PPFP基因促进人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1增殖和迁徙运动能力的体外实验研究

目的:研究PPFP基因对人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1生物学特性的影响,以明确PPFP是否具有致瘤作用。方法以我们前期实验构建的PPFP基因慢病毒载体稳定转染细胞株Nthy-ori 3-1PPFP、空白慢病毒载体稳定转染细胞株Nthy-ori 3-1Vector和未转染细胞株Nthy-ori 3-1为研究对象,以MTT法检测细胞增殖情况,平板克隆形成实验检测克隆形成数,软琼脂集落形成实验检测集落形成率,划痕愈合实验观察各组细胞体外迁徙运动能力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡和细胞周期。结果以Nthy-ori 3-1Vector组和Nthy-ori 3-1组细胞为对照组,Nthy-ori 3-1PPFP组细胞较对照组在细胞增殖能力、平板克隆形成数、软琼脂集落形成率、体外迁徙运动能力均明显提高或增强,而细胞凋亡率明显下降,G0/G1期细胞明显减少,S期及G2/M期细胞则显著增加。结论PPFP基因可显著促进人正常甲状腺细胞Nthyori 3-1的增殖能力,并显著抑制其凋亡和促进其迁徙运动能力,提示该基因可能在滤泡状甲状腺癌恶性增殖和侵袭转移过程中起关键性作用。     

原位鼻咽癌裸鼠模型血清蛋白质组学的研究

利用我室建立的原位鼻咽癌裸鼠模型,建立了稳定性较好的鼻咽癌裸鼠血清蛋白质2-DE方法,并比较了原位鼻咽癌裸鼠血清与对照组裸鼠血清蛋白质2-DE图谱之间的差异.与正常裸鼠血清比较,原位鼻咽癌裸鼠模型组血清增加了4个蛋白质点.利用MALDI-TOF质谱技术对血清差异蛋白点进行鉴定,发现SAA-1前体(serumamyloidA-1 protein precursor)在鼻咽癌裸鼠模型组血清中明显高表达,为寻找鼻咽癌血清生物标志物提供了有利的线索.     

福辛普利对血管紧张素Ⅱ下调大鼠肾小管上皮细胞klotho基因表达的干预作用

目的:研究福辛普利(fosinopril,Fos)对klotho基因表达的影响,探讨Fos对AngⅡ下调klotho基因表达的影响机制。方法:大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)与干预药物共培养。按Fos时间梯度0(对照组),3,6,12,24h和浓度梯度0(对照组),10-9,10-8,10-7,10-6,10-5mol/L分组培养,用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测klotho mRNA表达水平;设A.对照组,B.AngII(10-7mol/L)组,C.Fos(10-5mol/L)组,D.Fos(10-5mol/L)+AngII(10-7mol/L)组,E.Fos(10-5mol/L)干预12h后+AngII(10-7mol/L)共培养组,培养24h,用RT-PCR和免疫组化法检测klotho mRNA和蛋白表达。结果:①Fos对klotho mRNA表达呈时效依赖关系(P0.05),而量效关系不明显(P0.05);②AngII可抑制klotho mRNA和蛋白表达,给予Fos和AngII共同作用,或Fos预先干预后均能抑制AngII下调klotho mRNA表达,组间比较差异具有显著性意义(P均0.05)。结论:Fos对klotho mRNA表达存在时效依赖关系,Fos可能对klotho mRNA和蛋白表达起上调作用,并能抑制AngⅡ对klotho mRNA和蛋白的下调表达。     

