组织特异RNAi转基因小鼠模型的构建

RNAi是一种行之有效的基因沉默的新方法,被广泛地应用于基因功能的研究、疾病的治疗以及新型疫苗的研制等领域.本研究通过原核显微注射干扰载体的方法制备转基因小鼠.选用皮肤组织特异表达的人源角蛋白14（K14）基因启动子（2000bp）作为表达载体启动子,成功地驱动融合表达载体EGFP-shRNA进行干扰片段前体的转录,进而生成成熟的干扰片段,靶向小鼠BMP4基因使其发生沉默.所得到的转基因小鼠及其杂交后代经PCR和Southern杂交鉴定,结果表明外源基因准确无误地整合到小鼠基因组.Northern杂交结果证明,小干扰RNA在皮肤组织中有较高水平的表达,在肺和肠组织中有较低水平的表达.研究结果表明,利用PolⅡ型（K14）启动子驱动shRNA融合转录本的表达,在特定组织高表达siRNA,从而达到抑制特定组织目的基因表达的技术路线是可行的.同时为利用K14启动子进行毛囊相关基因干扰研究积累了基础数据,为制备组织特异抑制基因表达的转基因大家畜提供了一个参考方法.     

An Approach for Searching Insertions in Bacterial Genes Leading to the Phase Shift of Triplet Periodicity

The concept of the phase shift of triplet periodicity (TP) was used for searching potential DNA insertions in genes from 17 bacterial genomes. A mathematical algorithm for detection of these insertions has been developed. This approach can detect potential insertions and deletions with lengths that are not multiples of three bases, especially insertions of relatively large DNA fragments (>100 bases). New similarity measure between triplet matrixes was employed to improve the sensitivity for detecting the TP phase shift. Sequences of 17,220 bacterial genes with each consisting of more than 1,200 bases were analyzed, and the presence of a TP phase shift has been shown in ~16% of analysed genes (2,809 genes), which is about 4 times more than that detected in our previous work. We propose that shifts of the TP phase may indicate the shifts of reading frame in genes after insertions of the DNA fragments with lengths that are not multiples of three bases. A relationship between the phase shifts of TP and the frame shifts in genes is discussed.     

昆虫机器混合系统研究进展

昆虫机器混合系统是以昆虫为载体,运动性能优异的新型昆虫机器人.本文首先提出昆虫机器混合系统的定义,分析其主要特点;进而结合蜜蜂机器人的研制,评述该领域的主要研究成果.在此基础上,概括了昆虫机器混合系统的研究框架,从神经生理机制、行为刺激方法、电极组织接口、刺激控制微系统和无线数据传输等几个方面归纳其主要研究挑战,分析其发展趋势,并展望了实现生物智能和机器智能融合的昆虫机器混合系统.     

纳米粒子表面修饰对其与细胞膜相互作用的影响

纳米粒子在生物医学上的应用越来越广泛,其进入细胞的机制与规律是设计与开发的基础．已有研究发现,表面修饰不同亲疏水性基团的金纳米粒子,在内吞机制被抑制时,进入细胞的能力明显不同．更特别的是,粒子表面亲水性基团与疏水性基团呈间隔条纹规则排列的纳米粒子,与其他修饰成分相同仅排列不同的纳米粒子进入细胞的规律区别显著．这一特殊现象无法用已有的纳米粒子进入细胞的机制解释．本文针对该研究结果,将纳米粒子与细胞的体系简化,定量分析了3种不同纳米粒子进入细胞前后的不同状态,计算获得了表面修饰不同亲疏水性基团的纳米粒子与细胞膜之间相互作用的Flory．Huggins自由能．结果发现,修饰规则间隔排列亲疏水基团的纳米粒子,其作用自由能在与细胞接触前后变化最大．研究结果不仅解释了实验发现,同时预示了纳米粒子进入细胞的新机制．     

RNA干涉AtSUS3影响拟南芥SUS家族表达模式及角果成熟

蔗糖合成酶（SuSy）是植物蔗糖代谢的关键酶,在植物生长发育过程中起着重要作用.为研究拟南芥中SUS3的功能,构建RNAi-SUS3干涉载体,通过农杆菌介导的真空渗透法转化拟南芥.筛选获得纯系转基因植株后,对AtSUS家族进行表达分析,利用环境扫描电子显微镜观察转基因植株表型,并对转基因拟南芥角果进行木质素组织化学染色以及透射电子显微镜检测.结果表明,RNA干涉技术能够抑制AtSUS3的表达,正常培养条件下该基因沉默后对拟南芥的表型没有显著影响,但可引起角果中AtSUS1,AtSUS2和AtSUS4表达代偿性增加,使转基因植株角果内果皮层细胞次生细胞壁增厚,木质化程度加深,同时果瓣厚度也有增加趋势.结果提示,转基因拟南芥角果的发育较野生型植株更为优先,AtSUS3基因沉默可能有利于角果的成熟.     

