红茶菌在脑缺血再灌注损伤大鼠模型中的作用研究

摘要 目的：探讨红茶菌在脑缺血再灌注损伤大鼠模型中是否有改善效果。方法：将48只清洁级SD大鼠根据随机数字表法分为假手术组、模型组、红茶菌组、依达拉奉组。红茶菌组术前给予红茶菌液灌胃7天以及再灌注麻醉清醒后追加灌胃1次,依达拉奉组大鼠在再灌注前15 min经腹腔注射依达拉奉,模型组和假手术组给予生理盐水。遵循Zea Longa线栓法阻断大鼠大脑中动脉血流2 h后恢复再灌注24 h 建立MCAO模型,假手术组大鼠仅分离劲总动脉。再灌注24 h后,神经行为学评分评估脑损伤程度;TTC染色观察红茶菌对大鼠脑梗死面积比的影响并用Image J软件测定梗死面积;HE染色后观察大鼠脑组织皮层神经元病理形态学;透射电镜观察大鼠皮层神经元超微结构及线粒体形态。结果：脑缺血再灌注24 h后,对大鼠进行神经行为学评分,红茶菌组神经神经行为学评分为（2.21±0.60）,依达拉奉组神经行为学评分为（2.01±0.66）,均显著低于模型组（2.52±0.52）（P＜0.05）;TTC染色后观察到模型组大鼠大脑梗死灶明显,红茶菌组与依达拉奉组较模型组大鼠梗死面积明显减小;HE结果显示模型组大脑皮层神经元损伤明显,红茶菌组与依达拉奉组较模型组大脑皮层神经元坏死减轻,梗死面积缩小;透射电镜下观察到模型组大鼠染色质溶解,线粒体肿胀,红茶菌组与依达拉奉组较模型组溶解减少,线粒体结构较完整。结论：红茶菌可减轻脑缺血再灌注损伤大鼠模型的神经元损伤,有望成为改善脑缺血再灌注损伤的疗法或辅助疗法。     

新疆特色药食两用植物恰玛古内生放线菌的分离与鉴定

恰玛古（Qamgur, Brassica rapa L.）内生菌的研究主要集中在内生真菌,内生放线菌的研究报道较少。通过研究新疆药食两用植物恰玛古内生放线菌多样性,以期发现产新活性物质的放线菌或新种放线菌,为研究微生物药物奠定基础。从恰玛古根、茎和叶三个部位分离培养获得内生放线菌,对其菌落与个体形态进行观察,并利用序列测定方法进行鉴定,以获取其分类地位。从恰玛古三个部位共分离得到17株内生放线菌,其中12株为革兰氏阳性杆菌,3株为革兰氏阳性球菌,2株为革兰氏阳性丝状菌;17株内生放线菌分属于红球菌属（Rhodococcus）、拟诺卡氏菌属（Nocardiopsis）、链霉菌属（Streptomyces）、短杆菌属（Brevibacterium）、小短杆菌属（Brachybacterium）、两面神菌属（Janibacter）和微杆菌属（Microbacterium）。从新疆药食两用植物恰玛古中分离获得17株内生放线菌以稀有放线菌为主。     

新疆两盐湖可培养极端嗜盐菌组成及功能多样性研究

【目的】通过分析不同成盐类型盐湖中的极端嗜盐菌群落组成差异,探究可培养极端嗜盐菌的功能特性。【方法】采集新疆硫酸盐型盐湖七角井和碳酸盐型盐湖南湖的土壤样品,通过平板稀释涂布法分离极端嗜盐菌,经过形态学观察、特征分析获取代表菌株,通过耐盐性测定和16S rRNA基因序列测序等对代表菌株进行鉴定,并对极端嗜盐菌的蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和酯酶活性进行筛选,同时检测苯酚降解能力。【结果】本研究共获得1 679株极端嗜盐菌,代表菌株45株,隶属于5门14个属,古菌数量(70.58%)明显多于细菌,最优盐浓度生长范围为18.4%–20.0%。在属水平上,盐湖中优势类群为古菌的Haloterrigena属(32.94%)和Natrialba属(26.03%),以及细菌的Aquisalimonas属(9.85%)和Aliifodinibius属(8.10%)。两盐湖中,盐度较低的南湖物种丰富度高于七角井盐湖,古菌物种组成相似,均以Haloterrigena属为主;细菌群落组成有差异,南湖以Aquisalimonas属为主,而七角井以Aliifodinibius属为主。功能筛选表明,盐湖中80%的嗜盐...     

