儒家文化对医学学生人文素质教育的影响

生物-心理-社会医学模式要求医学学生在提高专业技能的同时,必须要有良好的人文素质和职业道德。人文素质教育中蕴含着丰富的儒家文化思想,汲取儒家文化的精华,对医学学生人文素质教育有着深刻的现实意义。     

抗果蝇Dxl6蛋白抗体的制备及特异性分析

为了研究果蝇中SR蛋白家族新成员Dxl6的功能,通过RT-PCR得到Dxl6的全长cDNA,并根据Dxl6基因产物的功能区,分别将Dxl6中间区域（Dxl6 middle part, Dxl6MP）、Dxl6 C末端RS结构域（Dxl6 RS domain, Dxl6RSD）序列亚克隆至pGEX-4T-1(His)6C 及pET32a 表达载体中,表达和纯化获得融合蛋白。用纯化的融合蛋白GST-Dxl6RSD-His和GST-Dxl6MP-His免疫家兔,分别得到抗Dxl6RSD和抗Dxl6MP两种抗体。WESTERN BLOT结果显示两种抗体能特异地识别在原核表达系统内表达的抗原,抗Dxl6RSD的抗体对果蝇组织中的Dxl6具有较高的特异性。Abstract: In order to study the function of Dxl6 which is a novel member of SR protein family, its cDNA was cloned by RT-PCR, and the sequences of its RS domain and its middle part were subcloned into two fusion express vectors, pGEX-4T-1His（6）C and pET32a. After expressing in E.coli BL21, the truncated proteins of Dxl6 RS domain part and Dxl6 middle part in pGEX-4T-1His（6）C were purified and used to immunize rabbits. Purified antibodies against the RS domain and Dxl6 middle part were obtained by affinity chromatography with the expressed products of Dxl6 RS domain part and Dxl6 middle part in pET32a, respectively. The result shows the antibody against Dxl6 RS domain has a good specificity to Dxl6 in Drosophila larvae by Western blot analysis.     

棕色固氮菌nifS敲除菌株的构建

从Azotobacter vinelandii中通过PCR扩增了5’和3’端分别缺失264bp和261bp的nifS'片段,克隆至载体pUCl8,形成重组质粒pUCS,再通过同源重组的方法,将pUCS插入Azotobacter vinelandii的nifS中,形成够阻断突变体SUl,经Southern杂交和：PCR扩增,证明所得确为nifS阻断突变株。SUl在外加氮源的BBGN培养基中能够快速生长,但在Burk's无氮培养基中,生长却极其缓慢,表明,nifS基因的破坏,已造成SU1的固氮能力接近完全丧失。该突变体的成功构建,为进一步从中纯化固氮酶两组分,研究nifS对固氮酶结构及功能的影响及iscS与nifS之间的关系奠定了良好的基础。     

果蝇中Ecp蛋白的表达、纯化与抗体制备

获得特异性抗Ecp多克隆抗体,为进一步研究ecp的功能奠定基础。利用特异引物,通过RT-PCR扩增出编码Ecp蛋白的全长cDNA,克隆至谷胱甘肽S转移酶融合蛋白表达载体pGEX-4T-1(His)6C中,转染大肠杆菌DH 5α,经诱导表达后,利用谷胱甘肽琼脂糖珠从细胞裂解物中特异吸附融合蛋白,经凝血酶裂解,释放出Ecp蛋白,再经Ni-NTA亲和层析,最终获得高纯度的Ecp蛋白。用纯化的Ecp蛋白免疫新西兰家兔,亲和层析纯化抗Ecp抗体。利用该抗体进行的Western Blot结果表明：Ecp蛋白在野生型黑腹果蝇胚胎、三龄幼虫神经系统、成虫、成虫头部组织中均有明显表达,提示ecp可能是一个重要的管家基因。     

膜结合鸟苷酸激酶蛋白质家族的结构与功能

MAGUKs蛋白家族成员位于细胞表面,通过其PDZ、SH₃、GK结构域调节离子通道受体的聚集,构建细胞骨架,参与信号转导,调控细胞周期进程,并与机体神经发育密切相关.     

在生物学教学中利用学生对鸟类的课外观察

在人体解剖性理学的教学中,对动物进行观察的问题,早就引起我的兴趣。几年来,我在阐明И.П巴甫洛夫条件反射学说时,就用兔子做实验。     

棕色固氮菌nifS敲除菌株的构建*

从Azotobacter vinelandii中通过PCR扩增了5’和3’端分别缺失264bp和261bp的nifS′片段,克隆至载体pUC18,形成重组质粒pUCS,再通过同源重组的方法,将pUCS插入Azoto-bacter vinelandii的nifS中,形成nifS阻断突变体SU1,经Southern杂交和PCR扩增,证明所得确为nifS阻断突变株。SU1在外加氮源的BBGN培养基中能够快速生长,但在Burk's无氮培养基中,生长却极其缓慢     

大伙房水库上游三河系水生植物生态特征及生物效应分析

大伙房水库是我国大型水库之一,位于沈阳、抚顺两个大城市东部。最大库容达2.1×10~9m~3,是沈阳、抚顺两市人民生活用水主要水源之一。水库上游三条主要入库河流(浑河、苏子河和社河)流经清原、新宾、抚顺三县。这三条河的河水较浅,水生生物资源比较丰富。通过对其中水生植物的生态特征和生物效应分析,旨在探讨污染对水生植物群落结构     

β－内酰胺酶启动子C－17缺失对其强度的影响

通过酶学手段在β－内酰胺酶启动子间隔序列中造成Ｃ－１７的缺失突变,以氨苄青霉素为底物,检测突变前后β－内酰胺酶活力变化,并作了细菌的Ａｍｐ耐受性试验,实验结果表明,Ｃ－１７的缺失突变使启动子强度增加约６０％,含有突变启动子的细菌对Ａｍｐ的抗性明显增强,突变体生长的半抑制浓度为２８０μｇ／ｍｌ,而在此浓度下野生型菌体吸光度只有突变体的５０％左右,对启动子强度增加的原因进行了讨论。     

RNAi及DNA芯片分析肝癌细胞系中受DNMT3B调控的下游基因

为揭示DNA甲基转移酶3B（DNMT3B）在肝癌中是否参与了肿瘤的发生,应用Western blotting及细胞免疫化学方法分析DNMT3B蛋白在人的正常肝细胞株、肝癌癌旁细胞株及肝癌癌细胞株中的表达。构建了DNMT3B的RNAi稳定表达的重组载体,并转染人肝癌细胞株SMMC-7721中。以半定量RT-PCR及Western blotting分别鉴定DNM73B RNAi表达载体对内源性DNMT3B的抑制效率。用高通量的cDNA基因芯片分析了SMMC-7721中DNMT3B抑制后有影响的下游基因谱。结果显示,DNMT3B在肝癌细胞株中的表达水平明显高于肝癌癌旁和正常肝细胞株。DNMT3B的RNAi稳定表达重组载体转染SMMC-7721细胞株2个月后,观察到DNMT3B明显受到抑制。cDNA基因芯片分析发现,DNMT3B抑制后诱导26条基因表达下调,115条基因表达上调,包括一些发育相关基因以及肿瘤相关基因,如SNCG、NOTCH1、MBD3、WNT11、MAOA、FACL4等。提示DNMT3B的高表达可能与肝癌的发生有关,并以调控其他相关基因的表达而起作用,包括与发育相关的重要基因。