培养人皮下脂肪干细胞纵向分化的实验研究

目的:建立人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)分离、培养的方法,观察其生物学特性,探讨其纵向分化的能力.方法:自皮下脂肪组织获得梭形细胞,观察细胞生物学特征,免疫组化鉴定波形蛋白和CD44.以含有胰岛素、地塞米松、1.甲基-3-异丁基-黄嘌呤的无血清混合培养基诱导其向脂肪细胞纵向分化,以细胞形态学变化.油红O染色和测定甘油磷酸脱氢酶活性判定分化是否成功.结果:人皮下脂肪中能够分离培养出生长旺盛的脂肪干细胞,诱导培养7d后细胞由梭形逐渐变圆,胞质内出现脂滴后逐渐增多融合为脂泡,并与甘油磷酸脱氢酶活性变化相吻合.油红O染色显示约(78.6±2.2)%细胞转变为脂肪细胞.结论:人皮下脂肪中分离的脂肪干细胞在体外诱导条件下能纵向分化为脂肪细胞,可能成为修复软组织缺损及整形美容的又一干细胞来源.     

眠安胶囊原料药的提取工艺研究

目的:研究眠安胶囊的有效部位及黄芩和琥珀等药材的提取条件.方法:采用正交试验设计,以黄芩苷含量和提取物收率为指标,筛选出了黄芩提取的最佳条件为黄芩粉碎为最粗粉,用10倍水煎煮1.5h后再用8倍量水煎煮0.5h,减压浓缩(60 ℃～70 ℃)煎液至体积为投料量的5倍,于70 ℃加稀盐酸调pH值为1～2,保温30min后静置8h;以药效学为指标,确定了琥珀等药材渗漉提取用乙醇的浓度为70%,同时以药效学和干浸膏得率为指标,通过单因素试验确定了琥珀等药材提取的最优条件为10倍量70%乙醇浸渍24h,调渗漉速度为3 ml·min-1·kg-1进行渗漉提取.结果:眠安胶囊的有效部位为黄芩用水煎煮、琥珀等用乙醇渗漉提取的部位.结论:该工艺稳定,重复性好,适合于眠安胶囊原料药的提取.     

Clonal diversity of Clintonia udensis Trautv. et Mey. populations and its correlation with ecological factors

The clonal diversity of Clintonia udensis Trautv.et Mey.was detected by ISSR markers among 16 populations,and its correlation with ecological factors was analyzed as well in this work.Results showed that individuals(clonal ramets)per genotype were 1.12 and 1.149 at population and species levels,respectively,and that the 16 populations were all multiclonal.The detected genotypes were localized,without exception,within populations but demonstrated relatively high clonal differentiation among populations.The clonal diversity of the studied populations was high,with the average Simpson's index of 0.975,while the genets showed a clonal architecture of"guerilla".The population genetic diversities revealed by genet were consistent with those by ramet,further confirming their genetic differentiation among populations.And its genotype diversity within populations probably resulted largely from the frequent seedling regeneration and self-compatibility.In addition,the correlation analysis further revealed that,among the ecological factors,Simpson's index of C.udensis had a significant positive correlation(P<0.05)with pH values in the soil but not others.     

雌二醇对蒙古绵羊输卵管上皮细胞内β-防御素(sBD-1)表达的影响

为了探索雌二醇与β-防御素(sBD-1)表达量的关系,体外模拟蒙古绵羊(Ovis aries)生理周期.用添加雌二醇浓度10-11、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L的培养液及不添加雌二醇的培养液(即对照组)分别培养蒙古绵羊输卵管上皮细胞,作用24 h、48 h、72 h后,提取细胞总RNA,应用SYBR Green I荧光定量RT-PCR法进行定量分析.结果显示.添加不同浓度雌二醇培养的输卵管上皮细胞中sBD-1的相对表达量0.000 740～0.001 758,与对照组0.000 190之间差异显著(P＜0.05),且小于10-8 mol/L雌二醇添加浓度与sBD-1基因相对表达量变化基本呈正相关.此结果为进一步研究雌激素参与机体防御功能奠定了基础.     