维吾尔药神香草调节哮喘大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱的实验研究

目的：观察维吾尔药（维药）神香草对哮喘大鼠模型神经内分泌免疫网络若干组分的影响。方法：取雄性健康Wistar大鼠50只,随机分为正常对照组,哮喘模型组,神香草低、中、高剂量治疗组。采用致敏和雾化的方法制备哮喘模型。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血清中白介素-4（IL^4）、白介素-6（IL-6）、干扰素-γ（IFN-γ）、皮质酮（CORT）水平;放免法检测血浆中促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量;采用实时定量-聚合酶链反应（RT—PCR）法测定下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）mRNA表达水平。结果：哮喘反复发作时,大鼠下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴紊乱,哮喘大鼠下丘脑CRHmRNA表达和血浆ACTH无明显变化,实验各组血清CORT水平升高（P〈0．05）,神香草高剂量组血清CORT含量高于低剂量组（P〈0．05）。细胞因子IFN-γ无明显变化,IL-6、IL-4有下降趋势（P〈0．05）。结论：哮喘反复发作的大鼠存在NEI网络的紊乱;神香草可以增强下丘脑．垂体．肾上腺皮质（HPA）轴的功能,改善细胞因子的平衡。这些可能是其治疗哮喘的机制之一。     

氟对人成骨细胞和小鼠骨组织caspase14表达影响

目的:初步探讨氟对人成骨细胞saos-2和小鼠骨组织中caspase14表达的影响。方法:体外建立人成骨细胞染氟模型,以不加入氟入培养基者为空白对照,实验组培养基内分别含氟化钠5、10、20、40 mg/L。以氟化钠加入饮水中,建立小鼠染氟模型。应用Western blot法检测不同剂量氟(0、5、10、20、40 mg/L)对成骨细胞saos-2中caspase14的表达,再用免疫组织化学检测不同染氟剂量(0、50、100、150 mg/L)染氟小鼠骨骼上caspase14的表达情况。结果:Caspase14在成骨细胞saos-2中各实验组表达明显上调(均P0.01),5 mg/L组表达最高。染氟小鼠模型骨组织中亦有表达,染氟组表达均高于对照组(均P0.05),且有逐渐增高趋势。结论:Caspase14在染氟成骨细胞和骨组织中的高表达参与了氟诱导细胞凋亡的过程。     

肾上腺髓质切除对慢性间歇性缺氧大鼠的血管重塑作用

摘要 目的：探究肾上腺髓质切除对慢性间歇性缺氧（CIH）大鼠的血管重塑作用。方法：将32只大鼠随机分为慢性间歇性空气（CIA）假手术组、CIA手术组、CIH假手术组、CIH手术组。制备CIH模型，手术组在缺氧前行肾上腺髓质切除术，假手术组行相同操作但不切除肾上腺髓质。测量尾动脉血压；ELISA法检测血清肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）含量；HE、Masson染色和荧光显微镜观察胸主动脉形态，计算胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数和弹性纤维紊乱断裂比例；IHC观察胸主动脉α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达；TUNEL观察胸主动脉细胞凋亡率；WB检测胸主动脉天冬氨酸半胱氨酸酶-3（Caspase-3）蛋白表达。结果：与CIA假手术组比较，CIH假手术组E、NE、尾动脉收缩压、舒张压、胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数、弹性纤维紊乱断裂比例、α-SMA水平、细胞凋亡率、Caspase-3表达升高（P＜0.05）；与CIH假手术组比较，CIH手术组E、NE、尾动脉收缩压、舒张压、胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数、弹性纤维紊乱断裂比例、α-SMA水平、细胞凋亡率、Caspase-3表达降低（P＜0.05）。结论：切除肾上腺髓质可改善由慢性间歇性缺氧引起的大鼠胸主动脉重塑。     

