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141.
为探讨新的豆类凝集素(Flt3 receptor-interacting lectin,FRIL)体外维持脐血CD34^ 细胞的作用以及维持过程中细胞周期调控基因HTm4及HTm4S mRNA的表达及意义,我们利用FRIL维持培养脐血CD34^ 细胞,对其增殖曲线、细胞周期及集落形成能力进行常规分析,并用半定量RT—PCR法分别测定FRIL体外维持不同时间后脐血CD34^ 细胞中周期调控基因HTm4及HTm4S mRNA的表达变化。结果显示,FRIL培养的CD34^ 造血干/祖细胞的增殖趋势平缓,整个培养期间细胞增殖倍数不超过起始的3倍:14d之前,FRIL培养细胞的高增殖潜能集落形成细胞(HPP—CFC)形成集落数与FL组无差别,其后则维持高于FL的情况。细胞周期分析则显示,在28d的培养过程内,利用FRIL培养的细胞始终有80%以上维持在G0期;而周期调控基因HTm4及HTm4S在刚分离的脐血CD34^ 细胞中的表达水平较高;但培养1d后,几乎检测不到HTm4基因的表达;培养3~14d,该基因的表达回升并持续维持在高水平。而HTm4S基因的表达在第7d达最高水平,其余时间基本呈稳定表达。转染HTm4和HTm4S,亚细胞定位结果显示HTm4主要定位于核周围,而HTm4S则定位于整个胞浆,由此可能导致它们功能的区别。以上结果提示,长期培养体现出FRIL在维持造血干/祖细胞多能性上的优势;细胞周期调控基因HTm4及其新剪接子参与了FRIL体外长期维持脐血造血干/祖细胞处于静息状态的过程。 相似文献
142.
Identification of a novel population of human cord blood cells with hema-topoietic and chondrocytic potential 总被引:1,自引:1,他引:0
With the exception of mature erythrocytes, cells within the human hematopoietic system are characterized by the cell surface expression of the pan-leukocyte receptor CD45. Here, we identify a novel subset among mononuclear cord blood cells depleted of lineage commitment markers (Lin-) that are devoid of CD45 expression. Surprisingly, functional examination of Lin-CD45- ceils also lacking cell surface CD34 revealed they were capable of multipotential hematopoietic progenitor capacity. Co-culture with mouse embryonic limb bud cells demonstrated that Lin^-CD45^-CD34^- cells were capable of contributing to cartilage nodules and differentiating into human chondrocytes. BMP-4, a mesodermal factor known to promote chondrogenesis, significantly augmented Lin^-CD45^-CD34^-differentiation into chondrocytes. Moreover, unlike CD34~ human hematopoietic stem cells, Lin^-CD45^-CD34^- cells were unable to proliferate or survive in liquid cultures, whereas single Lin^-CD45^-CD34^- cells were able to chimerize the inner cell mass (1CM) of murine blastocysts and proliferate in this embryonic environment. Our study identifies a novel population of Lin-CD45-CD34^- cells capable of commitment into both hematopoietic and chondrocytic lineages, suggesting that human cord blood may provide a more ubiquitous source of tissue with broader developmental potential than previously appreciated. 相似文献
143.
目的 :研究PF4及其小肽PF417 70对新鲜脐血CD34+细胞的趋化作用及对粘附分子表达的影响。方法 :采用免疫磁珠法 (MACS)分选CD34+细胞 ,利用Transwell穿孔板测定PF4对CD34+细胞的趋化作用 ;流式细胞仪检测免疫荧光标记的粘附分子及CXCR4的表达。结果 :①PF4对脐血CD34+细胞有趋化作用 ,PF4组的趋化百分比为 15 7.43%± 5 0 .0 6 %(P <0 .0 5 ) ,PF417 70组为 187.0 2 %± 10 .6 9%(P <0 .0 5 )。②PF4作用于CD34+细胞时 ,CD49d和CXCR 4表达增加 ,对其它粘附分子CD31,CD44 ,CD11a ,CD6 2 p ,CD6 2E的表达没有影响。 结论 :PF4对脐血CD34+细胞有趋化作用 ,促进整合素CD49d及CXCR4的表达 ,PF4有助于脐血干细胞的归巢。 相似文献
144.
FLT3配基在人骨髓基质细胞系中的基因转移与表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究逆转录病毒介导的FL在骨髓基质细胞系HFCL中的表达。方法:采用脂质体法将重组质粒pLF-SN/HFCL和空载体pLXSN/HFCL转染包装细胞PA317,G418筛选抗性克隆,用抗性克隆上清液感染HFCL。RT-PCR和基因组DNA-PCR检测外源基因mRNA水平的表达及染色体的整合,小鼠CFU-GM集落法检测FL生物学活性。结果:在mRNA水平上有FL的表达,染色体基因组中整合有标记neo基因和FL基因。活性测试结果显示转染的骨髓基质细胞分泌FL。结论:提示骨髓基质细胞可作为基因治疗的靶细胞。 相似文献
145.
146.
用RDA技术寻找肝再生相关基因的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
利用表达性差异显示分析 (RDA)技术 ,研究大鼠 2 /3肝部分切除后 1h肝组织中基因的选择性表达 ,建立了大鼠 2 /3肝部分切除术后 1h再生肝组织选择性表达基因EST库。该库约含 3× 10 4 个独立克隆 ,其中 95 %以上的克隆含有插入片段 ,长度约 2 0 0~ 70 0bp不等 ,对随机挑出的 5 2个克隆的序列分析表明其中大多数基因与肝再生调控相关 (38/5 2 )。 10株未报道序列经RNA杂交证实 ,其中 6株与肝再生相关。 相似文献
147.
以免疫家兔制备的抗人Ⅳ型胶原多抗包板,采用改良过碘酸钠法辣根过氧化物酶标记抗人Ⅳ胶原单抗,建立了一种血清Ⅳ型胶原的增强化学发光双抗夹心酶免测定法.实验结果表明方法较为灵敏、准确、稳定、特异,其最低检测限为30 μg/L,平均回收率为94.5%,批内和批间变异系数分别≤6.0%和11.6%.测定60例健康人,其参考值为160 μg/L,与进口的日本试剂盒相关性良好,因此可以作为临床血清Ⅳ型胶原放免测定法的参考替代方法. 相似文献
148.
我院1994~1997年对66例持续性枕横位及枕后位采用经阴道徒手旋转术纠正胎头位置,结果成功率74.2%,效果明显,现报道如下:1临床资料1.1一般资料66例中持续性枕横位54例,持续性枕后位12例。初产妇50例,经产妇16例。1.2徒手旋转指征(... 相似文献
149.
为了观察异种血清诱发肝纤维化过程中细胞外基质(ECM)及其生成细胞的变化规律,经腹腔注射猪血清建立大鼠肝纤维化模型,以免疫组织化学方法显示肝内胶原(Col)Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型和纤连蛋白(Fn)及其生成细胞。结果:①Fn最早在汇管区、小叶间隔内沉积,ColⅢ、Ⅳ、Ⅴ随之增多,停止血清注射后它们都明显减弱或消失;ColⅠ沉积出现最迟,但阳性迅速增强,停止注射后仍较强;②结蛋白(Dm)阳性的肝星状细胞(HSC,原称Ito细胞)其分布和数量变化与Fn和ColⅡ基本同步,而位于汇管区及细胞间隔的原始间叶细胞(PMC)Dm(-)。提示ECM生成细胞可能来自细胞骨架表型不同的PMC和HSC,本模型由于能清晰地显示ECM及其生成细胞而更适用于肝纤维化机制及防治的研究。 相似文献
150.