Ca~（2＋）对叶绿素a／b钙结合蛋白波谱学特性的影响（Ⅱ）

用钙螯合亲和层析分离纯化得到的叶绿素ａ／ｂ钙结合蛋白,其荧光发射峰在６８０±１ｎｍ,钙结合后导致荧光发射峰强度降低。当再加入ＥＧＴＡ,螯合钙后,其荧光发射峰强度得以部分恢复。该蛋白在结合钙后,其圆二色谱也发生变化。这些结果表明该蛋白质的构象在结合钙后发生了变化。该蛋白质的荧光激发光谱在４４０ｎｍ和４７０ｎｍ处的激发峰表明此蛋白结合有叶绿素ａ和叶绿索ｂ。本文对叶绿素ａ／ｂ钙结合蛋白在光系统Ⅱ中的可能功能进行了讨论。     

培养乳鼠心肌细胞自发性〔Ca~（2＋）〕_i瞬间变化的实验模型

使用Ｃａ￣（２＋）敏感的荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ,对培养的心肌细胞测定细胞内Ｃａ￣（２＋）的瞬间变化。结果为,在一个心搏周期中,经过大约１８０ｍｓ的时间,［Ｃａ￣（２＋）］＿ｉ瞬间变化达到最大值,然后恢复到基线水平（最小值）,经历了２６０ｍｓ。测得平均［Ｃａ￣（２＋）］＿ｉ瞬间变化的最大值及最小值分别为３４６±３８ｎｍｏｌ／Ｌ和１０２±１８ｎｍｏｌ／Ｌ。血管紧张素Ⅱ１００ｎｍｏｌ／Ｌ引起［Ｃａ￣（２＋）］＿ｉ瞬间变化最大值明显增加,但对［Ｃａ￣（２＋）］＿ｉ瞬间变化的基线水平没有明显的影响。ｒｙａｎｏｄｉｎｅ３μｍｏｌ／Ｌ使［Ｃａ￣（２＋）］＿ｉ瞬间变化的幅度明显降低。ＫＣｌ５０ｍｍｏｌ／Ｌ使［Ｃａ￣（２＋）］＿ｉ瞬间变化完全停止,并明显增加［ｃａ￣（２＋）］＿ｉ的基线水平。结果提示,本实验模型可用来观察［Ｃａ￣（２＋）］＿ｉ的瞬间变化。     

甘蔗组织培养育苗的培养基代用品试验

<正> 引言 几年来,我区甘蔗组织培养工作取得很大成绩。现在组织苗已大面积用于生产,加速了良种推广,因而受到群众的欢迎。然而,组织苗如按常规方法培养,所用的药品特别是琼脂,激素和蔗糖的价格比较高,为寻求成本低、效果好的代用品,特于1980年进行试验,本文报导这一试验的结果。     

在含D-木糖的培养基上利用Petromyces albertensis的生长生产木糖醇

在含D-木糖培养基上培养Petromyces albertensis生产木糖醇和D—木酮糖,用高液相色谱鉴定其发酵产物.从含醋酸铵和酵母膏,初pH7.0的D-木糠培养基内获得了大量的木糖醇.木糖醇的大量产生及其酶相关的产物是在培养10天后进行观察的.D—木糖(100g/L)培养基中增补1%(V/V)甲醇,获得最高木糖醇产量为39.8g/L和D-木酮糖2.8g/L.     

磷酸化和脱磷酸化对牛脑63kD环核苷酸磷酸二酯酶同工酶活性的调节

本文报道了CaM依赖性磷酸化和脱磷酸化对牛脑63kD PDE同工酶活性的调节作用。实验结果如下:(1)在存在Ca²⁺和CaM时,提纯的牛脑Ca²⁺/CaM-PK Ⅱ能催化牛脑63kD PDE同工酶磷酸化。最大磷酸参入量是1mol/mo1亚基;(2)在Ni²⁺和CaM存在时,提纯的牛脑钙调神经磷酸酶能催化磷酸化型63kDPDE同工酶脱磷酸化;(3)CaH²⁺对磷酸化型63kD PDE同工酶的半激活浓度(AC₅₀)高于非磷酸化型。     

我国大豆种子中球蛋白2S组分的分离纯化及部分性质的研究

根据大豆种子球蛋白和清蛋白溶解性不同的原理,分离出我国红丰3号大豆种子球蛋白2S粗制剂,再用SephadexG-100柱层析对其进行纯化。纯化后的球蛋白表现SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳非均一性。对这样纯化过的2s球蛋白进行DEAE-纤维素离子交换柱层析分离,用0.1—0.5mol/L pH7.6磷酸盐缓冲液进行线性梯度洗脱,得到四个洗脱峰,每个峰都获得了PAGE单一条带。四个组分分别命名为SⅡP_1,SⅡP_2,SⅡP_3和SⅡP_4。然后对这四种蛋白质的某些性质进行了研究,结果表明四者的分子量按以上顺序分别为22800,21500,19200和17800。所含残基数分别为191,179,163和147个。SⅡP_1,SⅡP_2和SⅡP_3三者的沉降系数(S_(20),w)分别为2.1S,1.9S和1.8S。N-末端分析表明这四种蛋白质的N-末端均为天门冬氨酸.还发现SⅡP_2具有能抑制α-胰凝乳蛋白酶的活性。本实验所提纯的这个抑制剂的一个ATEE(N-乙酰-L-酪氨酸乙酯)单位为0.4μg抑制剂蛋白(仅指对α-chymotrypsin发生作用)。α-chymotrypsin与此抑制剂相互作用时的摩尔数比初步判断为E/I=2/1。     

苜蓿愈伤组织盐适应过程中的溶质积累

通过一步筛选获得耐1.0％NaCl的苜蓿愈伤组织(S-1)。比较盐适应(S-1)和未经适应愈伤组织(S-0)在1.0％NaCl培养基上溶质积累的情况,渗透势的下降S-0略低于S-1;S-0细胞变小,S-1细胞无明显变化,含水量S-0比S-1下降多,Na~ 和Cl~-大量积累,S-0低于S-1,K~ 浓度升高,但含量下降,S-0比S-1下降多,脯氨酸和可溶性还原糖含量的增加S-0远高于S-1。对于含盐培养基上S-0和S-1渗透调节模式的差异及溶质积累与盐适应的关系,可以认为增加Na~ 和Cl~-积累是苜蓿愈伤组织盐适应的主要方面,脯氨酸和可溶性还原糖的增加在渗透适应上只起部分作用。     

水分胁迫导致小麦叶片光合作用下降的非气孔因素

小麦幼苗根部在不同渗透势溶液(PEG4000)中经受不同时间胁迫,叶片的RWC和水势下降、膜的RP、R_s和C_i升高。同时P_n下降。它还使叶肉细胞内的叶绿体排列发生紊乱、膜受到破坏、基粒间的连接松驰或消失、类囊体片层肿胀和解体、脂质小球增多和淀粉粒消失。相应地叶片的RuBPC活性下降和GO活性升高,从而促进了C_i的累积。此外MDA含量增多是自由基诱发脂质过氧化的结果。这些非气孔因素可能是造成小麦光合作用下降的重要原因。     

高比强〔r-32P〕ATP的合成

高比强〔r—~(32)p〕ATP是核酸结构功能研究中常用标记化合物,它在DNA重组、分子杂交和核酸的结构分析中起着重要作用。下面我们从《Methods in Enzymology》Vol 65摘译合成高比强〔r—~(32)p)ATP的方法供大家参考。 10倍浓度反应液(贮于-20℃,每100μl为一份):