N-乙酰氨基葡萄糖化在信号转导中的作用

蛋白质磷酸化在生命活动以及信号转导过程中的重要作用已经被研究证实,但不少研究发现在大多数核,胞液蛋白质上不仅存在磷酸化动态修饰,还存在广泛的动态N－乙酰氨基葡萄糖修饰,N－乙酰氨基葡萄糖基转移酶和N－乙酰氨基葡萄糖基酶以类似于蛋白质激酶和磷酸酶的方式调节蛋白质是否发生N－乙酰氨基葡萄糖化。N－乙酰氨基葡萄糖化蛋白质主要分布在细胞核与胞液,其生理功能涉及细胞基本生命活动和调节信号传递。N－乙酰氨基葡萄糖的作用基础与阻断或影响蛋白质的磷酸化有关。     

神经细胞粘附分子与硫酸化氨基聚糖在神经发育、轴突生长、突触可塑性及学习和记忆中的作用

神经细胞粘附分子（neural cell adhesion molecule,NCAM)是一种主要表达于神经系统的糖蛋白,通过亲同性及亲异性结合介导细胞与细胞与细胞外基质间的相互作用,参与细胞的识别,迁移,轴突生长,细胞信号转导,学习和记忆等过程。硫酸化氨基聚糖可调节脑发育中的细胞分化,轴突生长及中枢神经系统中神经元的再生,可能参与了与学习和记忆相关的神经结构功能的调节。这些作用可能与神经细胞粘附分子的亲异性结合有关。     

昆明地区香石竹病毒病流行状况调查及脱病毒苗的制备

对昆明地区3种不同生产模式下的香石竹（Dianthus caryophyllus L.)进行了调查,采集样本146号,利用酶联免疫法和电镜检测法对样本感染香石竹病毒的情况进行检测,结果表明昆明地区主要流行的香石竹为香石竹斑驳病毒和香石竹坏死斑点病毒,以带香石竹斑驳病毒的香石竹品种“俏新朗”为实验材料,研究了直接剥茎尖法,高温处理结合剥茎尖法和病毒痤处理结合剥茎尖法3种方法在脱病毒效率和茎尖成苗率的差异,实验结果表明以加热处理结合剥茎尖法脱病毒效果最好,0.2mm茎尖脱病毒率可达77．78％,加5％病毒座处理对脱病毒有一定的影响,直接剥茎尖法脱病毒效果最差。     

用简并寡核苷酸探针筛选对虾白斑综合征病毒DNA多聚酶基因片段

根据一些病毒的DNA多聚酶氨基酸序列中特有的保守序列VYGDTD设计的简并寡核苷酸,经地高辛标记后与对虾白斑综合征病毒基因库克隆杂交,筛选出一段长度为707 bp的EcoR I基因片段,该片段在一个开放阅读框内.并含DNA多聚酶B家族特有的保守序列YGDTDS.经与基因库比较,其氨基酸序列与藻类DNA病毒科(Phycodnaviridae)的几株藻类病毒的DNA多聚酶片段有部分相似,因此推测该核苷酸片段为对虾白斑综合征病毒DNA多聚酶基因的部分序列.     

西伯利亚蝗辣病毒超微结构和发育及DNA特性

为寻找新的生物治蝗措施 ,采用显微镜和生化方法 ,对 1992年从新疆木垒县西伯利亚蝗上分离的一株痘病毒 (Gomphocerussibiricusentomopoxvirus,GsEPV)的超微结构、发育循环和DNA特性进行了研究 ,结果表明 :该病毒的包含体为球形 ,最大直径约 6 90 μm ,最小直径约 3 95 μm ,平均为 5 33μm。脂肪体超薄切片中的病毒粒子呈椭圆形 ,大小为 2 6 7nm× 10 3nm。病毒粒子髓核折叠成 2～ 3折 ,其横切面呈圆形 ,中间有 3～ 4个电子非致密的圆点。GsEPV主要感染寄主脂肪体。接种后 15～ 2 0天包含体大量形成 ,此时已没有游离病毒粒子存在 ,发育同步 ,并且比其它痘病毒发育周期短。GsEPV -DNA经三种限制性内切酶 HindⅢ、BglⅡ和 EcoRⅠ酶解后分别得到2 0、17和 2 9条片段 ,其分子量分别为 15 5 37× 10 6D ,15 6 45× 10 6D和 15 6 79× 10 6D ,平均为 15 5 37× 10 6D。与已报道的蝗虫痘病毒进行比较 ,这些痘病毒可分为二种类型 :一种包含体为圆形的 ;另一种为椭圆形。形态相似的包含体病毒髓核结构相似 ,分子量也在一个范围内 ,具有椭圆形包含体的痘病毒如OaEPV、CiEPV、MsEPV、AcEPV和PnEPV ,其病毒粒子中DNA链折叠较少 (1～ 2折 ) ,分子量也较小 ,通常在 12 5× 10 6D范围 ;而具有圆形包含体的痘病毒     