美罗华联合CHOP方案与CHOP方案治疗老年复发性弥漫性大B细胞性淋巴瘤的临床研究

目的:探讨美罗华联合CHOP方案与CHOP方案治疗老年复发性弥漫性大B细胞性淋巴瘤的临床疗效和不良反应.方法:选择老年复发性弥漫性大B细胞性淋巴瘤60例,按治疗方案分成研究组(30例)和对照组(n＝30),研究组采用美罗华联合CHOP方案,对照组给予单纯CHOP方案.评估比较两组患者疗效和不良反应,并随访两组患者的生存时间.结果:两组患者均完成治疗及治疗效果评估,研究组CR为10例,PR为15例,总有效率为83.3％(25/30);对照组CR为3例,PR为6例,总有效率为30.0％(9/30),研究组有效率明显高于对照组(X2=8.42,P＜0.05).随访期间,研究组MST、PFS明显长于对照组(P＜0.05).研究组和对照组1年生存率、2年生存率比较,差异有统计学意义(P＜0.01).两组间抗癌药物毒性分度比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:美罗华联合CHOP方案用于老年复发性弥漫性大B细胞淋巴瘤,能明显提高治疗有效率,延长无进展生存期和生存时间,且没有增加老年患者毒副作用,应用安全.     

兔后交叉韧带断裂后外侧胫骨平台退变的组织学研究

目的：探讨兔后交叉韧带（Posterior cruciate ligament,PCL）断裂对外侧胫骨平台组织学的影响。方法：48只家兔膝关节随机配对为实验侧和对照侧造模,造模后第4、8、16、24周各随机处死12只,行外侧胫骨平台大体观察、HE染色、免疫组化检测基质金属蛋白酶13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）、基质金属蛋白酶抑制剂1（Tisse inhibitor-1 of matrix metalloproteinasel,TIMP-1）表达。结果：①大体观察,随时间延长,实验组外侧胫骨平台软骨出现磨损,呈灰黄色,弹性差,骨赘形成。②组织学观察,随时间延长,胫骨平台软骨纤维化,细胞排列紊乱,簇聚细胞出现频率增加。⑧实验组MMP-13、TIMP—1表达均高于对照组,有显著性差异。P〈0．05。④实验组MMP-13、TIMP-1表达阳性率第4、8、16周逐渐升高,24周下降,各组比较有显著性差异,P〈0．05。结论：①兔膝关节PCL断裂会引起外侧胫骨平台软骨退行性变,且该退变随着时间的推移逐渐加重。②MMP-13与TIMP-1在PCL断裂膝关节外侧胫骨平台中的表达呈现先高后低的变化规律,造成MMP-13与T1MP-1的失衡,加速软骨退变。⑨MMP-13与T／MP-1表达增高提示MMP-13与TIMP—1可能参与了PCL断裂后外侧胫骨平台软骨的退变过程。     

围术期应用肼苯哒嗪预防疝修补术后慢性疼痛的研究

目的：探讨肼苯哒嗪对疝修补术后患者慢性疼痛发生率的影响。方法：选择单侧腹股沟疝患者48人,随机分为实验组（T组）和对照组（c组）各24例,在术前3天至术后4天共7天内接受药物或安慰荆治疗。其中T组每日两次,每次10mg肼苯哒嗪,C组同样方式给予安慰剂。测量患者术后4天内的平均动脉）Z（MAP）、心率（HR）、NRS急性疼痛评分以及术后3月、6月S—LANSS慢性疼痛评分。结果：T组患者术后MAP明显低于C组（P〈0．05）,HR两组相比无差异（P〉0．05）;两组患者术后急性疼痛程度相比无统计学差别（P〉0．05）;T组患者在术后3月和6月慢性疼痛发生率明显低于C组（P〈0．05）。结论：常规剂量肼苯哒嗪可以用于术后患者,对疝修补术后急性疼痛无影响,但可以明显降低术后慢性疼痛的发生率。     