胚胎与成人三叉神经节细胞形态对比观察

目的：探讨胚胎与成人三叉神经节细胞的形态学特征。方法：采用常规HE染色,运用电子显微超微结构技术及特殊染色,对比观察二者的形态学特征。结果：胚胎与成人三叉神经节细胞大体分布及形态一致,与胚胎三叉神经节细胞相比,成人最突出的特点是节细胞大,核仁清晰,居中。电镜下节细胞的细胞器较丰富,发育完善。且成人三又神经节神细胞明暗区别明显。结论t三叉神经节细胞结构与功能完善是在成年之后,成人三又神经节细胞存在明暗两类细胞。     

Dil对鱼类视觉传导通路的形态学研究

目的：应用Dil染色晶体研究罗非鱼脑、脑神经及其视觉传导路的形态分布。方法：罗非鱼6只,体长12．16ctn,进行灌注固定后,在外科显微镜下开颅并确认脑和脑神经根,分别于双侧视神经植入Dil染色晶体。37℃恒温箱放置3个月,待Dil染色晶体扩散后,取出植入Dil染色晶体的视神经和脑,再根据神经走向切片,通过荧光显微镜观察Dil染色晶体在视觉传导路的形态分布。结果：①外科显微镜下可以观察到罗非鱼的脑分为端脑、中脑、间脑、小脑和延脑5部分,并同时观察到10对脑神经。②右侧视神经植入Dil染色晶体后,均可见到标记的右侧视神经纤维,行向后内,穿经视神经管入颅,逐步靠近左侧视神经,进一步行向后内,经过左侧视神经上方,进行完全交叉,形成视交叉,再经左侧视柬连于左侧间脑视盖。结论：罗非鱼的脑分为5部分,脑神经只有10对。罗非鱼视交叉属于完全性交叉,视觉中枢可能位于间脑视盖内。     

小鼠眼神经注入Dil后三叉神经节的形态学研究

目的：经眼神经注入DiI研究小鼠三叉神经节的形态学结构。方法：小鼠10只,体重25—30克,雌雄不拘,进行灌注固定后,在外科显微镜下开颅并确认三叉神经节和眼神经,分别于双侧眼神经植入DiI染色晶体。37℃恒温箱放置3个月,待DiI染色晶体扩散后,取出植入DiI染色晶体的眼神经和三叉神经节,再根据神经走向切片,通过荧光显微镜观察DiI染色晶体在三又神经节内的分布。结果：眼神经离三叉神经节约1cm处植入DiI染色晶体后,应用荧光显微镜明视野观察,均可见到高密度标记的眼神经纤维,行向后内,穿经眶上裂入颅。逐步靠近三叉神经节外上方,并进入三叉神经节内,眼神经标记的神经元位于三叉神经节的前内侧。在三叉神经节内可见到DiI标记的神经节细胞及神经纤维。神经纤维平行致密排列,并被神经节细胞神经纤维分隔成群或簇。神经节细胞呈圆形和卵圆形,大小不一,部分节细胞呈蜂窝状排列。亦可见神经元的突起,有的呈螺旋状连于胞体,有的呈线状连于胞体,并可见到双极神经元。结论：小鼠经眼神经注入DiI后,三叉神经节细胞和神经纤维的排列循序跟其他动物基本一致。     

鱼类三叉神经运动核的形态学研究

目的:应用生物胞素法观察罗非鱼三叉神经运动核的形态及细胞分布特征.方法:本实验用罗非鱼,15只(性别不限),体长12～16 cm,动物浸入140 mg/L三卡因间氨苯酸乙脂甲磺酸盐{tricaine methanesulfonate (MS222)}溶液中麻醉,在手术显微镜下暴露神经,通过生物胞素(Biocytin)结晶追踪技术研究定位硬骨鱼类三叉神经运动核的形态及细胞分布.结果:①硬骨鱼类罗非鱼的三叉神经运动核分为腹侧和背侧两组细胞群.②三叉神经根注入列中两组细胞群都能观察到被标记的细胞.下颌神经注入列中被标记的细胞以背侧群为主.上颌神经及眼神经注入列中两群细胞都没有发现被标记细胞,但上颌神经组中能观察到神经终末及突触联系.结论:硬骨鱼类罗非鱼的三叉神经运动核分为两组细胞群.三叉神经运动核发出的纤维走行于下颌神经内.