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高比强〔r—~(32)p〕ATP是核酸结构功能研究中常用标记化合物,它在DNA重组、分子杂交和核酸的结构分析中起着重要作用。下面我们从《Methods in Enzymology》Vol 65摘译合成高比强〔r—~(32)p)ATP的方法供大家参考。 10倍浓度反应液(贮于-20℃,每100μl为一份): 相似文献
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若样品纯度较高(即蛋白质、酚、琼脂糖或其他核酸的污染量不大),用紫外分光光度法即简便又准确。测定时,于260 nm与280nm两个波长下读数。通过260nm的读数可计算出样品中核酸的浓度,即10.D.260相当于50 μg/ml双链DNA,40μg/ml单链RNA或 相似文献
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吕俊宣 《中国生物工程杂志》1983,3(1):50-54
引言 琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺电泳技术目前得到了广泛的应用。它们按分子大小分离DNA分子,具有很高的分辨率。从混合物中分离单一种类DNA分子,凝胶电泳既可用于分析又可用作制备。用于制备时一个主要问题是如何从一含DNA的胶带中得到较高的DNA回收率而避免凝胶介质污染。本文拟对回收的方法学作一概述。 相似文献
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吕俊宣 《中国生物工程杂志》1983,3(1):47-50
序列胶 在Maxam-Gilbert化学限制降解及Sanqer的阻断合成序列测定技技中,凝胶电泳按分子大小把寡聚核苷酸片段分开。由两种方法所得到的标记DNA片段都是一端相同而在另一端长短不一。任一片段与其相邻的较小片段相比,总是在其可变端多一个核苷酸。 相似文献
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菌落杂交技术通过RNA-DNA或DNA-DNA杂交能在短时间内筛选出含某些特异DNA序列的细菌克隆。细菌菌落在铺于琼脂平皿中的硝酸纤维素滤膜上培养。影印上述菌落作参比菌落,并于2-4℃保存。裂解滤膜菌落细胞,不必除去细胞残屑,释出DNA作原位变性。放射RNA或DNA探针与滤膜上菌落DNA杂交。 相似文献
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溶液配制方备注IMTris把121。1克Tris碱溶于Rooml水中,所需值。浓盐酸大约用最 7Oml 60ml 42ml溶液冷至室温后,调至所需Pl,值,高压灭菌。用浓魏酸调pH至所需p” PH了.4 P!百7。6 PHS。0定容至1升,分装如果配制后的溶液有黄色,应弃掉,选用高质歇Tri,垂配。有些型号电极不能堆确测量Tris溶液的PH值,但适用的电极有很 多厂家生产n把186.1克EDTANa22HZo加人800ml水中,用磁力搅拌器剧烈搅拌,用NaOH调PH至8.0(约20克固体NaoH),分装。 相似文献
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核酸限制性内切酶是识别双链DNA中专一序列的酶,主要从原核生物中提取。限制性内切酶可分为三类:第Ⅰ和第Ⅲ类酶在同一旦白中具有修饰作用(甲基化作用)和需要ATP的限制性裂解的活性。这两种酶都识别底物DNA中非甲基化的序列,不过第Ⅰ类酶的作用是随机的,第Ⅲ类酶则切DNA的专一位点。 相似文献
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