采用低温干灰化法制备样品,ICP-AES同时分析毛皮动物貉被毛组织中多种微量元素.Ba、Be、Cd、Si、Y和Zn的测定下限为1.0～9.0 ng·g-1级,B、Fe、La、Mg、Mo、Ni 、Ti、Co、Cr、Cu、Sr、V和Zr为0.01～0.09 μg·g-1级,In、Th、P和为0.13～0.23 μg·g-1级,大于1的只有Nb是1.08 μg·g-1级.该方法经国家人发标准物质GBW07601验证,测得方法相对误差在0.83%～9.59% 之间,相对标准偏差在0.81%～5.20%之间,各项检测指标均能满足生物样品检测要求,分别测得健康种貉、自咬症轻重病貉被毛中的22种微量元素,健康貉的B、Co、Cr和Ni微量元素含量明显高于病貉,而Al、Ba、Be、Cd、Mo、Pb、Sr、Ti和Zr元素含量较低.该方法可以满足生物样品元素分析的要求.     

保护性抗体存在时细胞免疫反应对雪貂感染1918年流感的保护作用

研究感染人的高致病性流感的保护性免疫反应,对研发下一代的流感疫苗有重要的提示作用。鉴于此,采用不同的免疫方式对雪貂进行免疫,分别有:一针免疫传统疫苗;两针免疫表达HA的DNA疫苗,或者先     

稳定表达貉犬瘟热病毒细胞受体SLAM的Vero细胞系的建立及应用

[目的]信号淋巴激活分子(SLAM又称CD150)为犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)的细胞受体.本研究目的在于建立稳定表达犬瘟热易感动物貉SLAM基因的Vero细胞系,用于犬瘟热诊断及CDV强毒株的快速分离.[方法]从重组质粒pMD-18-T-rSLAM扩增rSLAM基因编码区,通过分子克隆技术构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-rSLAMhis.将该质粒转染Vero细胞后,经EGFP荧光观察、G418抗性压力和单细胞克隆化及RT-PCR筛选表达rSLAM阳性细胞系.应用获得细胞系对临床犬瘟热病例进行病毒分离,对分离得到CDV进行RT-PCR鉴定及动物回归试验.[结果]经过RT-PCR和免疫组化试验证实,本实验筛选获得一株能稳定表达rSLAM的Vero细胞系——Vero-rSLAM.该细胞系接种CDV阳性样品36-48h即可产生典型CDV致细胞融合病变,而其亲本Vero细胞接种至6d均无可见细胞病变出现.应用Vero-rSLAM细胞系从狐狸、貉犬瘟热阳性病料中分离获得了3株犬瘟热病毒.其中犬瘟热病毒LN(10) f1株对易感狐狸、貉均可产生致死性感染.[结论]成功建立了稳定表达rSLAM的Vero细胞系,用它分离的CDV对本动物保持较强的毒力.     

唾液酸受体并非流感病毒各亚型在雪貂组织中播散分布的决定因子

目的探讨流感病毒在雪貂组织中的分布与唾液酸受体的关系。方法用病毒分离的方法分析流感病毒H5N1（SZ406H,A/VN/1203/04）,SH1N1,H3N2（Brisbane/09,HK/09）在雪貂各组织中分布,用直接免疫荧光法分析雪貂各组织的唾液酸受体的分布,并通过体外实验证实活病毒与组织上受体的结合。结果 H5N1（SZ）和H5N1（A/VN/1203/04）在雪貂的肝、脾、肺、肠中有分布,H5N1（A/VN/1203/04）在脑组织中也有分布,而SH1N1、H3N2（Brisbane/09,HK/09）只分布于肠组织。而唾液酸受体SAα2,6Gal和SAα2,3Gal的I型受体分布于脾、心、肺、肠、脑组织中,和SAα2,3Gal II型受体分布于肝、脾、心、肺、肠、脑组织。SH1N1病毒与SAα2,6Gal能结合,而H5N1与SAα2,3Gal结合。结论 H5N1能在雪貂的多器官组织组织中分布和繁殖,而H3N2和SH1N1仅能在肠组织中分布繁殖。SAα2,6Gal和SAα2,3Gal受体在雪貂多器官组织中均有表达,说明唾液酸受体是病毒进入的门户,但不是病毒分布的决定因子。