急性前髓细胞性白血病细胞诱导分化实验的研究进展

急性前髓细胞性白血病或急性早幼粒细胞白血病（APL）是一种特殊类型的血液系统恶性克隆性疾病,其特点是异常早幼粒细胞无限增殖伴分化受阻,是白血病中最危重的一种类型。95%以上的APL患者具有（t15;17）染色体异常,形成PML/RAR融合基因,几乎存在于所有的APL细胞中,成为APL细胞的一个特异性标志,是APL发病重要分子基础。自从全反式维甲酸（ATRA）成功用于临床诱导APL分化以来,对诱导分化剂的作用机制的研究已取得很大的进展。本文主要对APL细胞遗传学和分子生物学特征、发病机制、诱导分化机制、分化后细胞表型变化等方面对APL细胞诱导分化实验的研究进展进行综述。     

多序列比对的量子点荧光探针检测金黄色葡萄球菌的研究

利用以量子点（Quantum dot,QD）作为供体、有机荧光染料作为受体的荧光能量共振转移（Fluores—cence resonance energy transfer,FRET）体系检测核酸等大分子是一种非常重要的检测手段。本文构建了一种检测金黄色葡萄球菌种特异性16SrDNA的新方法。此方法以羧基修饰的525nm量子点与氨基修饰的DNA在EDC的作用下通过脱水连接形成QD—DNA复合物作为荧光能量共振转移体系的供体、有机荧光基团ROX修饰的DNA作为荧光能量共振转移体系的受体组成能与金黄色葡萄球菌种特异性16SrDNA杂交的检测探针。当探针与靶序列发生杂交时,作为供体的525nmQD与作为受体的ROX之间的距离被缩短至能有效发生荧光能量共振转移的距离之内。此时,以不能致ROX发光的波长激发量子点发光,其荧光强度下降,而ROX的荧光强度上升。在不存在靶序列的情况下,不会发生这种荧光强度的变化。QD与ROX荧光强度的变化是实现本检测体系快速、简单的重要保证。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂调控干细胞分化与体细胞重编程的研究进展

表观遗传调控,如组蛋白乙酰化修饰,是决定干细胞分化方向的重要机制。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)通过影响不同亚类的组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性,提高组蛋白乙酰化水平,调控基因表达,从而影响胚胎干细胞自我更新,以及沿神经元、心肌和造血等细胞谱系的定向分化。HDACi类小分子化合物在体细胞重编程中也有广泛的应用,可替代致癌因子c-Myc和Klf4,促进体细胞克隆。研究显示,HDACi的效应与药物剂量、细胞类型和细胞分化状态密切相关。本文主要阐述了HDACi在干细胞分化和体细胞重编程中的应用进展,并对所涉及的分子通路进行讨论,有助于揭示干细胞定向分化的关键分子机制,优化干细胞定向分化诱导策略,对干细胞诱导分化具有重要的理论和实用价值。     

钾离子通道蛋白Shaker对果蝇心脏衰老的保护作用

钾离子通道在心肌细胞动作电位复极过程中起着重要作用。钾离子通道蛋白种类繁多,已知钾离子通道蛋白KCNQ和HERG/eag参与心脏动作电位的形成,调节心脏收缩节律。钾离子通道蛋白Shaker是果蝇(Drosophila)体内发现的第一个电压门控钾离子通道,维持神经元和肌肉细胞的电兴奋性,但是目前其在成人心脏功能中的作用仍不清楚。本研究以果蝇为模型,高频电刺激模拟心脏应激状态,观察钾离子通道蛋白shaker基因突变体的心衰发生率。同时,利用心脏特异性启动子hand4.2Gal4特异性敲低钾离子通道蛋白Shaker的表达;果蝇成体心脏生理学功能分析系统分析了1、3、5周龄特异性敲低钾离子通道蛋白Shaker的心脏表型。结果表明,shaker基因突变将严重影响果蝇心脏抗应激能力,表现在高频电刺激后的心力衰竭发生率显著性升高;心脏特异性敲低shaker基因导致5周龄果蝇心律失常发生率显著性增加;心脏特异性敲低HDAC3将显著降低果蝇寿命。综上所述,本研究推测钾离子通道蛋白Shaker在衰老过程中维护果蝇正常的心脏功能。     

重组结核分枝杆菌Hsp16.3的纳米金免疫传感器检测Hsp16.3抗体

克隆和表达结核分枝杆菌热休克蛋白16.3(Hsp16.3),建立纳米金免疫传感器检测结核病患者血清Hsp16.3抗体。PCR扩增hsp16.3基因,构建重组表达质粒pQE30-hsp16.3,表达和纯化Hsp16.3,Western blot分析其反应原性;晶种生长法制备金纳米棒并连接Hsp16.3,建立纳米金免疫传感器检测血清Hsp16.3抗体,接受者操作特性(ROC)曲线评价其灵敏度和特异性。成功构建重组表达质粒pQE30-hsp16.3,纯化Hsp16.3具有良好的反应原性;Hsp16.3的纳米金免疫传感器分别检测50例结核病患者、42例非结核肺病患者和50例体检健康者血清,红移值大于3.5的例数分别为42、7、1例;ROC曲线显示,曲线下面积0.888(P0.01),界值3.5,灵敏度82%,特异性98%。结果表明,Hsp16.3的纳米金免疫传感器可用于检测结核病血清Hsp16.3抗体。     

人脐带间充质干细胞的安全性评价

干细胞治疗作为某些难治性疾病的新型治疗手段,在组织修复、自身免疫疾病和退行性疾病治疗中具有重要的临床价值.本研究以裸鼠为动物模型,通过裸鼠皮下成瘤、克隆形成和端粒酶活性等试验,评估人脐带间充质干细胞的安全性,为干细胞用于临床治疗的安全性提供参考.裸鼠成瘤性试验结果显示,阴性对照组和试验组成瘤数均为0,阳性对照组成瘤数为...     

