PCR技术检测食源性致病菌的研究进展

食源性致病菌的检测技术是食源性疾病预防与控制的关键环节。PCR是近年来广泛应用于食源性致病菌快速检测的方法之一。在食源性致病菌中,用于PCR检测的靶基因包括各种毒力基因、酶基因及特异性鉴别基因。这些靶基因的发现推动了食源性致病菌PCR快速检测的发展。     

分子信标-实时 PCR法快速检测双歧杆菌的研究

为建立双歧制品中双歧杆菌快速、敏感、特异的检测方法,根据双歧杆菌16SrRNA/16SrDNA基因设计合成了双歧杆菌属特异性引物和分子信标探针,建立了快速检测双歧杆菌的分子信标-实时PCR检测方法,并对反应条件进行优化。检测方法重复性好,批内和批间变异系数均小于5%;特异性强,扩增曲线呈现明显的S型,无非特异性扩增;灵敏度高,是普通PCR的100倍,对纯双歧杆菌DNA的检出限为5.7fg/PCR反应体系,纯双歧杆菌菌液的检出限为2×103CFU/mL;线形范围宽,起始模板数在2×108CFU/mL～2×104CFU/mL之间具有良好的线性关系,相关系数大于97%。该方法具有灵敏、特异、简便和快速的特点,可用于对双歧杆菌原位菌数的定量检测。     

液滴检测禽流感

也许存不久的将来．禽流感的检测将非常容易。JuergenPipper和同事发明了一种廉价、快速又有效的液滴检测方法，这种方法能够在30min的时间内从～份鼻咽喉抹检样品中直接检测出禽流感病毒H5N1。新方法还可应用于SARS、艾滋病和乙肝等疾病病毒的检测。     

一种巴西小绿蛙分泌物可治疟疾

巴曲一所大学的研究人员最近发现，一种雨蛙科巴西小绿蛙的皮肤分泌物中所含的成分，可能具有治疗疟疾的功效据当地媒体8月29日报道，巴西利亚大学的研究人员从2001年开始对这种小绿蛙的分泌物进行研究，日前已从中提取出6种蛋白质。检测结果显示，这些蛋白质对疟疾、利什曼病和其他一些病症具有治疗作用。[第一段]     

应用激光显微切割技术检测单个结肠细胞的基因表达

目的：探讨检测单个结肠细胞的基因表达的方法。方法：应用激光显微切割技术(1aser micmdissection)从冰冻切片上将单个结肠细胞切下,提取总RNA,将RNA逆转录成cDNA,采用巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT—PCR)检测mRNA的表达。结果：在显微镜下用紫外激光显微切割机,将单个结肠细胞成功切下,提取RNA后,逆转录成cDNA,经过巢式RT—PCR扩增后,扩增产物在琼脂糖凝胶上清晰可见。结论：联合应用激光显微切割和巢式RT—PCR可以检测单个结肠细胞的基因表达。     

基于双光子激发的荧光相关谱测量

本文利用多光子激发激光扫描显微镜的部分光路和探测器．建立了双光子荧光相关谱系统(Two-Photo Fluorescence Correlation Spectroscopy．简称TP-FCS)。利用TP-FCS系统观察到了“光子爆发”现象．实现了染料分子的双光子激发,测量出若丹明B染料分子在蔗糖溶液中的扩散系数。实验证明该系统具有操作简便、可靠性高,费用低廉等等点,可实现单分子检测。     

免疫细胞分泌研究进展

细胞分泌活动涉及一系列复杂的分子活动和信号转导过程,它是许多重要生命活动如神经递质的释放、内分泌激素分泌、蛋白质转运等的基础。故而有关细胞分泌活动的研究近年在国际上形成一个新的热点。有关免疫细胞中细胞因子的分泌机制研究的较少,将膜电容测量、电化学测量、光学测量、胞内信号分子光解等近年发展起来的生物物理方法引入免疫学领域,对研究免疫细胞的分泌调控和信号转导意义重大。     

小鼠哮喘模型通气功能检测实验器材的改进

通气功能检测可直接反映支气管痉挛等所造成的气道阻力等的改变 ,是判定支气管哮喘动物模型的可靠指标 ,目前国外小鼠支气管哮喘模型多采用此项检测 ,但国内尚未见报道。它的部分实验器材在国内很难仿制 ,哈佛动物呼吸器造价昂贵 ,我们对其器材进行改进 ,并作以简要报道。Ｆｉｇ.1ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｐｐｌｉａｎｃｅｓＡ :ｂｅｆｏｒｅｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ;Ｂ :ａｆｔｅｒｉｍｐｒｏｖｉｎｇＦｉｇ .2Ｄｉａｇｒａｍｍａｔｉｃｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｒｏｄｅｎｔｖｅｎｔｉｌａｔｏｒ1　材料与方法(1)实验器材　①实验…     

应用RT-PCR技术检测动物组织中的口蹄疫病毒*

通过对影响RT-PER检出率的条件和试剂进行了筛选,确定了提取FMDV RNA的最佳方法和试剂,优选出RT-PCR反应的试剂和最佳反应条件,建立了检测口蹄疫病毒核酸的RT-PER方法。应用所建立的方法检测送检的鲜牛奶、淋巴结、脊髓、牛鼻咽拭子,结果阳性率分别为41.4％(24/58)、13.33％(2/15)、20％(1/5)、37.5％(12/32);检测4个屠宰场送检的组织样品40份,结果阳性率为.10％-70％;检测送检的奶粉(1份)、水泡皮(1份)、老鼠(2份)、患儿口腔棉拭子(4份),阳性率均为     

猪源链球菌溶血性的检测*

用平板法和上清法检测了 1 9株猪源链球菌的溶血性 ,并通过加入还原剂或氧化剂分别作活化和抑制试验 ,对各菌株溶血素的性质做了初步鉴定。其中 8株猪链球菌 2型菌株在血平板上的溶血性较弱 ,仅为α溶血或弱 β溶血 ,但在THB和 5 %血清THB中都可产生很强的溶血性 ,其溶血性可被还原剂活化 ,被氧化剂和胆固醇所抑制 ,卵磷脂对其活性则没有影响 ,属于巯基活化类 (类SLO)溶血素。 9株马链球菌兽疫亚种菌株在血平板上呈显著的 β溶血 ,在不含血清THB中不能产生溶血性 ,在含血清的THB中可产生较强的