全文获取类型
收费全文 | 42003篇 |
免费 | 3985篇 |
国内免费 | 6018篇 |
出版年
2024年 | 82篇 |
2023年 | 619篇 |
2022年 | 844篇 |
2021年 | 2279篇 |
2020年 | 1656篇 |
2019年 | 2118篇 |
2018年 | 1882篇 |
2017年 | 1419篇 |
2016年 | 1800篇 |
2015年 | 2842篇 |
2014年 | 3396篇 |
2013年 | 3531篇 |
2012年 | 4341篇 |
2011年 | 3805篇 |
2010年 | 2575篇 |
2009年 | 2383篇 |
2008年 | 2595篇 |
2007年 | 2349篇 |
2006年 | 2006篇 |
2005年 | 1726篇 |
2004年 | 1420篇 |
2003年 | 1315篇 |
2002年 | 1076篇 |
2001年 | 648篇 |
2000年 | 538篇 |
1999年 | 533篇 |
1998年 | 388篇 |
1997年 | 278篇 |
1996年 | 263篇 |
1995年 | 203篇 |
1994年 | 209篇 |
1993年 | 128篇 |
1992年 | 138篇 |
1991年 | 111篇 |
1990年 | 88篇 |
1989年 | 78篇 |
1988年 | 62篇 |
1987年 | 59篇 |
1986年 | 43篇 |
1985年 | 55篇 |
1984年 | 21篇 |
1983年 | 24篇 |
1982年 | 18篇 |
1981年 | 18篇 |
1980年 | 4篇 |
1979年 | 7篇 |
1976年 | 4篇 |
1972年 | 4篇 |
1969年 | 4篇 |
1965年 | 3篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 312 毫秒
151.
旋毛虫肌幼虫ES抗原的基因克隆及高效表达 总被引:7,自引:0,他引:7
作者对编码旋毛虫肌幼虫ES抗原的部分结构基因进行了克隆、鉴定和表达。用RNA PCR技术直接从旋毛虫肌幼虫总RNA中反转录并扩增出0.7kh的靶DNA,酶切分析后将其克隆到融合表达载体pEx3lC中。SDS—PAGE电泳表明,含重组子的大肠杆菌能够表达出一分子量为37kDa的融合蛋白(P37),后者占菌体总蛋白的22%以上,并以包含体形式存在于菌体中。经对纯化后表达蛋白的ELlSA检测,证明它能被猪旋毛虫病阳性血清和抗旋毛虫单克隆抗体识别。研究结果揭示,重组蛋白P37对于研制旋毛虫病诊断抗原和免疫抗原具有潜在的应用价值。 相似文献
152.
从水稻根部悬浮培养细胞分离原生质体及植株再生 总被引:3,自引:0,他引:3
以长香稻(Oryza sativa L.)(糯稻)的幼嫩种子根为材料,在Ms和N6培养基上诱导产生结构松软而分散的愈伤组织,经过AA液体培养基振荡悬浮培养,悬浮培养细胞经酶解后得到了活性较高的原生质体,试验结果表明这是分离原生质体较理想的材料。在附加2,4-D lmg/L(以下单位同)、KT(激动素)0.2、各氨酰胺876、天门冬酰胺266的Ms琼脂糖培养基中,诱导出了大量愈伤组织,在含KT2、NAA(α-萘乙酸)0.2、zT(玉米素)0.2、cH(水解酪蛋白)1000和4%椰子汁的N6培养基中成功地诱导出了由原生质体再生的植株。当代原生质体再生植株能正常开花、结实、产生种子;染色体数均为二倍性(2n=24),最显著的特点是结实率低,穗粒数减步、生育期延迟。 相似文献
153.
双价外壳蛋白基因植物表达载体的构建及马铃薯转基因植株的鉴定 总被引:10,自引:0,他引:10
在克隆了马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y 病毒(PVY)和马铃薯卷叶病毒(PLRV)的外壳蛋白基因的基础上,构建同时包含PVX和PVY 与PVY 和PLRV 两个外壳蛋白基因植物表达框架的表达载体,通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化烟草(Nicotianatabacum )和生产上常用的几个马铃薯(Solanum tuberosum )优良品种:“Favorita”、“虎头”、“克4”。经PCR检测证明外源基因已整合到植物的染色体上,得到批量转基因植株。在转PVX+PVY 外壳蛋白基因的烟草上接种PVX (5 μg/m L)、PVY(20 μg/m L)病毒,得到有一定抗性的植株 相似文献
154.
把从榛木(Corylusavellana L.)花粉中分离得到的高尔基囊泡与经高度纯化并聚合好的牛脑微管进行体外组合,然后于1.5 m ol/L的蔗糖层上进行超离心,对其沉淀物进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和电镜负染。结果表明,花粉高尔基囊泡可以结合到牛脑微管上,证明植物花粉的高尔基囊泡与动物细胞的某些细胞器一样,也与细胞骨架的主要组成之一——微管具有结构上的紧密联系。花粉高尔基囊泡与牛脑微管的体外结合能力,受10 m m ol/LATP和0.5 m ol/LKCl的影响,但不受5 m m ol/L AMP-PNP的影响,说明两者结合可能是通过高尔基囊泡表面与ATP有关的某种外周膜蛋白来完成的。 相似文献
155.