TiO_2纳米管阵列的表面特性对猪肾小管上皮细胞生长状态的影响

TiO2纳米管阵列由于其优异的生物相容性及光催化效应,在生物医学领域引起了广泛关注.但能否将肾小管上皮细胞较好地黏附于TiO2纳米管材料并使其发挥肾小管的功能,目前还未见报道.为研究TiO2纳米管材料的表面特性对猪肾小管上皮细胞株（LLC-PK1）的黏附及增殖影响,采用阳极氧化法制备新型高强度的TiO2纳米管阵列,利用荧光显微镜考察了TiO2纳米管阵列光照特性、晶型结构及几何形貌参数对LLC-PK1细胞黏附的影响,采用MTT方法检测了黏附细胞的活性;同时使用扫描电子显微镜观察了4种不同管径上细胞生长的形态,并与纯钛片上细胞的生长形态进行对照.结果表明,管径为70nm的TiO2纳米管阵列膜最有利于LLC-PK1细胞的黏附及增殖,且细胞的活性最高;未经紫外光照射时锐钛矿型的TiO2比无定型更有利于细胞的黏附,然而锐钛矿型TiO2经紫外光照射后会导致细胞凋亡.扫描电子显微镜观察显示,细胞在纳米管上延伸为长条状,而在钛片上则呈堆积平板状.证实TiO2纳米管阵列膜具有良好的生物相容性,有助于改善细胞与材料的黏附.     

单极纺锤体蛋白激酶1一个可能的新型抗肿瘤靶标

纺锤体装配检验点是有丝分裂分裂过程中一个非常重要的监督机器,其作用在于有丝分裂中期向后期转化前将所有的染色体排列到中期板上.近年来的研究表明,该检验点缺陷与肿瘤发生密切相关.单极纺锤体蛋白激酶1是纺锤体装配检验点的必需基因,存在于正常分裂细胞,并在肿瘤组织中高表达.最近研究发现,单极纺锤体蛋白激酶1的表达水平与乳腺癌恶性程度相关. 更有意思的是抑制其激酶活性或降低其蛋白水平将会导致多种肿瘤细胞的纺锤体装配检验点功能缺陷和细胞死亡.这表明,单极纺锤体蛋白激酶1是一个潜在的抗癌药物新靶标.本文对单极纺锤体蛋白激酶1如何调控纺锤体装配检验点以及其在抗肿瘤应用研究中的最新进展进行了回顾.     

C端截短突变体mCCL21-a(1-57)可拮抗CCL21介导的ERK磷酸化及细胞迁移

趋化因子CCL21(CC-chemokine ligand 21,CCL21)与其受体CCR7(CC-chemokine receptor 7,CCR7)的结合可以促进肿瘤的侵袭和转移.本研究旨在构建人趋化因子CCL21的截短突变体,竞争性抑制CCL21与CCR7的结合,从而抑制肿瘤的转移.本研究构建了CCL21的10...     

蝶呤型钼辅因子生物合成、运输及组装——潜在的药物靶标

钼辅因子作为氧化还原反应中的重要分子,参与硫、氮、碳的氧化还原代谢.钼辅因子主要分为两类:以铁硫簇为基础的铁钼辅因子和以亚钼蝶呤为基础的钼辅因子.钼-二-亚钼蝶呤-鸟苷二核苷钼辅因子(Mo-bis-MGD)是蝶呤型钼辅因子的重要成员之一,是硝酸盐还原酶的重要辅因子.膜结合硝酸盐还原酶介导的硝酸盐还原为细菌提供了氮源和能...     

医疗器械库存策略模型的研究

针对医疗器械库存管理的现状,建议采用Silver Meal算法、供应商库存管理（VMI）库存策略,分别对低值、高值器械进行管理,来降低整个医疗物资供应链的库存成本,减少＂牛鞭效应＂的影响,提高供货及时性和准确性,大大改善供应链运作效率。