枯草杆菌内切葡聚糖酶基因的克隆及表达

以质粒Ｐｕｃ１８为载体,从枯草杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＤＢ１０４基因组中克隆到一个内切葡聚糖酶基因。限制酶切分析表明重组质粒中的插入片段为３.５ｋｂ,其中各含有一个ＥｃｏＲＩ,ＨｉｎｄⅢ和ＰｖｕⅡ位点。该插入片段含有一完整的内切葡聚糖酶基因,其自身启动子能被大肠杆菌转录系统所识别。当加入ｌａｃＺα基因启动子的诱导物ＩＰＴＧ后,内切葡聚糖酶表达量提高２.８倍。加入０.５％葡萄糖能抑制该基因的表达。该基因在大肠杆菌ＤＨ５αＦ′中表达的内切葡聚糖酶分布为：胞外６７.３％,胞间周质３.９％,胞内２８.８％。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实了该插入片段来自供体菌Ｂ．ＳｕｂｔｉｌｉｓＤＢ１０４。     

二氢叶酸还原酶结合底物的去除

分析了应用氨甲蝶呤（MTX-Agarose）亲和层析法提纯的鸡肝二氢叶酸还原酶的组成和性质.建立了用平面粒度胶等电聚焦法去除与酶紧密结合底物的方法．讨论了结合底物对酶构象研究的影响,并指出,用未完全去除结合底物的酶研究酶在变性过程构象变化会得到错误的结论．     

手术室外困难气管插管的预测,实施及有关注意的问题

手术室外困难气管插管的预测、实施及有关注意的问题刘文东,崔骥,陈传宝,陈金良,赵兵,赵颖解放军石家庄第２６０医院麻醉科０５００４１随着急救医学和重症医学的发展,国内各医院相继建立了急诊科、ＩＣＵ、ＣＣＵ、ＲＣＵ等科室,这些科室担负着重症的监测及治疗,...     

萌发花生种子子叶肽链内切酶的纯化和性质

萌发花生种子子叶的肽链内切酶经硫酸铵沉淀,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶层析,ＤＥＡＥ－纤维素２３阴离子交换层析和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０层析,得到纯化的酶,该酶有两条同工酶,分子量分别为５８和５５ＫＤ,Ｋｍ为９．９μｍｏｌ／Ｌ,是半胱氨型肽链内切酶（ＥＣ３．４．２２）,对未萌发花生种子的贮藏蛋白没有明显降解作用．     

血管内照射（He－Ne）对患者外周血淋巴细胞中凋亡细胞（PCD）的影响

本文报道了用氦氖激光血管内照射（ＩＬＩＢ）治疗九例患者过程中,应用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中凋亡细胞的发生,结果提示,照射后凋亡细胞百分率为（６．４３±５．０７％）与照射前比较（０．３８±０．５３％）,ｐ＜０．０５。     

血管镜下静脉血栓切除术及溶栓术

下肢深静脉栓是一个常见而又难处理的疾病,既往采用的气囊导管取栓术和全身溶栓术带有一定的盲目性,作者采用血管镜监控取栓术和局部溶栓术,发现务管镜可以直视监控气囊充胀的程度,由指导气囊导管放到恰当位置,同时睦视检查血栓的性状,位置,阻塞程度,取栓后可直视检查残存血栓的位置和大小,内皮损伤的程度,瓣膜的破坏程度等,并可直视检查静脉嵴的阻塞程度,以指导局部溶栓治疗和决定是行静脉交叉旁路术,使静脉血栓的治疗     

限制性核酸内切酶Bsp 63Ⅰ的纯化及性质研究

用Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ６３菌为材料,经ＤＮＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＣｉｂａｃｒｏｎＢｌｕｅＦ３ＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ两步亲和层析,将Ｂｓｐ６３Ⅰ纯化到均一程度。酶比活力达６１４００Ｕ／ｍｇ蛋白。用凝胶过滤法测得该酶分子量为１１３８００。该酶样品在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中呈现为一条蛋白带,并测得其亚基分子量为５６８００。用ＤＮＳ－Ｃｌ法测得该酶Ｎ－末端氨基酸为丙氨酸。上述结果表明该酶分子是由两个相同亚基组成。     

人前列腺生长因子的分离纯化及生物活性鉴定

从人良性增生前列腺组织中经硫酸铵沉淀和肝素－琼脂糖凝胶层析纯化出人前列腺生长因子（ｈＰＧＦ）,纯化倍数约１０００倍,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳示分子量约为１７ｋＤ、等电点同标准ｂＦＧＦ,利用分离培养的人前列腺间质成纤维细胞进行活性鉴定,发现以１．３～１．７ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ洗脱部分为ｈＰＧＦ,活性最高,对间质成纤维细胞有显著刺激增殖作用。     

一种观察小单孢菌的制片方法

一种观察小单孢菌的制片方法薛景珍,沈音（沈阳农业大学微生物教研室,沈阳１１０１６１）小单孢菌在放线菌中是菌丝纤细、大部分无气生菌丝,菌落湿润的一群。用一般印片法制片,往往印不上或印上很少的孢子和菌丝片断;用涂抹法,虽然可以涂上较多量的孢子和菌丝,但菌...     

食管癌病人运铁蛋白(Tf)和组特异性成份(Gc)亚型分布的研究

应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳法, 分析了潮汕地区216例无血缘关系、临床上诊断为食管癌的病人和216例健康人的运铁蛋白(Tf)亚型分布情况, 结果发现:食管癌病人组TfC1C1纯合子频率为0.2639,Tf*Cl基因频率为0.4745,显著低于正常人组(分别为0.4352和0.6227,均为P<0.0 01);同时,食管癌病人组TfC2C2纯合子频率为0.2278,Tf*C2基因频率为0. 4977,显著高于正常对照组(分别为0.1852,P<0.05,和0.3634,P<0.001)。应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦结合免疫固定法,分析了潮汕地区21 7例无血缘关系的临床上诊断为食管癌病人和 217例健康人的组特异性成份(Gc)亚型的分布,发现两组间无显著性差异。