扁圆封印木(相似种)茎干的解剖特征 总被引:2,自引:1,他引:1
贵州省水城矿区晚二叠世煤核中扁圆封印木(相似种Sigillaria cf.brardiiBrongn.)茎干的主要解剖特征如下:管状中柱,具多边形薄壁细胞组成的髓。初生木质部成环带状,外缘呈规则的齿槽状,向心式发育。次生木质部显束状特征,横切面管胞为方圆至长方形,纵切面为梯状壁增厚,并具流苏纹。射线1—2列细胞宽,数个至十余个细胞高。叶迹起源于初生木质部外缘的槽中,中始式,但以向心发育为主。 相似文献
156.
几种濒危植物及其近缘类群总DNA的提取与鉴定 总被引:122,自引:0,他引:122
用低pH 介质,高盐沉淀蛋白质方法成功地从银杉(Cathaya argyrophylla Chun etKuang)、矮牡丹(Paeonia suffruticosa var. spontanea)、南川升麻(Cim icifuga nanchuanensisHsiao)、裂叶沙参(Adenophora lobophylla)的同属种泡沙参(A. potaninii)等植物中提取和部分纯化了细胞总DNA,并对其产率、质量和纯度作了鉴定。此方法的关键是用了一个低pH提取介质,它能有效防止组织破碎及沉淀大量材料时的电离化作用及酚化合物的进一步氧化。所得DNA 不需经氯化铯梯度离心或柱层析,直接可用于限制性片断长度多态性(RFLP)及随机扩增的DNA多态性(RAPD)等分子水平的遗传标记。为检测濒危植物的遗传多样性提供了一套迅速、简便和可靠的技术方案 相似文献
157.
Weak antioxidant defenses make the heart a target for damage in copper-deficient rats 总被引:3,自引:0,他引:3
Copper deficiency causes more salient pathologic changes in the heart than in the liver of rats. Although oxidative stress has been implicated in copper deficiency-induced pathogenesis, little is known about the selective toxicity to the heart. Therefore, we examined the relationship between the severity of copper deficiency-induced oxidative damage and the capacity of antioxidant defense in heart and liver to investigate a possible mechanism for the selective cardiotoxicity. Weanling rats were fed a purified diet deficient in copper (0.4 μg/g diet) or one containing adequate copper (6.0 μg/g diet) for 4 weeks. Copper deficiency induced a 2-fold increase in lipid peroxidation in the heart (thiobarbituric assay) but did not alter peroxidation in the liver. The antioxidant enzymatic activities of superoxide dismutase, catalase, and glutathione peroxidase were, respectively, 3-, 50- and 1.5-fold lower in the heart than in the liver, although these enzymatic activities were depressed in both organs by copper deficiency. In addition, the activity of glutathione reductase was 4 times lower in the heart than in the liver. The data suggest that a weak antioxidant defense system in the heart is responsible for the relatively high degree of oxidative damage in copper-deficient hearts. 相似文献
158.
Zhao Ying Hiromasa Tojo Takanori Komatsubara Manabu Nakagawa Masami Inada Sumio Kawata Yuji Matsuzawa Mitsuhiro Okamoto 《生物化学与生物物理学报:疾病的分子基础》1994,1226(2):201-205
Enzyme activity, protein contents, and mRNA contents of group II phospholipase A2 (PLA2) in hepatocellular carcinoma (HCC) surgically obtained from 8 patients were compared with those in either its neighboring liver tissues or control liver tissues. The PLA2 specific activity towards the mixed micelles of 1-palmitoyl-2-oleoyl-phosphatidylglycerol and cholate was significantly greater in the tumor tissues (6.62 ± 1.46 nmol/min/mg) than those in the surrounding liver tissues (1.33 ± 0.22 nmol/min/mg) and controls (0.43 ± 0.04 nmol/min/mg). The results of immunoblot analysis using a specific anti-human group II PLA2 antibody and of Northern blot analysis using a human group II PLA2 cDNA as a probe demonstrated that group II PLA2 was responsible for the increased enzyme activity. The contents of immunoreactive group II PLA2 in the tumor tissues (8.81 ± 1.24 ng/mg) were significantly higher than those in the surrounding liver tissues (1.77 ± 0.27 ng/mg); those in the control tissues were below the analytical range of the method used. The group II PLA2 mRNA was also significantly increased in the tumor tissues, compared with that in the surrounding liver tissues, whereas it was not detectable in th controls. This indicates that group II PLA2 in HCC is induced at the pretranslational level. 相似文献
159.
植物肌动蛋白研究的过去及现状 总被引:7,自引:0,他引:7
肌动蛋白作为一种骨架蛋白广泛存在于植物细胞,有重要的生理功能.综述了植物肌动蛋白的发现及研究现状,着重介绍了植物肌动蛋白的性质、结构和生理功能. 相似文献
160.
通过酶学手段在β-内酰胺酶启动子间隔序列中造成C-17的缺失突变,以氨苄青霉素为底物,检测突变前后β-内酰胺酶活力变化,并作了细菌的Amp耐受性试验,实验结果表明,C-17的缺失突变使启动子强度增加约60%,含有突变启动子的细菌对Amp的抗性明显增强,突变体生长的半抑制浓度为280μg/ml,而在此浓度下野生型菌体吸光度只有突变体的50%左右,对启动子强度增加的原因进行了讨论。 相似文献