小双节RNA病毒中国株基因组第二节段的序列测定及分析

１９９７年从河北省一起成人腹泻暴发病人粪便中首次分离到小双节ＲＮＡ病毒（ｐｉｃｏｂｉｒｎａｖｉｒｕｓ,ＰＢＶ）中国株。为研究该病毒复制必需的依赖ＲＮＡ的ＲＮＡ多聚酶（ＲｄＲｐ）活性机理,采用改进的单引物扩增法克隆和测序了病毒基因组第二节段。结果表明：第二节段全长１６９６个核苷酸,只有一个ＯＲＦ,占全长的９３．９％,编码５３０个氨基酸残基的蛋白,５’－ＮＴＲ ＡＴ丰富（７５．４％）,可能是本位调控元     

鸡痘病毒载体启动子的优化

要提高外源基因在鸡痘病毒（ＦＰＶ）载体的表达量,必须使用强启动子来控制表达。为构建较强的启动子组合,根据痘苗病毒天然启动子Ｐ７．５的结构,人工合成４条寡核苷酸,形成一个早期启动子和一个晚期启动子,其首尾可相互连接。利用分子生物学常用实验方法把合成的启动子进行不同组合,最终形成１０个较有代表性的启动子组合ＰＳ１￣１０。在其下游插入大肠杆菌β－半乳糖苷酸基因ＬａｃＺ,并进一步构建成鸡痘病毒转移载体ｐＦ     

Nuclear apoptosis induced by isolated mitochondria

We isolated and purified mitochondria from mouse livers and spinach leaves.When added into egg extracts of Xenopus laevis,they caused nuclei of mouse liver to undergo apoptotic changes.Chromatin condensation,margination and DNA ladder were observed.After incubating isolated mitochondria in some hypotonic solutions,and centrifuging these mixtures at mgh speed,we got mitochondrial supernatants.It was found that in the absence of cytosolic factor,the supernatant alone was able to induce apoptotic changes in nuclei.The effective components were partly of protein.DNA fragmentation was partly inhibited by caspase inhibitors AC-DEVD-CHO and AC-YVAD-CHO.Meanwhile,caspase inhibitors fully blocked chromatin condensation.Primary characterization of the nuclear endonuclease(s) induced by mitochondrial supernatants was also conducted.It was found that this endonuclease is different from endonuclease G,cytochrome c-induced nuclease,or Ca^2 -activated endonuclease.     

B→O血型转变工具酶α-半乳糖苷酶cDNA克隆及表达

 α-半乳糖苷酶是实现 B→O血型转变、制备通用型血的关键工具酶 .利用反转录 PCR方法从中国海南 Catimor咖啡豆中克隆α-半乳糖苷酶 c DNA,插入嗜甲基酵母 P.pastoris分泌表达载体 p PIC9K中 ,转化 P.pastoris GS1 1 5,筛选高表达重组菌株 .经甲醇诱导表达 7d后 ,发酵液总蛋白分泌量约 1 .2 mg/ml,SDS- PAGE呈现约 41 k D特异表达带 ,与专一性底物对 -硝基 -苯基 -α- D-吡喃半乳糖苷反应证明 ,表达产物具有 α-半乳糖苷酶活性 ,最高达到 1 8U/ml.初步实验表明 ,表达的 α-半乳糖苷酶可酶解 B型红细胞 ,成功实现 B→O血型转变 .     

球形芽孢杆菌的抗药标记及外源DNA的转化与表达

用亚硝基胍（NTG）对球形芽孢杆菌（Bacillussphaericus）进行化学诱变,筛选到利福平（Rif）和链霉素（Sm）二个标记菌株。抗药浓度均达100u／ml培养基。其抗药性状能够获得较好地遗传。用含溶葡球菌酶基因的质粒DNA对RifR菌株进行原生质体转化,酶基因在该抗药菌株中获得了高效表达。经摇瓶发酵试验,溶葡球菌酶的活性约为122u／ml培养液。