用Hela229细胞培养法研究呼吸道肺炎衣原体感染

本文用Ｈｅｌａ２２９细胞培养与单克隆抗体免疫荧光法对９４０例咽拭子及２２４例纤支镜取材标本进行肺炎衣原体分离鉴定。结果正常组、上呼吸道感染组、下呼吸道感染组、肺部肿瘤组的咽拭子标本分离率分别为０％（０／２４８）,２．１３％（１０／４６８）,２．１％（３／１４６）,１．２８％（１／７８）。上呼吸道感染组和下呼吸道感染组的分离率均高于正常组和肺部肿瘤组。前二组与正常组的差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）,与肿瘤组的差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）。下呼吸道感染组、肺部肿瘤组的纤支镜取材分离率分别为１０．９６％（     

α１抗胰蛋白酶Pi表型的分布及其与肝癌相关性的分析

本文以凝胶等电聚焦电泳方法测定150例原发性肝癌患者、100例良性肝病患者和112例正常人血清α1AT(Pi)表型的分布。统计学检验说明：（1）我们的烽样结果符合Hardy-Weinberg平衡定律;（2）M2等位基因的相对危险度在2.18-21.96,平均为7.502±3.836。因此,M2的出现在肝癌的检测中有重要意义。     

转化生长因子α－绿脓杆菌外毒素融合蛋白TGFα－PE40高效表达质粒的构建和表达

利用基因工程技术,将质粒pYX382用xbaI和EcoRl切下插入的TGFa—PE40融合 基因片段-连接到可表达载体pCB604的XbaⅠ／EcoR Ⅰ位点中,构建成新的重组质粒p2x—TP1。P2x—TP1转化E.coli BL2l感受志菌后,在ⅠPTG诱导下Ⅰpp启动子转录表达TGFα—PE40融合蛋白。表达产物主要以包涵体形式沉积在细胞内。融合蛋白表达量的高低与诱导时的细胞密度,诱导的温度以及培养基有关。在一定范围内与诱导剂的剂量以及诱导时间的长短无关。P2x—TPl重组质粒在工程菌中的表达TGFα－PE40融合蛋白量约为50mg／L。     

α－淀粉酶和糖化酶在酿酒酵母中的表达和分泌

将地衣芽孢杆菌α－淀粉酶基因及黑曲霉糖化酶cDNA重组进大肠杆菌．酵母穿梭质粒,转化酿酒酵母,构建能分解淀粉的酵母工程菌。酶活力测定和酶学性质分析的结果显示：在酵母MF—αl因子及磷酸甘油酸激酶基因的启动子和终止信号的调控下,α－淀粉酶和糖化酶基因在酵母中获得高表达并向胞外分泌这两种酶。构建的酵母工程菌在含10％淀粉的培养基中6天内能水解97%的淀粉。重组质粒能在酵母中较稳定地存在。     

从睡眠剥夺树鼩（TBC）尿液提取内源性“睡眠因子”（sleep factor）的研究

本研究报道从睡眠剥夺（ＳＤ）４８—７２ｈ的灵长类原宗（ｐｒｉｍｉｔｉｖｅｓｔｏｃｋ）Ｔｕｐａｉａｂｅｌａｎｇｅｒｉｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（ＴＢＣ）提取内源性“睡眠因子”（ｓｌｅｅｐｆａｃｔｏｒ）Ｓ２Ｃ和Ｓ４Ｂ。收集的尿液经超滤,清液冻干经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１５分离得到ＦｒａｃｔｉｏｎⅠ－Ⅴ。活性测定发现Ｆｒａｃｔｉｏｎ－Ⅲ（Ｓ２Ｃ）呈现显著δ－增强促眠效应。经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２５和ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０进一步净化的Ｓ４Ｂ也呈现显著δ－增强促眠效应。     

r射线诱发大鼠胚胎细胞转化与N—ras的激活

以ｒ射线诱发转化的大鼠胚胎细胞（ＲＥＣ：ｃｙｃ：ｒ３３）的ＤＮＡ构建粘粒基因库,用总基因库ＤＮＡ转染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞,产生转化灶的ＤＮＡ作二轮转染,二轮转化的ＮＩＨ３／Ｔ３细胞内有大鼠ＲＥＣ：ｍｙｃ：ｒ３３ＤＮＡ中具转化活性的Ｎ－ｒａｓ基因,用不对称ＰＣＲ和ＤＮＡ序列分析法证明,ＲＥＣ：ｍｙｃ：ｒ３３细胞中鼠Ｎ－ｒａｓ的活化是由于第６１位密码子的Ａ→Ｇ点空为。ＮＩＨ／３Ｔ３转化灶中鼠Ｎ－ｒａｓ也     

胎盘型谷胱甘肽S－转移酶基因在胃癌中的表达

用Ｄｉｇ－ＧＳＴ－πｃＤＮＡ探针分子杂交方法,检测了正常胃组织,胃癌及相应癌旁正常组织中ＧＳＴ－πＤＮＡ和ＧＳＴ－πＲＮＡ水平,发现ＧＳＴ－πＤＮＡ水平没有明显变化,而ＧＳＴ－πＲＮＡ在８例胃癌组织中有６例高于正常胃组织,在１２例低分化腺癌中有７例癌旁正常组织高于相应癌组织,表明ＧＳＴ－π基因表达增加与胃癌有关,而且早于细胞形态的变化。     

P53，Rb和c－myc基因在人脑原发性肿瘤中的转录表达

采用RNA斑点杂交分析,对21例人脑原发性胶质瘤和11例人脑膜瘤中p53,Rb和c-myc基因转录水平的表达进行研究.发现48.4%的肿瘤中p53基因表达减弱,21.9%的肿瘤中Rb基因表达减弱;71.9%的肿瘤中c-myc基因表达增强.在p53基因表达减弱的15例病例中有13例(80%)c-myc基因表达增强.结果表明,p53基因表达减弱和c-myc基因表达增强与人脑原发性肿瘤的发生有关.     

乳腺癌单克隆抗体AF9抗原的特性及分布

对抗人乳腺癌单抗AF9识别的抗原特性及分布进行了研究,结果表明AF9抗原是由糖、脂及蛋白质组成的复合蛋白质,不耐热;AF9识别的抗原决定簇不存在于铁蛋白及癌胚抗原;蛋白质印迹检测表明AF9识别的抗原有4种成分,分子量分别为51 000,56 000,67 000,73 000.免疫组化ABC染色显示该抗原主要存在于乳腺癌细胞的胞浆及胞膜,在部分其它种类肿瘤组织中也可检测到,但在所检正常组织中未见到.AF9抗原可能是新的乳腺肿瘤相关抗原.