分泌载体pUS186的构建及地衣杆菌α－淀粉酶基因在枯草杆菌中的表达和分泌

利用枯草杆菌的分泌系统构建分泌型表达载体表达和分泌外源基因产物具有重要的商业价值。我们用鸟枪法克隆了枯草杆菌染色体的启动子和信号肽序列,将克隆的序列连接到能在枯草杆菌中复制的质粒ｐＵＢ１８上,获得分泌型表达载体ｐＵＳ１８６。为了测试构建的载体ｐＵＳ１８６的功能,将地衣杆菌α－淀粉酶基因的缺失了启动子和信号肽序列的片段重组进该质粒,经过Ｂａｌ３１酶切,Ｔ４ＤＮＡ聚合酶补齐等处理,获得ｐＵＳＡ１８６Ⅱ及ｐＵＳＡ１８６Ⅰ系列质粒,将这些重组质粒转化枯草杆菌ＱＢ１１３０（ａｍｙ－）后都能向胞外分泌淀粉酶,酶活测定结果表明,基因表达水平比用原有的启动子高１－２倍,蛋白质分泌率在８４－９６％之间。     

几种氨基酸—铜（Ⅱ）配合物的超氧化物歧化酶活性

用四氮唑蓝光化学还原法对所合成的ＫＣｕ（ＩＤＡ）（Ｓｅｒ）．２Ｈ２Ｏ、ＫＣｕ（ＩＤＡ）（Ａｌａ）．Ｈ２Ｏ、Ｃｕ（ＩＤＡ）（ｅｎ）、ＫＣｕ（ＩＤＡ）（Ｇｌｙ）．Ｈ２Ｏ和Ｃｕ（ＩＤＡ）．２Ｈ２Ｏ（ＩＤＡ＝Ｎ（羧基甲基）－甘氨酸,Ｓｅｒ＝丝氨酸,Ａｌａ＝丙氨酸,ｅｎ＝乙二胺,Ｇｌｙ＝甘氨酸）等５种氨基酸一铜（Ⅱ）配合物进行了活性测定,发现它们均具有天然超氧化物歧化酶活性,其活性依次为０．３４,０．４５．     

白及块茎铜,锌超氧物歧化酶的纯化及其性质

白及（Ｂｌｅｉｌｌａｓｔｒｉａｔａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｒｅｉｃｈｂ．ｆ．）的ＳＯＤ同工酶只有一条较宽的谱带,确认为Ｃｕ·Ｚｎ－ＳＯＤ。其块茎ＳＯＤ总活性和比活性都高,且含有丰富的白及胶;经丙酮分级沉淀,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００凝胶过滤和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析分离纯化,获得对ＣＮ￣－敏感的淡兰色Ｃｕ·ＺｎＳｏＤ粉末。在凝胶电泳染色图谱上,纯化后的酶与粗酶液的ＳＯＤ区带相对应,且其酶活性染色带与蛋白染色带位置对应,表明已纯化到均一程度。该酶分子量约３３ＫＤ,亚基分子量约为１６．４ＫＤ;紫外光区的吸收峰在２６４．６ｎｍ,等电聚焦电泳呈现一条蛋白区带,ｐＨ值在４．３５左右;该酶在ｐＨ６．０～１０．０,温度在５０℃范围内具稳定性。纯化后的酶为４５６３．２ｕ／ｍｇ·蛋白,纯化了５１倍,活力回收为２２．３％。上述酶没有过氧化氢酶活性。提取过程中还得到高质量的副产品白及胶。     

灰茶尺蛾核型多角体病毒某些生化特性的研究

灰茶尺蛾核型多角体病毒某些生化特性的研究李彦章,石正丽,陈棣华（中国科学院武汉病毒研究所,武汉４３００７１）关键词灰茶尺蛾,核型多角体病毒,结构多肽,限制性内切酶图谱灰茶尺蛾核型多角体病毒（Ｅｃｔｒｏｐｉｓｇｒｉｓｅｓｃｅｎｓｎｕｃｌｅａｒｐｏｌｙｈ...     

几种氨基酸─铜（Ⅱ）配合物的超氧化物歧化酶活性

用四氮唑蓝光化学还原法对所合成的ＫＣｕ（ＩＤＡ）（Ｓｅｒ）·２Ｈ２Ｏ、ＫＣｕ（ＩＤＡ）（Ａｌａ）·Ｈ２Ｏ、Ｃｕ（ＩＤＡ）（ｅｎ）、ＫＣｕ（ＩＤＡ）（Ｇｌｙ）·Ｈ２Ｏ和Ｃｕ（ＩＤＡ）·２Ｈ２Ｏ（ＩＤＡ＝Ｎ（羧基甲基）－甘氨酸,Ｓｅｒ＝丝氨酸,Ａｌａ＝丙氨酸,ｅｎ＝乙二胺,Ｇｌｙ＝甘氨酸）等５种氨基酸─铜（Ⅱ）配合物进行了活性测定,发现它们均具有天然超氧化物歧化酶活性,其活性依次为０．３４、０．４５、０．５０、０．５４、０．７２Ｃｕμｍｏｌ·Ｌ－１。     

牙龈组织与钛骨内牙种植体的附着

牙龈与牙种植体颈部的附着是影响牙种植体长期功效的重要因素之一,钛是一种非常理想的牙种植生物材料,在临床上得到较广泛的应用。本文就牙龈组织与种植体钛面的附着、附着机理、种植体钛面的性质、结构对龈附着的影响等研究现状作一综述。     

检测特异性抗体分泌细胞(ASCs)的固相酶联免疫斑(ELISPOT)技术的建立

ＥＬＩＳＰＯＴ技术是目前国外评价疫苗免疫原性和免疫应答机理研究中最常使用的方法。本文用自制的ＮＣ膜２４孔板为固相支持物,建立了检测小鼠脾细胞中特异性ＡＳＣｓ的ＥＬＩＳＰＯＴ技术,在检测方法的特异性、结果的稳定性上均取得了满意的效果。并对该方法的某些实验条件进行了摸索。     

菜豆内切几丁质酶对立枯丝核菌的抗菌作用

菜豆内切几丁质酶对立枯丝核菌的抗菌作用Ｎ．Ｂｅｎｈａｍｏｕｅｔａｌ．］Ｌ－Ｊ“质是由Ｎ一乙撤葡萄糖胺以卜１,４键连接而成的线性多糖,是大部分菌物细胞壁的结构物质。对于立枯丝核菌（尸／ｈ－。ｏｃｔｏｎｄａ。ｃｉａ,,ｉ加ｈｎ）,几了质和卜ｌ,ｓ葡聚精是...