全文获取类型
收费全文 | 612篇 |
免费 | 36篇 |
国内免费 | 228篇 |
出版年
2024年 | 3篇 |
2023年 | 16篇 |
2022年 | 23篇 |
2021年 | 18篇 |
2020年 | 8篇 |
2019年 | 20篇 |
2018年 | 15篇 |
2017年 | 10篇 |
2016年 | 20篇 |
2015年 | 20篇 |
2014年 | 33篇 |
2013年 | 18篇 |
2012年 | 26篇 |
2011年 | 29篇 |
2010年 | 24篇 |
2009年 | 29篇 |
2008年 | 43篇 |
2007年 | 35篇 |
2006年 | 34篇 |
2005年 | 34篇 |
2004年 | 30篇 |
2003年 | 42篇 |
2002年 | 34篇 |
2001年 | 30篇 |
2000年 | 33篇 |
1999年 | 21篇 |
1998年 | 22篇 |
1997年 | 19篇 |
1996年 | 19篇 |
1995年 | 25篇 |
1994年 | 16篇 |
1993年 | 14篇 |
1992年 | 25篇 |
1991年 | 19篇 |
1990年 | 15篇 |
1989年 | 17篇 |
1988年 | 5篇 |
1987年 | 6篇 |
1986年 | 5篇 |
1985年 | 11篇 |
1984年 | 7篇 |
1983年 | 2篇 |
1981年 | 1篇 |
排序方式: 共有876条查询结果,搜索用时 640 毫秒
61.
本实验建立了一种新型的利用高正交性的二维制备型高效液相色谱系统分离强极性动物药多肽的方法。本文以塞隆骨水提取物为研究对象,以亲水性C18AQ制备型高效色谱柱为第一维分离柱,首先在一维分离中将目标混合物分成若干组份;然后以C18MP制备型高效液相色谱柱为第二维色谱分离柱,将第一维分离后得到的组份纯化为单体化合物。本研究最终得到5个塞隆骨单体化合物,化合物纯度均超过98%。经Nano-LCESI-MS/MS鉴定和搜库分析,这些多肽的序列分别为:KTAILVKE、RGAPQDQE、LVGPGAPGR、GFAGD和KPQWHP。此研究方法速度快、效率高且重复性好,可以对类似的研究提供借鉴。 相似文献
62.
Intein-mediated rapid purification of recombinant human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide 总被引:3,自引:0,他引:3
In order to obtain the recombinant human PACAP efficiently by intein-mediated single column purification, a gene encoding human PACAP was synthesized and cloned into Escherichia coli expression vector pKYB. The recombinant vector pKY-PAC was transferred into E. coli ER2566 cells and the target protein was over-expressed as 相似文献
63.
垂体腺苷环化酶激活多肽抑制β淀粉样蛋白对Neuro-2a细胞神经毒性作用的机制 总被引:3,自引:0,他引:3
通过MTT方法检测细胞活性 ,同时采用激光共聚焦显微镜技术检测细胞内游离钙离子的瞬时运动 ,研究了垂体腺苷环化酶激活多肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide 2 7,PACAP2 7)通过调节细胞内钙对抗淀粉样蛋白Aβ2 5 35引起Neuro 2a细胞神经毒性作用的可能机制。结果表明 ,PACAP在一定浓度范围内 (<0 1μmol/L)可提高Neuro 2a细胞增殖能力并对抗Aβ引起的神经毒性 ,此作用可以被PACAP受体竞争性拮抗剂PACAP6 2 7所抑制。 2 5 μmol/LAβ使细胞内钙离子缓慢上升 ,并有一个较长时间的平台期。 0 1μmol/L的PACAP使细胞内钙离子迅速升高后下降 ,10min后回到接近基线水平 ,伴有较长时间的不应期。用PACAP预处理细胞 10min后Aβ引起细胞内钙的慢上升不再出现。推测 ,PACAP受体激活引起瞬时内向钙离子运动 ,而后伴随一个较长时间的不应期 ,可能是一个消除凋亡或阻止凋亡启动的保护机制。 相似文献
64.
65.
大鼠甘氨肽酰化单氧酶在CHO细胞中的活怀表达及在体外酰胺化?… 总被引:2,自引:0,他引:2
将大鼠脑CDNA库来源的PAM基因片段,经克隆重组,成真核表达质粒PSV-PAM〈并转染CHO细胞,获得在CHO中稳定表达活性型α-酰胺化酶的细胞株DGAE。 物为双功能酶,分泌至培养基中的酶活力远高于胞内。体外酰胺化加工研究表明。以α-N_acetyl-Tyr-Val-Gly为底物,该酶催化反应的Km为12.5μmol/L,Vmax为180μmol/mg/h,而且催化反应中表现中有最适铜离子浓度 相似文献
66.
植物多肽类化合物研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
本义综述了近年来植物中的寡肽、环肽、环肽生物碱、糖肽的提取分离方法、结构签定及其生物活性等方面的研究进展。 相似文献
67.
以人睾丸组织总RNA为材料,用RT-PCR方法合成了人腺苷酸环化酶激活多肽(ACAP)编码区(530bp)和全长cDNA(1930bp)片段.并分别将这些cDNA片段克隆入pUC18载体的SmaⅠ限制性内切酶位点.对重组质粒分别采用直接DNA双链末端终止法和在核酸外切酶Ⅲ和核酸酶S1作用下连续缺失DNA后,相继克隆,构成一系列连续缺失的缺失体的方法,测定了全部核苷酸顺序.结果表明:ACAP编码区的cDNA顺序与已报道的有12处碱基的改变,其中11处碱基顺序的改变不引起编码的氨基酸变化,只有第385位的T→A后,才引起其编码的氨基酸由Ser→Thr,但由于Ser和Thr的理化性质极其相似,这一变化可能并不导致蛋白质的生物活性的变化.这些改变可能是由于种族、群体或个体的差异. 相似文献
68.
对酶的电荷数随pH变化的定量关系进行了理论推导,将推导出的酶的电荷数与pH的关系式应用于多肽等电点的计算,理论计算结果与文献实验结果完全一致,并推导出酸性氨基酸、碱性氨基酸及中性氨基酸等电点的计算式,与现有计算式完全一致.应用荧光光谱和荧光偏振对肌酸激酶带电性随pH值的变化关系的研究表明,理论计算符合实验结果,表明:此文理论关系式是可靠的. 相似文献
69.
70.
蛋白质及多肽的C端分析 总被引:3,自引:0,他引:3
本文采用(异)硫氰酸化学法,以乙酸酐为活化试剂,四丁铵硫氰酸为偶联试剂,溴甲基萘为烷化试剂,将蛋白质或多肽的C端依次转化并裂解为ATH-氨基酸,在254nm进行检测。分析了若干种天然的、基因工程表达的蛋白质或多肽,测定了不同长度的C端序列,并确证了C端的修饰及突变情况。为蛋白质和多肽的完整性、均一性,基因工程产品及合成多肽的质控提供了重要的C端信息。目前,可在1 ̄2nmol水平上测定了3 ̄5个C端 相似文献