荧光探针在光动力疗法亚细胞损伤位点研究中的应用

目的：应用荧光探针在光动力疗法研究中检测亚细胞损伤位点。方法：传代培养鼠肺毛细血管内皮细胞,将血卟啉单甲醚(HMME)与内皮细胞共同孵育24小时后,加入线粒体探针Bhodamine-123、内质网探针DioC6(3)和溶酶体探针Lucifer yellow分别对细胞器染色。首先采用激光共聚焦显微镜对光敏剂进行亚细胞定位。应用荧光显微镜汞灯照射激发光敏剂的光动力效应,加入ROS探针H2DCF-DA检测产生的单线态氧。分别在激发前后采集Pdloclamine-123、Lucifer yellow和DioC6(3)的荧光图像。结果：线粒体探针Phodamine-123的荧光图像在光动力损伤前后差异显著,原有形态特点发生明显改变;Phodamine-123在光动力损伤后再分布于细胞核区。结论：血卟啉单甲醚介导的光动力效应导致亚细胞水平多位点损伤,线粒体和核膜可能是PDT敏感位点;荧光探针标记检测光动力损伤亚细胞位点方法简便可靠。     

595 nm脉冲染料激光非损伤嫩肤治疗对皮肤羟脯氨酸含量的影响

羟脯氨酸的含量是反映胶原纤维变化的敏感生化指标.本文利用昆明小鼠作为动物模型,研究不同能量的595 nm脉冲染料激光对皮肤羟脯氨酸含量的影响.20只昆明小鼠随机分为两组,1个实验组和1个对照组.三种能量的激光各照射5次,每次间隔3天,光斑有10%的重叠.照射后测皮肤羟脯氨酸含量的变化,SPSS进行数据分析. 8 J/cm2、10 J/cm2和12 J/cm2组羟脯氨酸含量分别比对照组增加39% 、50% 和58%(p<0.05),12 J/cm2能量组的效果最好,但他们之间没有统计学上的显著差异,表明595nm的脉冲染料激光照射能明显增加皮肤羟脯氨酸的含量,用于非损伤嫩肤治疗是有效的.     

骨髓间质干细胞向大鼠损伤心肌组织的迁移

实验旨在动态观察骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）向不同微环境下心肌组织的迁移特点,明确组织损伤在干细胞迁移中的作用,为提高干细胞治疗的靶向性和高效性奠定初步试验基础。分离纯化雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠的骨髓MSCs,输注入雌性SD大鼠。实验分为4组：正常大鼠＋MSCs移植组,假手术＋MSCs移植组,心肌缺血＋MSCs移植组,心肌缺血对照组（心肌缺血＋培养基移植）。结扎冠状动脉前降支制造心肌缺血模型,将相等数量的雄性MSCs经尾静脉注射移植入前3组雌性大鼠体内,对照组注射等体积培养基,分别于移植后1周及8周取心脏组织标本,采用荧光原位杂交方法（fluorescence in situ hybridization,FISH）检测大鼠Y染色体雄性鉴别基因sty片段的表达,用透射电镜观察大鼠心肌组织超微结构改变。结果发现,移植后1周和8周,正常大鼠移植组和对照组大鼠的心肌组织中均未见sry基因的表达,但假手术移植组和心肌缺血移植组的心肌组织中均可见sty基因的表达,心肌缺血移植组的Y染色体sty基因阳性细胞数量在两个时间点均显著高于假手术移植组（P〈0．01）。分别比较心肌缺血移植组和假手术组在移植后1周和8周的Y染色体sry基因阳性细胞的数量,两个时间点无明显差异。心肌组织的超微结构观察发现心肌缺血移植组大鼠的心肌梗死周边区域可见一些细胞,其形态类似于体外培养的MSCs。研究结果提示MSCs具有向损伤心肌组织迁移的特性,迁移的高峰期可能在组织损伤1周左右,组织损伤及其程度在干细胞迁移中起重要作用。     

福建中新世中期三宝木属(大戟科)一新种及其古气候与古生态学意义*

本文描述了发现于福建省漳浦地区佛昙群的三宝木属(Trigonostemon)一新种:漳浦三宝木(Trigonostemon zhangpuensis sp. nov. J.L. Dong et B.N. Sun)。该化石叶片呈倒披针形,基部窄,顶端渐尖;中上部的叶缘具细齿,近叶基1/3的部位全缘;叶脉为羽状环曲脉,中脉粗壮,向上逐渐变细;气孔器为无规则型,气孔呈长椭圆形,分布稀疏,无规则排列;平周壁不光滑,具褶皱。化石种与现生种剑叶三宝木(Trigonostemon xyphophyllorides(Croiz.) L.K. Dai et T.L. Wu)在叶片形态特征方面最为相似。剑叶三宝木分布在我国的海南省,基于化石种与最近亲缘现生种的生态幅基本一致的假设,漳浦地区在中新世中期的气候特征可能类似于现今海南省。化石种叶片上共划分13种损伤类型,属于6类功能性取食组,包括孔洞取食(hole feeding)、边缘取食(margin feeding)、留脉式取食(skeletonization)、表面取食(surface feeding)、造瘿(galling)和刺吸式取食(pierci...     