改良手术方法在腮腺肿瘤手术中的运用

目的：改良腮腺肿瘤手术方法,以期最大程度恢复术后患者美容及功能。方法：采用以下改良术式：①采用隐蔽的面部除皱切口,避免了常规术式的颈部切口;②采用总干法解剖面神经,减少了面神经周围支损伤的机率;③保留耳大神经,避免术后耳垂麻木;④采用口腔修复膜,减少了术后Frey综合征的发生;⑤采用蒂在上方的胸锁乳突肌肌瓣填塞腮腺切除后的凹陷区,避免了常规术式后的面部畸形。结果：采用该方法对36例患者行腮腺切除术,术后随访6月～4年,患者面部疤痕不明显,外形恢复良好,无面瘫,无Frey综合征出现。结论：改良的腮腺切除术克服了传统术式的缺陷,值得进一步推广和普及。     

经尺骨鹰嘴截骨入路治疗复杂肱骨髁间骨折

目的：探讨经尺骨鹰嘴截骨入路治疗复杂肱骨髁间粉碎性骨折的方法与疗效,为相关治疗提供参考。方法：回顾性分析经尺骨鹰嘴截骨入路双钢板结合螺钉固定手术治疗复杂肱骨髁间骨折患者30例,其中男22例,女8例,年龄范围为19—75岁,平均年龄45.2岁;其中开放性骨折4例,闭合性骨折26例,按Riseborough and Radin骨折分类法,Ⅲ型16例、Ⅳ型14例,术后早期功能锻炼,以Mayo肘关节功能评分为依据比较治疗前后康复效果。结果：随访8．36个月,骨折全部愈合,按Mayo肘关节功能评分,优7例,良19例,可4例,差0例,优良率86．7％。结论：经尺骨鹰嘴截骨入路手术治疗复杂肱骨髁间骨折,显露充分,固定牢固,可早期功能锻炼,疗效满意。     

围术期应用肼苯哒嗪预防疝修补术后慢性疼痛的研究

目的:探讨肼苯哒嗪对疝修补术后患者慢性疼痛发生率的影响。方法:选择单侧腹股沟疝患者48人,随机分为实验组(T组)和对照组(C组)各24例,在术前3天至术后4天共7天内接受药物或安慰剂治疗。其中T组每日两次,每次10mg肼苯哒嗪,C组同样方式给予安慰剂。测量患者术后4天内的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、NRS急性疼痛评分以及术后3月、6月S-LANSS慢性疼痛评分。结果:T组患者术后MAP明显低于C组(P<0.05),HR两组相比无差异(P>0.05);两组患者术后急性疼痛程度相比无统计学差别(P>0.05);T组患者在术后3月和6月慢性疼痛发生率明显低于C组(P<0.05)。结论:常规剂量肼苯哒嗪可以用于术后患者,对疝修补术后急性疼痛无影响,但可以明显降低术后慢性疼痛的发生率。     

湖南地区HBV患者MHC-Ⅰ类链相关基因A第五外显子微卫星多态性研究

分别提取湖南汉族人群108例慢性乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)患者、96例HBV携带者和142例健康对照者外周血基因组DNA,利用聚合酶链反应和基因扫描技术分别对它们的主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关A(major histocompatibility complex class Ⅰ chain related A,MICA)基因第5外显子进行微卫星多态性分析;应用DNA测序分析对不同的基因型进行验证,同时应用PCR/SSP技术进行MICA*Del检测,确定MICA基因第5外显子基因型.发现本研究的三组中分别检出A4、A5、A5.1、A6、A9五种等位基因,且以A5和A5.1为主;在HBV携带组和健康对照组中分别检出MICA* Del基因.结果同时显示慢性HBV患者组MICA*A5.1/A9基因型频率、慢性HBV患者组的MICA*A9等位基因频率、慢性HBV患者组MICA* A9表型频率和HBV携带组MICA*A5.1/A9基因型频率均低于相应的健康对照组;而湖南地区汉族人群HBV携带者和慢性HBV患者间的基因型频率、等位基因频率和表型频率无显著性差异;因而推测MICA*A5.1/A9基因型和MICA*A9等位基因可能是抗HBV感染的一种保护性等位基因.为今后进一步研究HBV的感染、预防和治疗提供参考依据.