满族新生儿血红蛋白F中G_γ／A_γ比值测定及其异常者γ－珠蛋白基因图谱分析

以聚丙烯酰胺凝胶电泳方法测定了３３１例辽宁满族新生儿脐带血血红蛋白Ｆ中Ｇγ／Ａγ比值。结果显示：高Ｇγ（＞８０％）者４例,占１．２１％,其基因频率（ｆ）为０．００６０４,低Ｇγ（３０－４８％）者６例,占１．８１％,其基因频率为０．００９０６,其余正常,Ｇγ平均值为６５．２３±６．３８％。未发现ＡγＴ链。对其中八例异常者（４例高Ｇγ值,４例低Ｇγ值）的染色体ＤＮＡ进行了基因图谱分析,确定４例高Ｇγ值者基因型有两种：Ｇγ－Ｇγ／Ｇγ－Ａγ二例,Ｇγ－ＡＧγ－Ａγ／Ｇγ－Ａγ二例;４例低Ｇγ值者基因型有二种,分别为：Ａγ－Ａγ／Ｇγ－Ａγ二例和－ＧＡγ／Ｇγ－Ａγ二例。其中Ａγ－Ａγ基因型在中国人群中未见报道过。     

肥大细胞与肺成纤维细胞共育方法

近年来,肥大细胞(mast cell,MC)对成纤维细胞生长的影响受到人们的关注。MC与成纤维细胞共育方法为研究其影响的重要手段。我们取腹腔MC与同源动物肺成纤维细胞(lung fibroblast,LFB)共育,观察MC对LFB生长的影响,方法基本稳定,国内尚未见报道。现介绍如下。     

人胎儿肝内甲胎蛋白的成份及其对T.B淋巴细胞发育的影响

本文用免疫组织化学方法,分别在冰冻和石蜡切片上,对24例不同胎龄的胎儿肝比较研究了肝内 AFP~+细胞数量及其与 T,B 淋巴细胞之间的关系。结果发现 AFP 仅分布于肝细胞内,其他细胞阴性。不同胎龄的肝脏,AFP 的染色强度和阳性率不同。17周前的胎肝,AFP~+细胞最多以后逐渐减少。出生前的肝脏内只有少数 AFP~+细胞。AFP~+细胞的多少与 B 细胞分化发育无多大关系,但与 T 细胞似乎关系密切,两者呈负相关,即 AFP~+细胞多时,T 细胞很少,AFP~+减少时,T 细胞增加,提示 AFP 对 T 细胞具有抑制作用。同时也证明 B 细胞在胎肝内受 T 细胞的影响不大,主要依赖于肝脏的微环境。另外对 AFP 的生物学意义也进行了讨论。     

基于CRISPR/Cas系统的多重基因编辑与调控技术

规律成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR)及其相关Cas蛋白所构建的CRISPR/Cas系统是古细菌或细菌中特有的一种获得性免疫系统。研究人员将其开发成基因编辑工具之后,凭借其高效、精准和通用性强等优点迅速成为合成生物学领域的热门研究方向,在生命科学、生物工程技术、食品科学及农作物育种等多个领域引发了革命性的影响。目前基于CRISPR/Cas系统单基因编辑与调控技术日益完善,但在多重基因编辑和调控方面仍存在挑战。本文聚焦基于CRISPR/Cas系统的多重基因编辑与调控技术开发及应用,针对单个细胞内实现多位点基因编辑或调控和细胞群体内实现多位点基因编辑或调控技术,依据作用原理对其进行了系统总结和阐述,包括基于CRISPR/Cas系统的双链断裂、单链断裂以及多重基因调控技术等。这些工作丰富了多重基因编辑与调控的工具,为CRISPR/Cas系统在多领域的应用作出了贡献。     

DNA末端硫修饰依赖的体外大片段DNA连接法

【背景】DNA组装技术是基因组合成中的一个关键技术。探索低成本、高效率的基因组合成技术一直是合成生物学的重要研究领域。在某些细菌如变铅青链霉菌中,DNA上有磷硫酰化修饰(简称硫修饰),而在另一些细菌如天蓝色链霉菌中存在一种含有硫修饰识别结构域(sulfur-binding domain, SBD)的识别蛋白,可以特异性识别DNA上的硫修饰,这启发了我们发展出一种新的DNA组装技术。【目的】探究在DNA末端硫修饰的连接中,T4 DNA连接酶与SBD相融合蛋白和单独的T4 DNA连接酶相比,是否有更高的连接效率。【方法】根据同源重组原理,设计硫修饰引物,扩增硫修饰的DNA片段。构建T4 DNA连接酶与SBD融合蛋白的3种表达载体T4-linker-SBD(Hga)、T4-linker-SBD(Spr)和T4-linker-SBD(Mmo),表达纯化以上3种融合蛋白。比较3组浓度梯度(2.4、0.24、0.024 mg/mL) T4 DNA连接酶与融合蛋白在2.5 kb和8.0 kb DNA片段连接上的差异。【结果】DNA末端硫修饰的2.5kb和8.0kb的两端片段均能扩增,而且3种融合蛋白...     

重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶作为角膜保护剂在翼状胬肉手术中的临床应用研究

摘要 目的：探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子（r-bFGF）眼用凝胶在翼状胬肉手术中的临床应用价值。方法：按照随机数字表法,将我院2019年1月~2020年12月期间收治的100例翼状胬肉手术患者分为对照组（n=50）和研究组（n=50）。手术方式均采用翼状胬肉切除联合结膜瓣转移术,对照组术中接受常规处理,研究组在对照组的基础上结合r-bFGF眼用凝胶。对比两组手术效果、眼表相关指标、视力、眼压、不良反应和并发症发生率。结果：两组术后3个月视觉疼痛模拟评分（VAS）、眼表疾病指数（OSDI）下降,泪膜破裂时间（BUT）、基础泪液分泌试验（SIT）升高（P<0.05）,研究组术后3个月VAS、OSDI低于对照组,BUT、SIT高于对照组（P<0.05）。两组术后3个月视力升高,眼压下降（P<0.05）,研究组术后3个月视力高于对照组,眼压低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率比较无差异（P>0.05）。研究组的临床治愈率较对照组高（P<0.05）。研究组的并发症发生率低于对照组（P<0.05）。结论：r-bFGF眼用凝胶用于翼状胬肉手术中,可减少翼状胬肉患者的术后痛苦,改善眼角、视力和眼压症状,获得更好的临床治愈率。     

DNA甲基化与基因表达的后成调控

ＤＮＡ甲基化与基因表达的后成调控钟自力,沈岩（中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京１００００５）关键词甲基化,后成调控最近的一些研究进展使我们对真核生物ＤＮＡ甲基化有了进一步的了解。ＤＮＡ甲基化与基因表达的后成调节（ｅｐｉｇ...