经口咽入路行枕骨大孔扩大术的解剖学基础研究

目的：对枕骨斜坡骨性结构及周围毗邻关系的解剖学测量,为经口咽入路行枕骨大孔扩大术提供详尽的解剖学数据及理论依据。方法：①选取成人干燥颅骨标本40例,分别测量斜坡颅底内面、颅底外面的长度;斜坡咽结节处宽度、斜坡最小厚度、中部厚度和最大厚度;斜坡与水平面的夹角;颈动脉管外口内缘、颈静脉孔内外口内缘、破裂孔内外口内缘、舌下神经内外口内缘、寰枕关节内缘与斜坡中线的距离。②选取完整头颈部标本20例,观察斜坡与周围血管神经的毗邻关系。结果：①斜坡颅底内面长（40.1±2.5）mm,外面长（28.2±3.1）mm;斜坡中部宽度（18.8±2.5）mm,;最小厚度（6.8±2.3）mm,;中部厚度（9.8±2.2）mm,最大厚度（11.5±1.7）mm;咽结节至枕骨大孔前缘距离（12.8±1.5）mm。②斜坡与水平面的夹角（46.8±4.5）°。③颈动脉管外口内缘距离斜坡中线（26.1±3.1）mm,颈静脉孔内口内缘距离斜坡中线（21.8±2.5）mm,颈静脉孔外口内缘距离斜坡中线（25.1±2.7）mm,破裂孔内口内缘距离斜坡中线（10.5±2.9）mm,破裂孔外口内缘距离斜坡中线（11.8±2.5）mm,舌下神经管内口内缘距离斜坡中线（13.8±2.3）mm,舌下神经管外口内缘距离斜坡中线（21.1±2.3）mm,寰枕关节内缘距离斜坡中线（10.5±2.3）mm。④斜坡上部距离后方基底动脉（7.6±1.0）mm,距离后方脑桥（8.3±1.2）mm,斜坡中部距离后方延髓脑桥沟（13.5±1.7）mm,斜坡下部距离后方延髓（6.5±0.8）mm。⑤斜坡上部与后方硬脑膜之间间隙为（1.8±0.2）mm,斜坡中部与后方硬脑膜之间间隙为（1.3±0.1）mm,斜坡下部与后方硬脑、脊膜之间间隙为（1.3±0.1）mm。⑥在斜坡开骨窗的宽度为20mm,高度为15mm,深度为6mm,可以满足经口咽入路枕骨大孔扩大术的要求,并有可靠的安全性。结论：本研究通过对斜坡骨性结构及周围毗邻关系的测量与观察,为临床斜坡区手术提供解剖学数据。     

半椎板切除全椎管减压治疗退行性腰椎管狭窄症的效果观察

目的:探讨半椎板切除全椎管减压治疗退行性腰椎管狭窄症的手术效果。方法:2005年7月-2009年6月手术治疗退行性腰椎管狭窄症的患者162例,均行半椎板切除全椎管减压结合椎弓根内固定及后外侧植骨融合术。结果:随访6～24个月,平均10.5个月,术后JOA评分由术前的(15.26±5.26)分提高到术后的(21.38±5.16)分(配对t检验P<0.05)。结论:行半椎板切除全椎管减压结合椎弓根内固定及后外侧植骨融合手术治疗腰椎管狭窄症既可以起到椎管彻底减压的目的,又可以尽可能保留脊柱后柱结构的稳定性及完整性。     

依达拉奉联合血栓通治疗高血压脑出血疗效观察

目的:探讨依达拉奉联合血栓通治疗高血压脑出血的临床疗效。方法:将104例高血压脑出血患者按1:1随机分为联合组与对照组,其中联合组采用依达拉奉联合血栓通进行治疗,对照组采用复方丹参治疗,通过观察两组治疗前后神经功能缺损评分(NHSS)、Barthel指数(BI)和血肿变化情况,比较分析对照组与联合组疗效。结果:①联合组基本痊愈率为25.00%,总有效率分别为88.46%,均显著高于对照组(P<0.01或0.05),且未见明显不良反应。②治疗后21d,联合组患者NHSS评分下降和BI评分升高幅度均显著大于对照组(P<0.01或0.05),神经系统功能改善情况优于对照组。③治疗后,患者血肿容积明显减小(P<0.01或0.05),其中联合组血肿容积减少程度和吸收速度均显著大于对照组(P<0.05)。结论:依达拉奉联合血栓通治疗高血压性脑出血疗效显著,能促进神经功能恢复与血肿吸收,值得临床进一步推广。     

104 例重症急性胰腺炎的手术治疗与非手术治疗对比分析

目的:探讨重症急性胰腺炎的有效治疗方法以及施行外科手术治疗的时机与指征.方法:回顾性分析104例重症胰腺炎患者的临床治疗资料,其中63例患者行非手术治疗,41例患者行手术治疗,观察比较患者治愈率、死亡率、并发症发生率、住院时间以及治疗前后血尿淀粉酶的变化.结果:①非手术组与手术组间治愈率、死亡率和平均住院时间无明显差异(P＞0.05),但手术组并发症发生率显著高于非手术组(P＜0.05).②早期手术组与延期手术组间治愈率比较无明显差异(P＞0.05),但延期手术可有效降低患者死亡率与并发症发生率(P＜0.05).③经过治疗,早期与延期手术组患者血尿淀粉酶水平均明显降低(P＜0.01),且早期手术组下降幅度大于延期手术组(P＜0.05).结论:非手术治疗与手术治疗的综合治疗可有效提高SAP的治疗效果,同时手术治疗中应尽量避免早期手术.