Agouti和Agouti相关蛋白的一些生物学内涵

Agouti 有多方面的意义.首先,它是分属几种不同物种的哺乳动物的俗称.其次,它是一些啮齿类动物的属名.第三,它代表了一种啮齿类动物特有的毛色.第四,它是一个与黑素皮质素受体信号转导途径的调控有关,存在于从人(Homo sapiens)到啮齿类动物,乃至斑马鱼(Danio rerio)的一个特定基因的名称,又是该基因产生的一种特定信号蛋白的名称.Agouti和Agouti相关蛋白是肿瘤、肥胖与糖尿病等人类疾病的研究热点之一.Agouti黄色肥胖小鼠最近成了表观遗传学研究的一个重要模型动物.本文阐述并区分了与agouti有关的一些重要概念与科学术语,并综述了相关领域的研究进展.     

安徽滁州雌性丽斑麻蜥繁殖特征

在安徽滁州地区丽斑麻蜥(Eremias argus)年产两窝卵。窝卵数及窝卵重与雌体体长呈正相关,相对窝卵重与雌体体长无关,卵重与窝卵数无关。窝卵数、窝卵重及卵重在窝序间无明显的差异。卵长径与卵短径呈正相关,卵长径与窝卵数呈负相关,而卵短径与窝卵数无关。雌体主要通过增加窝卵数增加繁殖输出。     

一例疑似黏膜病死亡麋鹿消化及主要免疫器官病理组织学观察

应用常规石蜡切片,H.E染色,对临床初步诊断为黏膜病的一例死亡麋鹿(Elaphodus davidianus)的消化系统及脾、淋巴结进行病理组织学观察。结果表明,消化道的病变主要在黏膜层,黏膜上皮细胞脱落、坏死,固有层内毛细血管充血,炎性细胞浸润;脾主要表现为急性败血型,红髓充血、出血严重,白髓几乎完全消失;淋巴结坏死严重,组织结构被破坏,界限不明显,仅见淋巴细胞弥漫性分布于整个淋巴结内。病理组织学观察为临床诊断提供了形态学依据。     

烟草炭疽病拮抗生防菌的筛选

本文应用荧光假单胞杆菌的16S-23S ribosomal RNA序列以及部分抗菌素合成基因序列的PCR鉴定引物,对从烟草根际分离到的400份细菌进行了鉴定,结果获得了21份含Prn(硝吡咯菌素)合成酶基因的荧光假单胞杆菌和1份含有DAPG(2,4-二乙酰基藤黄酚)合成酶基因以及PCA(Phenazine-1-carboxylic acid,吩嗪-1-羧酸)的荧光假单胞杆菌.室内实验结果表日月,含DAPG和PCA的荧光假单胞杆菌对烟草炭疽病具有明显拮抗作用.     

苹果浓缩汁中嗜酸耐热菌的分离与鉴定

为了解和控制浓缩苹果汁中的嗜酸耐热菌,采用酸化的凯氏培养基对苹果浓缩汁中的耐热菌进行分离、培养和鉴定,并与标准菌株Aliyclobacillus acidoterrestris DSM3922进行了比较分析.结果表明,分离到的2株污染菌均可以在21℃～55℃温度范围及2.4～6.2的pH值范围内生长,符合脂环酸芽胞杆菌属嗜酸耐热的特点.经与标准菌株的细胞、菌落形态观察、生长条件和生理生化反应等方面的比较表明,2株分离菌与标准菌株Aliyclobacillus acidoterrestris DSM3922有明显的相似特征.     

米根霉菌ldhL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

以米根霉菌基因组DNA为模板,根据GenBank上已公布的米根霉L-乳酸脱氢酶基因(ldhL)序列设计特异性引物,PCR扩增得到963 bp的DNA片段,经序列分析后将其亚克隆到原核表达载体pET30a上,构建成重组质粒pET30a-ldhL.将pET30a-ldhL转化到BL21感受态细菌中,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析,可见约43 kD的与预期大小一致的目的蛋白条带,结果表明ldhL基因在大肠杆菌中进行了表达,经酶活分析产物的酶活力为98 U/mL,证明了表达产物具有预期的酶活性,这为进一步研究利用乳清为发酵原料高产L-乳酸的米根霉基因工程菌株奠定了基础.