基于冠状动脉斑块定量分析探讨经皮冠状动脉介入术后心肌损伤的影响因素及预测价值分析

目的：基于冠状动脉斑块定量分析探讨经皮冠状动脉介入（PCI）术后心肌损伤（PMI）的影响因素及预测价值。方法：回顾性分析2020年8月-2022年12月在我院住院并经择期PCI手术治疗的患者251例作为研究对象,根据PCI术后有无血清生物标志物的升高分为PMI阳性组（n=106）和PMI阴性组（n=145）。所有患者术前1周均行冠状动脉CT血管成像（CCTA）检查,且在PCI术前和术后24 h内均测量患者高敏心肌肌钙蛋白T(hs-cTnT)水平。采用半自动斑块分析软件标注并分析斑块特征,主要测量冠脉解剖学狭窄程度并对斑块成分和形态特征进行定量分析。采用单因素方差分析比较两组患者的临床资料和斑块定量指标。通过多因素Logistic回归分析确定PCI术后PMI发生的危险因素。采用受试者工作特征曲线（ROC）分析冠脉斑块定量指标对PCI术后PMI发生的诊断价值。结果：单因素方差分析显示,最大面积狭窄率、斑块总体积、斑块负荷、脂质斑块体积、脂质斑块占比和纤维斑块体积与PCI术后PMI的发生有关（P<0.05）;而斑块长度、管腔最窄处面积、纤维斑块占比、钙化斑块体积、钙化斑块占比、斑点状钙...     

检查点:细胞周期的质量监督

细胞周期的最主要任务是将其基因组ＤＮＡ在ＤＮＡ合成期（Ｓ期）完整地复制成两份拷贝,而后在分裂期（Ｍ期）将这两份拷贝正确无误地分配给两个子代细胞。如果在这一过程中产生错误,又得不到及时纠正,那么将导致基因组的不稳定和变异。对单细胞生物,其后果是导致细胞...     

白细胞介素2(IL-2)基因和γ干扰素(IFN-γ)基因体内转染巨噬细胞对恢复化疗所致免疫功能损伤的研究

用磷酸钙——ＤＮＡ共沉淀法, 将ｐＲＥＰ８ＩＦＮγ真核表达质粒或／和ρＲＥＰ８ＩＬ２ 真核表达质粒直接注射至经大剂量化疗后的小鼠腹腔内, 成功地转染腹腔巨噬细胞（Ｍφ）。ＩＬ２ 基因和ＩＦＮγ基因联合转染Ｍφ较ＩＬ２ 或ＩＦＮγ基因转染Ｍφ, 其基因表达产物水平更高, 显著地刺激脾脏增生, 增强淋巴细胞的增殖, 增强腹腔Ｍφ的细胞毒活性, 促使腹腔Ｍφ分泌白细胞介素１ （ＩＬ１）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ） 和ＮＯ。结果表明, 双基因转染效果优于单基因转染, ＩＬ２ 和ＩＦＮγ基因联合转染Ｍφ更有助于由放疗、化疗所致受损的免疫功能恢复。     

单克隆抗体ELISA测定UVB诱导的DNA损伤

本文采用单克隆抗体酶联免疫吸附分析法测定了ＵＶ－Ｂ诱导ＤＮＡ产生的ＣＰＤ和６－４ＰＰ。经０．５ｍＷ／ｃｍ＾２ＵＶ－Ｂ处理１５ｍｉｎ的小牛胸物鲱鱼精ＤＮＡ,ＣＰＤ和６－４ＰＰ含量显著增加,而未经ＵＶ－Ｂ处理的对照ＤＮＡ则没有二聚体形成。     

血管再狭窄发生过程中MMP-2基因表达与胶原转换的动态变化

建立主动脉内皮剥脱后血管再狭窄大鼠模型,用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹分析、含明胶ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、羟脯氨酸含量测定及流式细胞术动态观察血管再狭窄发生过程中ＭＭＰ－２基因表达与胶原转换及血管细胞增殖之间的关系．实验结果表明,血管内皮剥脱后,ＭＭＰ－２基因表达被显著诱导,ＭＭＰ－２活性及胶原转换明显增高,在第７ ｄ,ＭＭＰ－２表达活性及胶原合成与降解均达到峰值;第２１ ｄ,ＭＭＰ－２表达恢复正常,胶原合成和降解仍维持在较高水平．流式细胞分析结果显示,血管内皮剥脱后进入增殖状态及发生凋亡的细胞显著增加,增殖细胞所占比例高于凋亡细胞,且两者均随内皮损伤后的时间延长而增加．     

中国5种珍稀绢蝶非损伤取样的mtDNA序列及系统进化

应用非损伤性取样ＤＮＡ测序技术测定了４种来自云南白马雪山和１种来自新疆天山的５种珍稀绢蝶的线粒体ＤＮＡ细胞色素ｂ基因部分ＤＮＡ序列。在获得的４３３ｂｐ的序列中,Ａ＋Ｔ约占７５．４％,其中４０个核苷酸位点存在变异（约９．２４％）。ＤＮＡ一级序列数据显示,该５种绢蝶间ＤＮＡ序列变异丰富。ＰＡＵＰ３．１．１（简约法）数据分析软件构建该５个种绢蝶的分子系统树显示,爱珂绢蝶和巴裔绢蝶的亲缘关系比较接近,阿波